肺癌早期诊断的研究进展

在全球范围内肺癌是最常见的癌症,在我国,肺癌则是发病率及死亡率最高的恶性肿瘤,对社会造成了极大的负担。早期肺癌多无明显临床症状及体征,多数肺癌患者出现症状首次就诊时已为晚期,晚期肺癌5年生存率极低,因此探索有效的肺癌早期诊断及诊断方法,对于改善肺癌患者的生存预后有重要意义。目前在我国,低剂量螺旋CT检查是肺癌早期诊断的常见方法,显著提高了早期肺癌诊断率。支气管镜检查作为目前肺癌诊断的常用方法也有着较高的敏感性及特异性。液体活检因其可通过非侵入性方法获取患者组织标本、可实时监测肿瘤动态变化等优点,是目前临床最有前途的肿瘤组织活体检查的替代手段。本文就肺癌早期诊断方法的相关研究进展进行综述。

基于SEER数据库的原发性纵隔及肺部软组织肉瘤相关生存及预后分析

目的利用SEER数据库分析影响原发性纵隔及肺部软组织肉瘤预后的相关因素。方法收集SEER数据库376例患者数据,随机分为训练集(263例)与验证集(113例)。使用Kaplan-Meier法和Cox比例风险回归分析各变量与患者生存及预后的关系,建立列线图预测患者总生存期。采用校准曲线、一致性指数及ROC曲线评价列线图性能。结果组织学类型、手术、化疗、肿瘤大小、肿瘤分期是影响原发性纵隔及肺部软组织肉瘤预后的因素。建立的列线图模型可以预测其6个月、1年及2年总生存率,校准曲线显示与实测值基本一致,训练集与验证集C指数分别为0.754与0.745,ROC的曲线下面积分别为0.849与0.924,说明具有良好的预测准确度。结论本研究建立的列线图可以预测原发性纵隔及肺部软组织肉瘤患者6个月、1年及2年总生存率。

大环内酯抗生素抑制气道粘液高分泌的分子机制

为了解大环内酯抗生素抑制慢性炎症气道粘液高分泌的分子机制。利用大鼠慢性支气管炎模型 ,对其进行主要抗生素品种的持续药物干预后 ,采用免疫荧光和免疫酶联方法分别检测支气管肺泡灌洗液中性粒细胞 (PMN)炎性反应强度 (PMN比例×膜结合弹力酶水平 )和粘蛋白 (MUC)含量。采用原位杂交方法检测肺组织MUC5AC转录水平的表达。红霉素、克拉霉素均可明显抑制PMN炎性反应强度 ,同时也减少灌洗液MUC含量 ,杯状细胞独立标记物MUC5AC的转录水平出现显著下降。阿莫西林和环丙沙星未见上述作用。大环内酯抗生素可以从转录水平抑制MUC的产生 。

痰液分析对慢性阻塞性肺疾病病情进展的评估价值

目的 了解慢性阻塞性肺疾病(COPD)病情进展各阶段痰液特性的改变规律,考察其评估病情进展的价值。方法 采用常规理化分析和免疫荧光的方法,分析39例COPD患者临床缓解期、急性发作期及临终前痰液的粘度、粘蛋白含量、多糖含量、硫酸基含量以及中性粒细胞(PMN)膜结合弹力酶(HLE)表达强度与分泌型白细胞弹力酶抑制因子(SPIL)表达强度之比;观察痰液外观性状的变化情况。结果 临床缓解期COPD患者痰液的上述指标均较正常人明显增高,随病情进展,上述指标呈同步进行性升高。痰液外观也随之呈稀薄泡沫样痰→粘液痰→粘液脓性痰改变。痰液成份性指标粘蛋白、多糖、硫酸基含量及HLE/SPIL与痰液粘度的相关性呈明显正相关,相关系数分别为0.63、0.66、0.58及0.55。结论 COPD病情的进展伴随有痰液理化特性的恶化和炎性损伤/抗损伤因素失衡程度的加大,痰液分析有助于COPD病情进展的评估。

雾化吸入液渗透压对痰液外排的影响

目的 探讨痰液外排的雾化液最适宜的渗透压条件。方法 以慢性阻塞性肺疾病 (COPD)患者为观察对象 ,雾化吸入渗透压梯度增高的雾化液 ,分别收集雾化吸入前后 1h的痰液 ,对照观察痰液总量、干 /湿比重、黏度及中性粒细胞膜结合弹力酶表达水平。结果 蒸馏水吸入减少了痰液的外排量。从等渗至 3% Na Cl等渗当量雾化液呈现排痰量增多、痰液干 /湿比重下降、黏度下降及中性粒细胞膜结合弹力酶表达下降的趋势 ,至 4 % Na Cl以后等渗当量时无进一步改善表现。结论 高渗雾化液较低渗雾化液更有利于 COPD患者痰液外排 ,通常最适宜渗透压条件在 3% Na

