TRPV1在消化系统恶性肿瘤中的研究进展

瞬时受体电位香草醛亚家族1 (Transient receptor potential vanilloid subfamily member 1, TRPV1),又称辣椒素受体(Vanilloid receptor, VR1),是一类非选择性阳离子通道。近年来研究发现TRPV1具有多种生物学功能,与消化系统恶性肿瘤的发生发展密切相关,TRPV1有望成为判断肿瘤预后的新型生物学标志物及治疗的新靶点。本文就TRPV1在消化系统恶性肿瘤中的研究进展作一综述,旨在为肿瘤的诊断和治疗提供新思路。

信迪利单抗联合化疗治疗晚期食管-胃结合部腺癌1例并文献复习

1例诊断为食管-胃结合部腺癌(Adenocarcinoma of Esophagogastric Junction,AEG)并胃周及肝内多发转移,肺转移不除外的患者,在给予2个周期贝伐珠单抗联合化学治疗后效果不佳,改用“信迪利单抗+奥沙利铂+卡培他滨片”8个周期后,效果奇佳,根据胃镜及胸部CT检查判断该患者食管-胃结合部(Esophagogastric Junction,EGJ)原发肿瘤和转移灶完全消失。治疗结束4周后手术切除了病变组织,术后病理未见癌细胞,达到病理完全缓解。通过该病例,发现信迪利单抗联合化疗可以作为一种新辅助化疗方式,对晚期AEG患者达到降期的效果,为后续提供手术治疗的机会,至于远期的生存率需要大量病例的积累和更加长期的随访。

多房棘球蚴分泌物抗原对脂多糖诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞表型及功能的影响

目的探究不同浓度多房棘球蚴分泌物抗原(Em-sAg)对脂多糖(LPS)诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)表型和功能的影响。方法小鼠骨髓腔中所分离的骨髓前体细胞,经小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激后形成BMDC,于正倒置显微镜下观察细胞形态。用流式细胞术鉴定BMDC纯度后,分为Control组、阳性对照组(LPS 1μg/mL)、LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组共6组。流式细胞术检测各组BMDC表面分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ分子)的表达情况,ELISA法检测各组细胞因子IL-12p70的表达水平。满足正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验表示。结果在正倒置显微镜下观察到,培养8~10 d的细胞可见毛刺样突起,细胞呈完全悬浮状态。流式细胞术检测发现,CD11c的阳性率均在70%以上,据此鉴定所培养的细胞大部分为BMDC。流式细胞术的进一步结果表明,与Control组相比,LPS组表面的细胞分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ均显著增加(P值均<0.05);与LPS组相比,LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组中BMDC的CD80显著减少(F=34.870,P<0.001),CD86、MHC-Ⅱ无明显减少(P值均>0.05)。ELISA法的结果表明,不同组间的IL-12 p70的水平差异均有统计学意义(F=73.140,P<0.05),与Control组相比,LPS组刺激后IL-12p70的表达量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与阳性对照组相比,LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/ml Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组均降低IL-12p70的表达量(P值均<0.05),且Em-sAg浓度越高,降低促炎症因子IL-12p70表达量越明显。结论不同浓度Em-sAg均可抑制LPS诱导的BMDC成熟度和促炎症细胞因子IL-12p70的表达。

多房棘球蚴囊液对小鼠肝细胞凋亡与自噬影响的研究

背景多房棘球蚴病是一种流行于北半球的人兽共患寄生虫病,由于不能形成完整的“囊壁”,其病灶中的囊液持续外渗,不断刺激宿主肝细胞,使肝细胞出现“丢失”的情况。目的初步探究多房棘球蚴囊液(hydatid cyst fluid,HCF)对小鼠肝AML-12细胞凋亡与自噬的影响。方法CCK-8法筛选合适的HCF浓度后,将小鼠AML-12细胞分为对照组、HCF 0.4 mg/mL组和HCF 0.8 mg/mL组。CCK-8法检测各组小鼠肝AML-12细胞活性(浓度选择);流式细胞术检测小鼠肝AML-12细胞凋亡情况;Western blot法检测DDIT4、Beclin-1、Caspase-3、PCNA、LC3等凋亡自噬相关蛋白的表达情况;单丹磺酰尸胺(monodansyl cadaverine,MDC)法检测细胞自噬的情况,透射电镜下观察HCF对小鼠肝AML-12细胞超微结构的影响。结果CCK-8结果显示24 h、48 h、72 h时0.8 mg/mL、1.6 mg/mL、3.2 mg/mL、6.4 mg/mL HCF组和48 h、72 h时0.4 mg/mL HCF组的AML-12细胞增殖抑制率均较对照组明显升高(P<0.01);流式细胞计数检测结果显示0.4 mg/mL、0.8 mg/mL HCF作用于细胞48 h后细胞凋亡率明显升高(P<0.01);MDC法结果显示0.4 mg/mL、0.8 mg/mL HCF作用于细胞48 h后出现大量高亮度类圆形团块,平均荧光强度明显升高(P<0.01);Western blot法检测结果显示,与对照组相比,0.4 mg/mL、0.8 mg/mL HCF组DDIT4、PCNA、Caspase-3、Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达显著升高(P<0.01);与0.4 mg/mL HCF组相比,0.8 mg/mL HCF组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。透射电镜下可见对照组细胞质未见明显肿胀,线粒体基质较均匀,嵴少量减少,自噬水平低;0.4 mg/mL HCF组线粒体损伤程度较低,轻微肿胀,嵴少量断裂,胞内可见较多自噬溶酶体;0.8 mg/mL HCF组细胞线粒体损伤程度高,线粒体膜破损、基质外溢,嵴缺失,胞内可见较大面积自噬溶酶体。结论HCF对体外培养的AML-12细胞的增殖有明显抑制作用,DDIT4表达增高,并促进AML-12细胞自噬的发生,诱导细胞凋亡。

