人小细胞肺癌定位显象的实验研究

用单克隆抗体进行肿瘤诊断治疗研究是目前解决肿瘤诊治的新途径。大量肿瘤动物模型、临床病例的定位研究表明,放射免疫定位(Radioimmuno-localization)结合了单抗特异性强、放射性同位素灵敏度高的优点,对肿瘤原发灶、转移灶的体内检测可能有着较好的前景。

抗人小细胞肺癌单克隆抗体导向治疗的实验研究

用移植人小细胞肺癌的裸鼠作为肿瘤模型,研究了碘标记单克隆抗体2F7在体内的肿瘤显fi,抗体、药物偶合物的连接,导向药物2F7-HSA-MTX的体外细胞毒及体内肿瘤抑制作用。结果显示,碘标记抗体在荷瘤小鼠体内有确切的肿瘤定位作用,清晰的肿瘤显像持续到168h以后。间接连接的导向药物可携带更多的MTX分子,细胞毒作用比直接连接提高2倍。导向药物可使荷瘤小鼠的长瘤潜伏期延长,长瘤率降低,抑瘤率为84％和自然生存期延长。

单克隆抗体及F(ab′)_2片段在小鼠体内的药物动力学研究

用^(125)I标记单克隆抗体(IgG2a)和相应片段F(ab′)_2,比较它们经静脉或腹腔不同途径注射后在小鼠体内的药物动力学变化。结果显示,同一种抗体形式(完整抗体或F(ab′)_2经iv或ip不同途径给药时,整体排泄率、血液清除率和生物半衰期等无明显差异(P>0.05);而相同途径给药时,完整抗体与F(ab′)_2比较,二者的Ke、T1/2、TBCL显著差异(P<0.05-0.01),完整抗体腹腔注射的生物利用度94％。提示:F(ab′)_2片段有利于改善肿瘤体内定位显象,腹腔注射是有效的给药途径。

用单克隆抗体筛选小细胞肺癌相关抗原基因

用分子生物学技术克隆肿瘤相关抗原基因对认识肿瘤抗原本质、深入研究肿瘤抗原的结构和功能、研究肿瘤多肽疫苗有重要意义。我们已获得一组抗人小细胞肺癌单克隆抗体，并在体外证实该抗体所识别的抗原在靶细胞有较好的特异性和较高分布密度，是多肽性抗原决定簇。在此基础上，以抗体为探针，筛选小细胞肺癌基因库，目的在于寻找编码抗体所识别抗原的肿瘤相关基因。

裸鼠自发性淋巴道转移肿瘤模型的建立

在裸鼠发现一例自发性皮下肿瘤,伴广泛淋巴结转移,经10代以上体内传代,在裸鼠体内长瘤及转移的特性稳定,原位长瘤率大于95％,潜伏期5—12天,转移率100％,平均荷瘤生存时间22天。大体解剖见腹股沟、腋下、颌下、腹腔等处有不同程度淋巴结转移。光镜和电镜的形态学检查见肿瘤细胞形态圆、较小、核大胞浆少,染色质呈块状、围裙状,分裂相多见,符合小细胞分化程度较差的恶性肿瘤,转移灶和原位灶形态学上相似。该可稳定传代、广泛淋巴道转移的小鼠肿瘤定名为LMLM瘤系。

肺癌导向治疗浅谈

单克隆抗体可作为多种“弹头”的理想导向载体用于肿瘤的导向治疗，我们用放射性同位素^131I标记抗肺癌单抗进行肺癌临床放射免疫显像，在一组肺部可疑“块影”病例中，诊断准确性达93．5%(29／31)。肺癌单抗交联化学药物、毒素、放射性核素构建的“导向药物”都已进入临床Ⅰ-Ⅱ期研究。通过筛选高效“弹头”，介入给药、腔隙给药等方式提高肿瘤局部药物浓度，在部分病例中看到了一定的治疗作用．基因工程抗体发展迅速，人-鼠嵌合抗体，小分子抗体日趋成熟，噬菌体抗体库技术给单抗的研制带来了全新的概念，有很大的应用前景，部分基因工程抗体已进入临床研究。双功能抗体因其可结合两个不同抗原而介导的细胞毒作用格外引人注意。肿瘤导向药物还面临许多问题，克服问题的新技术也在不断发展。

抗人小细胞肺癌独特型单克隆抗体的制备

抗人小细胞肺癌独特型单克隆抗体的制备杨瑶琴胡晶莹莫忠根张中华李斯德作者单位：上海市肿瘤研究所免疫及细胞生物学研究室（上海２０００３２）关键词抗体，单克隆肺肿瘤癌，小细胞抗独特型抗体的应用是近年来肿瘤免疫治疗的一种新方法［１］，抗肿瘤特异性抗体（Ａｂ１...