CT引导下肺内结节性病灶穿刺活检术的应用价值

目的 探讨经皮肺穿刺在诊断肺癌时的价值以及将诊断方法推向治疗应用。方法 回顾性分析接受肺穿刺的 42例临床病例 ,并结合文献复习 ;诊断性穿刺在CT定位下作活检 ,对 7例周边型肺癌行瘤体内注射顺铂治疗。结果 42例肺内结节性病灶病人在CT导向下作经皮肺穿刺活检术 ,2例因取材组织少致活检失败 ,40例穿刺成功 ,成功率为 95 2 % ,其中恶性病变 3 4例 ,良性病变 6例 ,并经手术和随访证实 ;肺穿刺活检准确率 80 9%。穿刺后发生气胸 3例 ,咯血 2例 ,肺内出血 1例。瘤体内药物注射疗效优于单纯化疗。结论 CT扫描图像清晰 ,病灶定位准确 ,因此CT导向经皮肺活检术安全、准确、成功率高 ,在肺内结节性病变的诊断中有重要作用。经皮肺穿刺瘤体内药物注射被视为一种新的介入治疗途径 。

丙型肝炎病毒核心蛋白抑制shRNA介导的RNA干扰作用

目的研究丙型肝炎病毒编码的蛋白对RNA干扰的抑制作用,筛选出有作用的RNA干扰抑制因子。方法构建丙型肝炎病毒不同蛋白质的真核表达质粒,加入萤火虫荧光素酶基因的RNA干扰体系,共转染HeLa细胞,检测萤火虫荧光素酶活性以观察RNA干扰效果的变化,筛选出有作用的RNA干扰抑制因子。在针对内源性GFP的RNA干扰体系中进一步确证该种抑制作用。利用共转染方法观察该蛋白抑制RNA干扰的剂量效应关系、在不同细胞系中的作用以及对siRNA介导的RNA干扰是否有相同的拮抗作用。结果加入核心蛋白后,萤火虫荧光素酶活性恢复到80%,与空白对照比较有显著性差异(P<0.05)。在绿色荧光蛋白RNA干扰体系中,核心蛋白使绿色荧光蛋白的表达强度明显增加。该种对抗RNA干扰的作用在HepG2、HEK293和HeLa细胞中均存在,且呈剂量依赖关系。在siRNA介导的RNA干扰体系中,加入核心蛋白后萤火虫荧光素酶活性无显著性变化(P>0.05)。结论核心蛋白能够对抗shRNA介导的RNA干扰作用,但不能对抗siRNA介导的RNA干扰作用,这种作用具有普遍性。核心蛋白对抗RNA干扰的作用可能有利于提高丙型肝炎病毒在宿主细胞内的生存能力并导致持续感染,亦可能在丙型肝炎病毒致病机制中发挥重要作用。

ATG4A及ATG16L1基因多态性与肺结核易感性的关系

目的:探讨自噬相关基因4A(autophagy related 4A,ATG4A)及自噬相关基因16L1(autophagy related 16 like 1,ATG16L1)的多态性位点与中国西南地区人群肺结核易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测218例肺结核患者及248例健康对照者ATG4A基因rs807185位点及ATG16L1基因rs2241880位点的基因型,用logistic回归分析上述2个位点与肺结核病易感的相关性。结果:2组人群中rs807185位点的A等位基因、AT基因型及显性模型AA+AT vs.TT的频率分布存在统计学差异(P<0.05),且在女性中差异更突出。而rs2241880位点的各指标频率分布差异均不明显(P>0.05)。结论:ATG4A基因rs807185位点多态性与中国西南地区人群肺结核易感性呈负相关,而ATG16L1基因rs2241880位点多态性则与该地区人群肺结核易感性无明显相关。

人MUC5AC基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其转录活性分析(英文)

