利用噬菌体多肽库筛选卵巢癌细胞特异性结合肽

目的:利用噬菌体7肽库进行体外快速差减筛选(biopanning and rapid analysis of selective interactive ligands,BRASIL),从而获得卵巢癌细胞株HO-8910细胞表面特异性结合肽。方法:以中国仓鼠卵巢细胞株CHO为吸附细胞,卵巢癌细胞株HO-8910为靶细胞,利用噬菌体展示技术联合差减筛选策略,经过连续5轮生物淘洗,随机挑选13个噬菌体单克隆进行DNA测序,利用噬菌体竞争结合实验、ELISA实验、细胞免疫染色、细胞免疫荧光、合成多肽的竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体的亲和性及特异性。结果:筛选出的噬菌体NPMIRRQ与卵巢癌细胞株HO-8910有较高的亲和性及特异性。结论:阳性噬菌体表面展示的多肽NPMIRRQ可能为卵巢癌的早期诊断和转移复发监测提供新思路。

子宫内膜异位症细胞表面特异性结合肽的筛选

目的:利用噬茵体7肽库筛选子宫内膜异位症细胞表面的特异性结合肽。方法:利用噬菌体展示技术体外快速差减筛选子宫内膜异位症异位内膜细胞和在位内膜细胞,经过连续5轮生物淘洗,随机挑选50个噬茵体克隆,通过ELISA筛选并进行DNA测序,再通过噬茵体竞争抑制试验来验证阳性噬菌体的亲和性。结果:(1)经过ELISA实验,其中OD_(450)值大于0.5的共有13个噬菌体克隆被选出,经DNA测序,13个噬菌体克隆中包含6个不同的氨基酸序列,其中5个克隆有共同序列为CGCACCCGCCTGCATACCCGC,其相应的氨基酸序列为RTRLHTR。(2)多肽RTRLHTR与子宫内膜异位症细胞的结合能力呈多肽剂量依赖性降低,而对照组多肽没有显示这种特异性结合活性。结论:噬茵体展示技术筛选的多肽RTRLHTR可望为子宫内膜异位症早期诊断及治疗提供新的方向。

噬菌体展示技术筛选卵巢癌细胞表面转移相关分子结合肽

目的:利用噬菌体7肽库筛选高转移潜能卵巢癌细胞株HO-8910PM表面转移相关分子结合肽。方法:利用噬菌体展示技术体外快速差减筛选(biopanning and rapid analysis of selective interactive ligands,BRASIL)卵巢癌细胞株HO-8910和HO-8910PM,经过连续5轮生物淘洗,随机挑选14个噬菌体单克隆进行DNA测序,并进行ELISA、噬菌体竞争结合实验验证阳性噬菌体的亲和性。结果:噬菌体克隆Z3(短肽LRLRNTR)对高转移潜能卵巢癌细胞株HO-8910PM有较高的亲和性。结论:噬菌体展示技术筛选的短肽LRLRNTR可望为卵巢肿瘤早期诊断、转移复发及治疗提供新的方向。

浅谈延迟断脐对早产儿贫血及黄疸的影响

目的观察延迟断脐对早产儿贫血及黄疸的影响。方法选取2015年1月至2017年1月在温州医科大学附属第二医院出生的188例早产儿,随机分为延迟断脐组和即刻断脐组各94例,延迟断脐组采用延迟断脐方法,即刻断脐组采用快速断脐方法,观察两组早产儿的血红蛋白、红细胞压积、总胆红素等指标。结果出生后6天延迟断脐组的血红蛋白、红细胞压积高于即刻断脐组,贫血发生率低于即刻断脐组,差异有统计学意义(P<0.05);总胆红素水平与黄疸发生率两组接近,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论延迟断脐能有效减少早产儿贫血发生率,且不会增加病理性黄疸发生率。

卵巢癌细胞表面特异性结合肽的筛选及鉴定

目的利用噬菌体展示技术筛选卵巢癌细胞HO-8910表面特异性结合肽。方法利用噬菌体展示技术筛选卵巢癌细胞株HO-8910,经过3轮生物淘洗,随机挑选21个噬菌体单克隆进行ELISA试验,挑选亲和力高的17个噬菌体进行DNA序列测定,随后利用噬菌体结合实验、免疫细胞染色、免疫荧光染色、竞争抑制等实验鉴定阳性噬菌体的特异性。结果展示短肽MRMTIIN的噬菌体克隆对HO-8910细胞株有较高的亲和力和特异性。结论噬菌体展示技术筛选的短肽MRMTIIN可为上皮性卵巢癌的早期诊断提供新的思路。

温度对钛合金应力腐蚀行为的影响

通过在实验室控制海水温度模拟不同海域和季节海水环境。采用恒位移应力腐蚀实验和慢应变速率拉伸实验(SSRT)考察温度对Ti80钛合金应力腐蚀敏感性的影响规律,结合电化学阻抗谱、Mott-Schottky曲线以及三维视频显微镜和扫描电镜(SEM)分析温度对钛合金的影响机制。结果表明:在常压,5~35℃范围内,随着温度的降低,钛合金样品的应力腐蚀开裂敏感性指数逐渐增大,临界强度因子K1SCC值逐渐减小,应力腐蚀倾向增加。低温海水环境下样品断口局部甚至出现河流花样特征和撕裂岭准解理特征。这是因为低温海水环境中钛合金样品裂纹尖端钝化膜电阻较小、缺陷较多、位错容易堆积从而导致钝化膜局部应力集中,膜致应力增大,与外加应力协同作用下,裂纹成核和扩展加快,导致钝化膜难以修复,应力腐蚀速率加快。

卵巢癌细胞SKOV3特异性结合短肽的筛选

目的:利用噬菌体7肽库进行体外快速差减筛选(biopanning and rapid analysis of selective interactive ligands,BRASIL),从而获得卵巢癌细胞株SKOV3细胞表面特异性结合短肽。方法:以中国仓鼠卵巢细胞株CHO为吸附细胞,卵巢癌细胞株SKOV3为靶细胞,利用噬菌体展示技术联合差减筛选策略,经过连续5轮生物淘洗,随机挑选100个噬菌体单克隆进行ELISA检测,选取读数>0.6的单克隆进行DNA测序并序列分析,选择并合成相应短肽,经细胞免疫荧光验证短肽和卵巢癌细胞SKOV3结合的亲和性及特异性。结果:筛选出的短肽AFSGSLP与卵巢癌细胞株SKOV3有较高的亲和性及特异性。结论:阳性噬菌体表面展示的多肽AFSGSLP可能为卵巢癌的早期诊断和转移复发监测提供新思路。