基于TCGA数据库对胸腺上皮肿瘤免疫浸润模式及预后的相关性研究

目的探讨胸腺上皮肿瘤(TETs)免疫细胞的浸润模式及其对预后的影响。方法从公共数据库癌症基因组图谱中下载TETs的表达数据及其临床资料,采用CIBERSORT反卷积算法处理获得的数据,获得TETs微环境中的22种免疫细胞浸润占比、免疫细胞浸润与预后及其他临床生存信息的相关性。结果共纳入样本92例,其中肿瘤组织90例,肿瘤旁组织2例。休眠记忆CD4 T细胞在肿瘤组织中表达低于肿瘤旁组织,7种免疫细胞浸润与患者预后相关,1种免疫细胞与患者年龄有关,4种免疫细胞与Masaoka-Koga分期有关,16种免疫细胞与患者病理学分型有关,无免疫细胞与患者性别有关。结论TETs的免疫浸润模式与患者预后、病理分型、Masaoka-Koga分期及年龄有关,特别是巨噬细胞可视为一种潜在治疗TETs的靶向免疫细胞。

小鼠肝多房棘球蚴感染模型中细胞焦亡NLRP3/Caspase-1通路的初步研究

目的观察小鼠肝多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis,Em)感染模型中细胞焦亡NLRP3/Caspase-1通路中关键蛋白的表达并探讨其相关性。方法选取25只BALB/c小鼠按随机数字表分为对照组和感染组,感染组以0.2 mL原头节悬液(含原头节3000个)注射于肝脏被膜下,建立肝Em感染模型,对照组不予处理,常规饲养。分别于模型建模后1、2、3及5个月处死小鼠,摘取肝脏,观察肝脏大体形态,行HE染色、透射电镜观察组织病理学改变;行免疫组化和免疫印迹法检测肝脏组织中细胞焦亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)/Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)通路中关键蛋白的表达,采用ELISA测定细胞焦亡下游因子IL-1β的表达水平。结果与对照组相比,感染组小鼠肝组织表面囊性病灶随时间延长逐渐增大并凸出于肝脏表面;HE染色可见肝脏病灶出现不同程度的炎性细胞浸润、纤维增生等多种病理改变。Em感染2个月组透射电镜观察可看到肝细胞的细胞膜断裂、不连续,符合细胞焦亡的“打孔”现象。ELISA检测结果显示Em感染1、2、3和5个月后小鼠肝脏组织匀浆中IL-1β浓度均高于对照组的浓度,差异有统计学意义(F=127.2,P<0.05)。免疫组化检测结果显示,Caspase-1和NLRP3在Em感染1、2、3及5个月的小鼠肝脏中阳性细胞比率均高于对照组,差异有统计学意义(F=114.6,P<0.05;F=85.89,P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示,Caspase-1、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)和NLRP3蛋白在感染组小鼠肝脏中的相对表达水平呈现先升高(其中Caspase-1和GSDMD的表达于感染1个月时升至最高,NLRP3的表达于感染2个月时升至最高),后降低的趋势,各时相感染组与对照组比较以及各时相感染组之间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论采用“切开皮肤经腹壁肌层肝穿刺法”建立小鼠Em感染模型是可行的;小鼠肝Em感染后存在细胞焦亡现象,可能通过细胞焦亡NLRP3/Caspase-1通路发挥炎症作用。