目的:克隆人黏蛋白/黏液素5AC(MUC5AC)基因启动子并构建该启动子的荧光素酶报告系统,探讨该启动子的活性及转录靶向性。方法:运用Vector NT1软件包对MUC5AC基因5′端1 348 bp进行启动子特征分析;以人A549细胞基因组DNA为模板分离出人MUC5AC基因5′端非翻译区大小为1 348 bp的片段并进行测序鉴定,再以扩增产物为模板对启动子进行5′端删除分析,分别扩增737 bp(-689/+48),372 bp(-324/+48),112 bp(-64/+48)的片段,与荧光素酶报告基因载体重组构建,通过双荧光素酶活性进行转录活性分析。应用定点突变技术,在重组质粒的基础上建立MUC5AC启动子区SP-l结合位点和核因子(NF)-κB结合位点单独突变体,并测定中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的转染细胞荧光素酶的相对活性。结果:序列分析发现人MUC5AC基因5′端1 348 bp的区域内存在多个顺式作用元件,成功构建了4个不同长度的MUC5AC启动子报告基因载体。双荧光素酶活性分析372 bp片段为有活性的最小片段。NE可诱导含有MUC5AC启动子区NF-кB结合位点单独突变体(pGL3E-MUC5AC-NF-кB-MU)荧光素酶相对光强度增加,而NE不能诱导SP-l结合位点单独突变体(pGL3E-MUC5AC-SP-1-MU)荧光素酶表达增加。结论:上述载体的成功构建及序列分析为进一步研究MUC5AC基因的启动子活性及基因表达调控奠定了基础。MUC5AC 5′上游序列中-324/-64位点存在参与NE诱导MUC5AC基因表达的重要调控元件,位于此区域的顺式作用元件SP-1位点在NE诱导MUC5AC基因表达机制中起重要作用。

根系分泌物及其在植物修复污染土壤中的作用

根系分泌物种类和数量的最根本影响因素是环境的变化。根系分泌物对完成污染土壤的植物修复具有重要的理论及实际意义。文章在阐述根系分泌物的定义和种类的基础上,综述了根系分泌物在植物修复重金属及有机物污染土壤中的作用机理及影响因素。探讨了该研究领域目前存在的问题,并对今后的发展方向进行了展望。

肺结核合并糖尿病的发病机制

目前肺结核合并糖尿病患者人数逐年增加。在此就肺结核合并糖尿病患者的相关因素物质代谢、瘦素、转化生长因子β1(TGFβ-1)与自杀相关因子/自杀相关因子配体、氧化应激、药物影响等5个方面进行阐述,目的在于加深对肺结核合并糖尿病发病机制的认知,从而对于这类患者的早期诊断及治疗、提高治愈率以及控制传染病起到积极的作用。

髓样分化因子88抑制剂ST2825对重组耻垢分枝杆菌感染THP-1细胞自噬的影响

目的探讨髓样分化因子88抑制剂ST2825对重组耻垢分枝杆菌感染THP-1细胞自噬的影响。方法使用髓样分化因子88抑制剂ST2825作用于重组耻垢分枝杆菌感染的THP-1细胞,确定ST2825干预的实验组、无ST2825作用的对照组以及空白组。运用荧光显微镜观察自噬小体,RT-PCR检测Beclin-1基因和Bcl-2基因的m RNA的表达。结果与对照组比较,实验组的自噬荧光小点数目明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测结果显示Beclin-1和Bcl-2 m RNA表达较对照组下调。结论髓样分化因子88抑制剂ST2858可能通过干扰Beclin-1和Bcl-2的分离,抑制THP-1细胞自噬。

猫爪草胶囊治疗肺结核的临床研究

目的研究猫爪草胶囊对肺结核(初治)的治疗效果,并探讨其用药的安全性及有效性。方法将120例肺结核(初治)患者随机分为治疗组和对照组,对照组应用常规的(2H3R3Z3E3/4H3R3)顿服进行抗结核治疗;治疗组在上述治疗基础上加用猫爪草胶囊4粒口服3次/d。对2组治疗效果及不良反应等进行分析。结果治疗组及对照组治疗2个月未满疗程痰菌阴转率分别为91%和83%,满疗程痰菌阴转率分别提高到100%和98%;治疗2个月末影像学有效率分别为65%和48%,满疗程影像学有效率分别为100%和98%;2组痰菌阴转率及影像学有效率比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。2组不良反应发生率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论猫爪草胶囊联合常规抗结核药物治疗肺结核(初治)短期治愈率升高,最终治愈率无明显差异,但可减少不良反应的发生率。