天花粉-5A(10)2免疫毒素的形成及其对人肺腺癌细胞SPC体外导向杀伤作用的研究

目的通过化学交联形成天花粉┐５Ａ（１０）２免疫毒素，对人肺腺癌细胞ＳＰＣ进行导向杀伤作用的研究。方法天花粉毒蛋白与２┐ＩＴ（ｉｍｉｎｏｔｈｉｏｌａｎｅ，２┐亚氨基四氢噻吩）作用、抗人肺腺癌单抗５Ａ（１０）２与ＳＰＤＰ（Ｎ┐ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ┐３┐［２┐ｐｙｒｉｄｙｌｄｉｔｈｉｏ］ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ，Ｎ┐琥铂酰亚胺┐３┐［２┐吡啶二硫］┐丙酸酯）作用，分别导入巯基（┐ＳＨ）和２┐吡啶二硫丙酰（ＰＤＰ，２┐［ｐｙｒｉｄｙｌｄｉｔｈｉｏ］ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）基，通过天花粉分子中引入的┐ＳＨ与５Ａ（１０）２分子中引入的ＰＤＰ作用将天花粉与５Ａ（１０）２单抗连接在一起，形成免疫毒素分子。结果体外细胞毒实验表明，天花粉┐５Ａ（１０）２免疫毒素对ＳＰＣ的杀伤作用比游离天花粉至少高６～７倍，而对肝癌细胞７７２１的杀伤作用与游离天花粉相近。结论证明天花粉┐５Ａ（１０）２免疫毒素在体外对靶细胞ＳＰＣ具有导向杀伤作用。

抗人小细胞肺癌嵌合T细胞受体基因的构建

众所周知，T细胞受体(TCR)识别抗原与抗体识别抗原是不同的。前者识别的是抗原——主要组织相容性抗原的复合物，受MHC限制，而后者则是识别天然状态下的抗原，亲和力较强。考虑到TCR可变区部位与抗体可变区部位有众多相似之处，即其均由两条二硫键相连的多肽组成，TCR由阿尔法(α)、贝塔(β）链组成，

抗人小细胞肺癌T细胞受体嵌合基因的克隆

目的克隆人小细胞肺癌抗体／Ｔ细胞受体嵌合基因。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术将人小细胞肺癌单克隆抗体的变区ＶＨ、ＶＫ与Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）恒区Ｃα、Ｃβ进行拼接，构建成ＶＨＣβ、ＶＫＣα嵌合ＴＣＲ，并分别克隆至ｐＭＡＭ、ｐＸＴ１真核表达载体。结果应用ＰＣＲ中重叠延伸剪接（ＳＯＥ）方法，能简化基因拼接步骤；该嵌合基因的克隆有助于对肿瘤免疫治疗新途径的探索。

链霉亲和素-蛋白A融合蛋白基因在大肠杆菌中的表达

将合链霉亲和亲-蛋白A（Streptavidin－proteinA）融合蛋白基因的表达质粒pTSAPA导入大肠杆菌BL21（DE3），成功地表达了该融合蛋白，经SIJS－PAGE及免疫印迹等方法证实该蛋白既具有IgG的结合活性，又具生物素结合活性。

