基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的作用

目的基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点基因和信号通路。方法通过TCMSP数据库检索六味顺激方中药物活性成分和靶点基因,与DisGeNET、Pharm和CTD数据库中获取的肠易激综合征疾病靶点相映射,并基于GEO数据库筛选肠易激综合征与健康人差异基因,采用R语言和Cytoscape软件对关键靶点基因进行蛋白质相互作用网络(PPI)、基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。基于脂多糖诱导的NCM460细胞模型,通过流式细胞术、免疫荧光、ELISA、Western blot、RT-qPCR法对关键靶点基因进行验证。结果检索得到六味顺激方活性成分85个,药物靶点274个,肠易激综合征相关靶点416个,药物和疾病交集靶点82个,其中人血管内皮生长因子A(VEGF-A)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、蛋白激酶(Akt1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、原癌基因(JUN)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞趋化因子8(CXCL8)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、细胞趋化因子2(CCL2)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)是六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点,细胞对脂多糖的应答和TNF信号通路可能是六味顺激方治疗肠易激综合征的效应机制。细胞实验结果显示,六味顺激方在降低VEGFR表达的同时抑制MAPK信号通路的主要下游靶点蛋白(ERK、JNK和JUN),进而减少炎症因子、趋化因子、血管生成因子和黏附因子的释放,缓解细胞凋亡同时抑制炎症反应恶性循环,从而缓解肠易激综合征。结论六味顺激方能通过多靶点、多通路发挥治疗肠易激综合征的效应,其机制可能是通过靶向抑制VEGFR并抑制MAPK信号通路下游关键蛋白改善血管生成、炎症反应。

不同时期NICS检测在平衡易位患者PGT治疗中的临床应用

目的评估不同时期NICS检测在平衡易位患者PGT治疗中应用的可行性。方法分析检测结果(包括检测成功和检测失败)和CNVs结果(包括正常和和异常)2个变量;根据样本类别,分成D3培养液(D3NICS)、D5培养液(D5 NICS)和整胚及活检细胞(胚胎/TE)组,对各组之间的检测失败率和CNVs结果分布进行比较。结果D3 NICS检测失败率和CNVs结果分布同胚胎/TE组相比,差异有统计学意义(P<0.001/P<0.01);D5 NICS组的检测失败率结果和CNVs结果分布同胚胎/TE组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论相对于D3 NICS,D5 NICS在平衡易位患者胚胎的诊断应用上更有优势。作为一种无损检测手段,随着操作方法和测序技术的进步,有望替代传统活检技术用于平衡易位患者胚胎的临床诊断。

黄芩汤治疗慢性复发型溃疡性结肠炎大肠湿热证小鼠的作用机制研究

目的探讨黄芩汤在慢性复发型溃疡性结肠炎大肠湿热证(UCM)中清热利湿的作用机理。方法将40只小鼠随机分为正常组、模型组及黄芩汤低、中、高剂量组。模型组小鼠使用人工气候箱、白酒、高脂饲料及不同浓度的葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液联合诱导;黄芩汤组在造模第35天至第44天给予不同剂量黄芩汤干扰;实验期间,观察小鼠一般情况,包含体质量、饮食、粪便等,并进行湿热评分、疾病活动指数(DAI)评分;通过课题组研发的My color软件检测爪尾红色值占比变化;HE染色观察结肠及舌组织病理变化;检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)含量;Western Blot法检测结肠组织中水通道蛋白及NF-κB信号通路相关蛋白表达量;ELISA法检测干扰素γ(IFN-γ)、脂多糖(LPS)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、血栓素B2(TXB2)含量;qRT-PCR法检测结肠组织中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和Toll样受体4(TLR4)表达水平。结果与正常组比较,模型组体质量降低,DAI评分、湿热评分、爪尾红色值占比增加;舌组织丝状乳头紊乱、角质层增厚,结肠组织受损严重,长度缩短;结肠组织TXB2、IFN-γ含量、血清MIF含量增加,LPS水平增加;血清SOD活性降低、MPO活性增加;IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA水平上升;结肠AQP1、AQP3、AQP8蛋白表达降低;IκB磷酸化增加,核外p65表达减少,核内p65表达增加,TLR4 mRNA水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,黄芩汤高剂量组体质量下降幅度减少,DAI评分、湿热评分降低,爪尾图像红色比例下降,结肠长度增加,病理情况改善,血清中的MPO、MIF、LPS水平降低,SOD含量增加,结肠组织中的TXB2、IFN-γ水平减少,IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA水平下调,结肠AQP1、AQP3、AQP8蛋白表达增高,TLR4 mRNA水平下降,IκB磷酸化减少,核外p65表达增加,核内p65表达减少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩汤对慢性复发型UC大肠湿热证小鼠模型有明显的治疗作用,其清热利湿机理可能与抑制NF-κB信号通路介导的肠道水液紊乱相关。