卡介菌素多糖核酸在治疗糖尿病合并肺结核中的作用

目的:探讨卡介菌素多糖核酸(斯奇康)在糖尿病合并肺结核治疗中的作用,为糖尿病合并肺结核治疗寻求新的治疗方法。方法:将112例受试者随机分为化疗+斯奇康治疗组(58例)和单纯化疗对照组(54例),观察临床疗效并检测血清中T淋巴细胞亚群和一氧化氮(NO)水平。结果:两组患者痰菌阴转率有显著性差异(P<0.05),斯奇康治疗组CD4+水平明显高于单纯化疗对照组(P<0.05),两组间NO水平有非常显著性差异(P<0.01)。结论:卡介菌素多糖核酸能提高糖尿病合并肺结核患者痰菌阴转率,它在糖尿病合并肺结核治疗中的作用可能是通过释放大量的NO而增强机体的保护性免疫功能。

结核性胸液淋巴细胞行为的单细胞定量研究

目的 :为探讨结核性胸液淋巴细胞行为的特点及在病理过程中的意义。方法 :采用单细胞微管吸吮技术 ,分别检测正常人外周血淋巴细胞、结核性胸膜炎患者外周血淋巴细胞、胸液中淋巴细胞与肺血管内皮细胞的粘附特点。结果 :结核性胸膜炎患者外周血淋巴细胞的粘附性 (2 .83± 0 .4 3Pa)较正常人 (1.2 1± 0 .2 5Pa)明显增强 ,但结核性胸液中淋巴细胞的粘附性(1.6 7± 0 .39Pa)却与正常人无明显差别。结论 :结核性胸膜炎患者外周血淋巴细胞处刺激激活状态 ,其粘附性升高有利于贴壁向血管外游走进而向胸膜腔渗出。结核性胸液中淋巴细胞粘附性呈现正常水平可能系由于胸液中高浓度游离型上皮来源的粘附分子将其表面表达的粘附分子饱和的缘故。此现象提示胸液中的淋巴细胞 ,不易回吸收 ,其去除多以凋亡方式 ,最好籍助外力清除 (胸穿抽液 )。

一氧化氮与肺癌免疫的研究

采用镀铜镉还原法检测肺癌、良性肺病和肺部正常者血清及支气管冲洗液(BWF)中一氧化氮(NO)水平,并对 BWF 中 NO 与 T 淋巴细胞亚群的相关性进行了分析。结果显示,肺癌组 BWF 中 NO 水平明显高于良性肺病组及正常癌组(P<0.01),但肺癌组血清 NO 水平与良性肺病组比较无差别(P>0.1);肺癌组 BWF 与血清 NO 水平之间呈正相关(P<0.01):Ⅲ、Ⅳ期肺癌血清 NO 明显高于Ⅰ、Ⅱ期肺癌和良性肺病组(P<0.01);NO 水平与肺癌组织学类型无关。BWF 中 NO 水平与 CD_4/CD_8比值呈明显负相关(r=-0.67,P<0.01).以上结果提示在肺癌免疫研究中,NO 水平的增加可能主要起局部免疫抑制作用。

灵芝提取物对耻垢分枝杆菌GlmU基因表达的影响

目的研究灵芝水提取物、灵芝三萜对耻垢分枝杆菌(M.S-155)增殖曲线、GlmU基因表达、细胞壁结构的影响。方法将6×107 M.S-155接种用含有500μg/mL灵芝水提取物、灵芝三萜的LB培养基培养耻垢分枝杆菌作为实验组,6×107 M.S-155单独培养作为对照,取不同时间A600值绘制耻垢分枝杆菌增殖曲线,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白免疫印迹(Western blotting)检测GlmU蛋白表达情况,透射电子显微镜(TEM)观察细胞壁的形态变化。结果增殖曲线说明灵芝水提取物、灵芝三萜对耻垢分枝杆菌生长明显抑制,对应A600值组间有差异(P<0.05),而同等剂量的灵芝三萜抑菌能力更强;SDS-PAGE及Western blotting检测到相对分子质量51.5×103蛋白处蛋白实验组明显变暗(P<0.05);用TEM观察其对耻垢分枝杆菌细胞壁结构的影响,实验组M.S-155经灵芝三萜处理后的耻垢分枝杆菌的细胞壁明显膨胀、变形。结论灵芝水提取物、灵芝三萜对M.S-155有明显的抑制作用,而其作用位点很可能就是抑制了GlmU基因的体外表达,灵芝提取物不但能够抑制M.S-155增殖而且能够影响细胞壁功能,为进一步研究灵芝应用价值奠定了基础。