抗人肺腺鳞癌单克隆抗体的研制

将人肺腺癌细胞ＳＰＣ、Ａ５４９、Ａ４２７序贯免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合。获得一株稳定分泌抗肺腺鳞癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株──Ｓ５Ａ１０─２，制备了小鼠腹水抗体并进行了纯化，腹水效价为１．０２×１０７，亚型测定为ＩｇＧ１．免疫组化分析ｓ５Ａ１０－２单抗与肺腺、鳞癌和肺鳞癌有较好的选择反应性，与正常组织无交叉反应，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ测定Ｓ５Ａｌ０─２在ＳＰＣ细胞膜上的抗原分子量为４０Ｋｄ、５０Ｋｄ和８０Ｋｄ，在Ａ５４９，细胞膜上的抗原分子量为４３Ｋｄ，而与Ａ４２７细胞膜蛋白无明显反应。该抗体的亲和常数为８．４３×１０１０Ｍ－１，Ｓ５Ａ１０－２杂交瘤细胞株，经液氮冻存后复苏，其分泌抗体能力不受影响。

人小细胞肺癌2F_7抗原的特性研究

肿瘤抗原有肿瘤特异抗原(TSA)、病毒诱导抗原和癌胚抗原,后两者又称为肿瘤相关抗原(TAA)。本世纪五十年代就已证实了近交系小鼠中经化学致癌剂诱发的肿瘤含有肿瘤特异性移植抗原(TSTA)。2F_7抗原是存在于人小细胞肺癌(SCLC)H128细胞株上的与2F_7单抗相应的肿瘤抗原,在SCLC的瘤组织中明显表达。

三株肺癌单抗混合血清学检测肺癌的价值

三株肺癌单抗混合血清学检测肺癌的价值张瑞鉴１李斯德２关键词肺肿瘤抗原单克隆抗体金标斑点法作者单位：１．福建三明市职防院（三明３６５０００）２．上海市肿瘤研究所（２０００３２）肺癌的发病率在全球范围呈上升趋势，已成为危害人类的最严重的疾病之一。而肺癌的...

抗人肺鳞腺癌单克隆抗体放射免疫显像的实验研究

以移植人肺腺癌的裸鼠为肿瘤模型，研究１２５Ｉ标记抗人肺鳞腺癌单克隆抗体Ｓ５Ａ１０－２肿瘤显像和生物分布。结果显示，碘标记抗体经腹腔注射在４８ｈ即获清晰图像，１４４ｈ为显像最佳时间。瘤／血比为０．９，瘤／肺比为３．５，瘤／肝比为４．４，定位指数为１．９。

人─鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓瘤细胞中的表达

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法获得小鼠抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因（ｃＤＮＡ），构建成含人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因质粒（ｐＳＶ＿２△Ｈｇｐｔ２Ｆ＿７Ｖ＿ＨＨｕγ＿３）ＤＮＡ通过电脉冲介导基因转移的方法，转染小鼠骨髓瘤细胞Ｊ５５８Ｌ，并经选择培养基筛选出含有构建质粒基因的克隆，进一步按ＥＬＩＳＡ方法测定细胞表面和培养上清液中嵌合重链抗体的表达效率，最终选出表达抗体效率较高的单克隆细胞株为５Ｃ＿２，１２Ｂ＿９，２９Ｃ＿６。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法检测证明，阳性克隆细胞总ＲＮＡ经电泳后在１８Ｓ附近处与鼠抗人小细胞肺癌单抗的重链变区ｃＤＮＡ探针有明显的阳性杂交带出现。细胞抽提蛋白经ＳＤＳ──ＰＡＧＥ电泳分离显示在正常人ＩｇＧ重链分子相当的位置有一清晰条带出现，分子量约为５８ＫＤ，免疫印迹方法同样检测出此条带特异他与兔抗人ＩｇＧ（重链特异）抗体反应，证实人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓癌细胞中表达成功。

人－大鼠嵌合抗双滩病毒抗体重链基因重组表达质粒的构建

人－大鼠嵌合抗双滩病毒抗体重链基因重组表达质粒的构建程卫青，杨为松，徐海峰，白雪帆，尚高峰（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３２）刘健，郭虹汾，张文祥，李斯德（上海市肿瘤研究所免疫室，上海２０００３９）早在八十年代中期，国外就已开展了入－鼠嵌合...

大鼠抗汉滩病毒单抗重链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析

大鼠抗汉滩病毒单抗重链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析程卫青，杨为松，徐海峰，白雪帆，尚高峰（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３２）刘健，郭虹汾，李斯德（上海市肿瘤研究所免疫室，上佝２０００３２）目前基因工程抗体的研究正方兴未艾。制备基因工...