树突状细胞在棘球蚴感染所致免疫耐受中作用的研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)是一种抗原提呈细胞(antigen-presenting cells,APC),是免疫应答和免疫耐受的重要调节者,在机体固有免疫和适应性免疫中发挥关键作用。既往研究表明,棘球蚴在宿主体内长期寄生的原因与DCs诱导机体免疫耐受密切相关。本文旨在总结DCs在棘球蚴感染导致的免疫耐受中作用的研究进展,以期为棘球蚴感染防治及棘球蚴病免疫治疗提供理论基础和研究思路。

脑多房棘球蚴病误诊为脑梗死1例

患者,男,47岁,喇嘛,青海省班玛县人。于2014年12月4日因"行走不稳50 d伴言语不清20 d"入住青海大学附属医院。患者50 d前无明显诱因突然出现行走不稳,左右摇晃,20 d前上诉症状进行性加重,偶有跌倒,同时伴言语不清,就诊于班玛县人民医院,给予改善血液循环的药物治疗(具体不详),上诉症状未改善。患者既往体健,无慢性病史,长期居住于青海省班玛县,无牧区生活史。入院后查体:血压100/60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),常规内科查体未见明显异常。

肝细粒棘球蚴病合并结核性脓胸误诊为肝 肺细粒棘球蚴病1例

肝细粒棘球蚴病是由细粒棘球绦虫幼虫感染人或动物肝脏组织而引起的一种慢性寄生虫病。结核性脓胸是一种慢性活动性感染性疾病,主要侵犯胸膜间隙引起内脏、壁胸膜增厚。同时感染上述两种疾病的患者较为罕见。本文报道1例肝细粒棘球蚴病合并结核性脓胸误诊为肝、肺细粒棘球蚴病的病例,并结合相关文献进行分析讨论,旨在提高临床医师对该病的鉴别能力。

中药实验治疗棘球蚴病的研究进展

棘球蚴病是一种严重危害人兽健康的人兽共患传染病,危害畜牧业发展和公共卫生安全。目前,中药及中药联合治疗棘球蚴病逐渐成为研究热点。本文就棘球蚴病中药及中药联合治疗的最新研究进展及其发展方向进行综述,以期为治疗人类棘球蚴病及新型药物研发提供参考。

细胞焦亡在人体寄生虫病中的研究进展

细胞焦亡是近年发现的一种依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)的新型细胞死亡方式,活化后的caspase以剪切消皮素(GSDM)蛋白家族为途径,使细胞膜发生破裂,同时释放炎性细胞因子及其内容物,最终导致细胞死亡,其发生、形态学特征及调控机制与凋亡、坏死、自噬、铁死亡等细胞死亡方式有明显不同。细胞焦亡信号通路可分为经典途径、非经典途径和其他途径。目前大量研究证实,细胞焦亡参与寄生虫病的发展历程。本文就细胞焦亡的定义、不同途径机制及其在多种人体寄生虫病中发挥的作用作一综述,以期为开拓细胞焦亡与寄生虫疾病之间的作用提供依据。

胸腔镜肺切除术后不留置胸腔引流管安全性和可行性的系统评价与Meta分析

目的探讨胸腔镜肺切除术后不留置胸腔引流管(no chest tube,NCT)的安全性和可行性。方法计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of Science、中国生物医学文献数据库、中国知网、维普和万方数据库,搜集关于胸腔镜肺切除术后NCT的研究,检索时限均从建库至2020年10月。由2名评价员独立筛选文献、提取资料和评价纳入研究的质量,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入17项研究,包括12项队列研究和5项随机对照试验,共计1572例患者,其中NCT组患者779例,留置胸腔引流管(chest tube placement,CTP)组患者793例。Meta分析结果显示:NCT组的术后住院时间明显短于CTP组[SMD=–1.23,95%CI(–1.59,–0.87),P<0.00001];NCT组术后第1 d疼痛评分[SMD=–0.97,95%CI(–1.42,–0.53),P<0.0001]、术后第2 d疼痛评分[SMD=–1.10,95%CI(–2.00,–0.20),P=0.02]低于CTP组,术后第3 d疼痛评分两组差异无统计学意义[SMD=–0.92,95%CI(–1.91,0.07),P=0.07]。两组患者术后30 d并发症发生率[RR=0.93,95%CI(0.61,1.44),P=0.76]、再次行胸腔闭式引流[RR=1.51,95%CI(0.68,3.37),P=0.31]及胸腔穿刺术[RR=2.81,95%CI(0.91,8.64),P=0.07]差异无统计学意义。两组患者围手术期均无死亡发生。结论对于满足条件的患者行胸腔镜肺切除术后NCT是可行和安全的。