黄芩汤治疗溃疡性结肠炎分子作用机制的网络药理学研究

目的基于网络药理学探讨黄芩汤治疗溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)的分子作用机制。方法通过TCMSP数据库筛选黄芩汤的潜在活性成分(OB≥30%,DL≥0.18),采用Swiss数据库预测其作用靶点;与Disgenet数据库获得的UC疾病靶点相映射,得到黄芩汤治疗UC的潜在靶点。利用Cytoscape软件构建"黄芩汤-活性化合物-潜在作用靶点"网络和蛋白质相互作用网络,并使用David数据库对黄芩汤的作用靶点进行GO生物功能分析和KEGG通路富集分析。结果得到黄芩汤治疗UC关键靶点58个;甘草苷(Liquiritin)、甘草吡喃香豆酮(Licopyranocoumarin)、黄芩黄素(Baicalein)、黄连碱(Coptisine)、汉黄芩素(Wogonin)、鲨烯(Supraene)等可能是黄芩汤治疗UC的主要活性成分;其作用于ESR1、PTGS1、PTGS2、PTPN2、ABCG2等靶点,参与转录调控、低氧反应以及药物反应等生物过程,通过Ras-PI3K-Akt通路、Ras-PI3K-Akt-HIF-1α通路、NF-κB通路及MAPK-PI3K/AKT通路等发挥治疗UC的作用。结论黄酮类化合物在黄芩汤抗UC的作用机制中具有重要意义,调节炎症通路及干预炎症的发生发展可能是黄芩汤抗UC作用的重要机制。

基于整体观探讨《伤寒杂病论》中杏仁的用法

目的:从整体观的角度研究《伤寒论》和《金匮要略》中杏仁的用法。方法:对《伤寒论》和《金匮要略》中使用杏仁的方剂,通过研究其不同的配伍、剂量和炮制方法,探讨方剂中杏仁的作用。结果:杏仁配麻黄以治卫阳被郁,杏仁配茯苓以治水饮内停,杏仁配厚朴以治肺气上逆,杏仁配麻子仁以治腑气不通;根据功效选用合适的炮制法;根据病性选择合适的药物剂量。结论:仲景在整体观的基础上灵活运用杏仁,使杏仁可表可里,可气可血,活用精当,组方严谨,可指导临床用药组方。

基于网络药理学探讨骨碎补抗骨质疏松的分子作用机制

目的构建骨碎补活性成分-作用靶点网络和蛋白相互作用网络,分析靶点涉及的生物过程和通路,研究骨碎补抗骨质疏松( osteoporosis,OP)的潜在机制。方法通过TCMSP 数据库筛选骨碎补的活性成分,用Swiss 数据库预测其靶点,与Disgenet 数据库获得的OP 靶点相映射,得到骨碎补抗OP 的潜在靶点。利用Cytoscape 构建“骨碎补-活性化合物-潜在靶点”网络,采用String 数据库和Cytoscape 构建蛋白相互作用网。利用David 数据库进行GO 生物功能和KEGG 通路富集分析。结果得到骨碎补活性成分18 个,其治疗OP 的潜在靶点24 个。成分豆甾醇( stigmasterol)、β-谷甾醇( beta-sitosterol)、黄烷酮( Eriodyctiol ( flavanone))、山奈酚( kaempferol)、柚皮素( naringenin)、圣草酚( eriodictyol)和环木菠萝烷醇( cycloartenone)能与5个以上靶点相连,为骨碎补抗OP 的主要成分。靶点CYP19A1 与成分连接次数为8 次,对骨碎补抗OP 具有重要意义;CYP1B1 为4 次,MMP1、CA2、CYP17A1、ESR1、MMP13、LDLR、CYP1A1、MMP2 均为3 次,对骨碎补抗OP 有较大意义。GO 生物过程和KEGG 富集分析显示,骨碎补抗OP 主要涉及氧化还原过程( oxidation-reduction process)、基因表达正调控( positiveregulation of gene expression)、类固醇代谢) steroid metabolic process)、RNA 聚合酶Ⅱ启动子的转录起始( transcription initiationfrom RNA polymerase II promoter)等生物学过程,通过调节代谢通路( Metabolic pathways)、类固醇激素生物合成( Steroidhormone biosynthesis)、卵巢类固醇生成( Ovarian steroidogenesis)、癌症通路( Pathways in cancer)等通路发挥抗OP 作用。结论本研究体现骨碎补多成分、多靶点、多途径的作用特点,为阐释其治疗OP 的作用机制提供了科学依据,为进一步开展骨碎补抗OP 分子作用机制的研究以及新药开发等提供了新思路和新方法。

黄芩汤通过调节ILC3s-Th细胞反应减轻小鼠的溃疡性结肠炎

目的探讨黄芩汤在治疗溃疡性结肠炎(UC)过程中对三型固有淋巴细胞(ILC3)及辅助性T细胞(Th)免疫反应的调控作用。方法将雄性Balb/c小鼠随机分为6组:正常组、模型组、美沙拉嗪组、黄芩汤低、中、高剂量组(HL,2.275 g/kg;HM,4.55 g/kg;HH,9.1 g/kg)。各组自由饮食,除正常组自由饮用蒸馏水外,其余各组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠溶液,持续7d以建立UC模型,同时美沙拉嗪组和黄芩汤低、中、高剂量组小鼠每日分别给予美沙拉嗪及低、中、高剂量黄芩汤灌胃1次。流式细胞术分析结肠固有层淋巴细胞中ILC3s细胞比例及其表面主要组织相容性复合物Ⅱ类(MHCⅡ)分子表达变化以及Th细胞中Th1与调节性T细胞(Treg)的比例变化。采用Milliplex多因子测定方法检测结肠组织中多个细胞因子含量的变化。结果与模型组相比,黄芩汤各剂量组小鼠溃疡性结肠炎症状得以缓解,疾病活动指数评分及宏观评分下降(P<0.001)。流式细胞术结果表明,黄芩汤各剂量组小鼠结肠中ILC3s细胞比例增加(P<0.05)且MHCⅡ分子表达增多(P<0.05),其中黄芩汤低、中剂量组Th1细胞比例降低(P<0.05)而Treg细胞比例增加(P<0.05)。Milliplex多因子测定结果表明,黄芩汤各剂量组小鼠结肠组织中Th细胞相关的促炎性细胞因子如白介素-2、白介素-17A、白介素-23、α肿瘤坏死因子、γ干扰素含量降低(P<0.05)。结论黄芩汤通过增加ILC3s细胞数目及其MHCⅡ的表达,调节Th细胞免疫反应,从而缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎。

运用雷达图多元评价近10年中药内服治疗溃疡性结肠炎的系统评价/Meta分析文献质量

目的运用雷达图的可视化多元评价中药内服治疗溃疡性结肠炎的系统评价/Meta分析文献的质量,为临床提供更清晰、更科学的决策依据。方法两位研究员独立地进行计算机检索The CochraneLibrary、Embase、Pub Med、Elsevier、Web of science、CNKI、VIP、CBM与Wan Fang,搜集中药内服治疗溃疡性结肠炎的系统评价/Meta分析,检索时限为2010年1月至2020年6月,并进行资料提取,从发表年份、同质性、研究类型、发表风险偏倚、AMSTAR 2以及PRISMA六个方面对纳入文献进行多元评价。使用GRADE工具对纳入研究的结局指标进行质量分级评估。结果本研究最终纳入13篇系统评价/Meta分析,根据多元评价结果,所有文献秩数平均分为8.82分,其中方法学质量和报告学质量偏低是影响文献质量的主要原因,文献年份、研究类型与发表偏倚情况为文献质量短板的次要来源。GRADE证据显示16个为高质量,12个为中质量,15个为低质量,7个为极低质量。结论中药内服治疗溃疡性结肠炎的系统评价/Meta分析质量参差不齐,且整体偏低,需从设计项目方案入手,进一步提高质量为临床决策提供更可靠的证据。

基于《伤寒论·辨厥阴病脉证并治》探讨肝主敷和

元·朱丹溪《格致余论·阳有余而阴不足论》中指出:"主闭藏者肾也,司疏泄者肝也。二者皆有相火,而其系上属于心。心,君火也,为物所感则动。心动则相火亦动,动则精自走,相火翁然而起,虽不交会,亦暗流而疏泄矣。"[1]首次明确提出"肝主疏泄",指肝主肾精的排泄。随着后世医家对"肝主疏泄"理论的发展研究,"肝主疏泄"成为中医脏腑理论的重要内容之一。

人类胚胎干细胞DNA损伤修复机制的研究进展

胚胎干细胞具有显著的增殖和分化发育能力,因此在细胞治疗、疾病建模和药物研发方面具有巨大的潜力。但高效的全能性却导致其往往伴随基因组的不稳定性,尤其在DNA损伤方面更加凸显。人类胚胎干细胞拥有特殊的修复机制,用以避免这类损伤在细胞内的积累或向子代的传递,进而保障自我复制和分化发育的准确性和安全性。本文对人类胚胎干细胞DNA损伤的修复机制进行了总结,旨在为结合其修复机制,进一步探索干细胞治疗的新思路提供依据。

浙江湖州市建立阳光计生服务平台

为进一步体现人口计生工作以人为本理念,满足广大群众个性化、多样化、便捷化的计生/生殖保健服务需求,浙江省湖州市人口计生委启动建设市12356阳光计生服务平台,在各级人口计生服务机构设立服务中心,开通服务热线,深化人口计生政务公开,拓展优质服务范畴,全面提升人口计生部门社会管理和公共服务水平。

桂枝汤及其类方的运用探讨

桂枝汤通过汗法达到发汗祛邪的作用,是发汗解表的代表方剂;桂枝汤加减通过和法以达到和营卫、调气血的功效,黄芪桂枝五物汤是其代表方剂;桂枝汤加减通过温法以温助阳气,桂枝汤去芍药加蜀漆牡蛎龙骨救逆汤等是其代表方剂;桂枝汤加减通过补法以益气养阴,小建中汤是其代表方剂。以桂枝汤为基础方,通过汗、和、温、补四法来分析桂枝汤的加减配伍特点和临床运用,对临床上运用桂枝汤及其类方具有指导意义。

湖州市基层干部报表之“苦”

减轻基层负担,是各级各部门的永恒话题。在人口计生工作转型阶段,由于工作任务较重、牵涉面广、新情况多,需要统计掌握的事项也多,而且往往是减了这个报表又增加了那项统计,最终导致了基层统计报表任务繁重。为此,浙江省湖州市人口计生委进行了深入调查和分析,采取有效措施，努力解除基层人口计生干部报表之“苦”。