基于CRISPR/Cas9技术建立Lepr与eNos双基因敲除的糖尿病肾病小鼠模型

目的基于CRISPR/Cas9基因编辑技术建立瘦素受体基因(leptin receptor,Lepr)与血管内皮一氧化氮合酶基因(endothelial nitric oxide synthase,eNos)双基因敲除(double-knockout,DKO)小鼠模型,构建晚期糖尿病肾病小鼠模型。方法根据eNos基因制备对应的gRNA,将CRISPR-Cas9体系显微注射于C57BL/Ks(BKS)背景小鼠的受精卵内。将受精卵转移至有假孕状态雌性小鼠的输卵管内部。幼鼠出生后经聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定及测序分析分选出为eNos^(+/-)基因型的F0代阳性小鼠,获得BKS背景下的Lepr基因杂合小鼠,即基因型为Lepr^(db/m)的Lepr-F0代杂合子小鼠。将eNos-F0与Lepr-F0代小鼠杂交,获得eNos^(+/-)/Lepr^(db/m)双杂合F1代小鼠,将双杂合F1代小鼠进一步交配,筛选得到Lepr与eNos双基因敲除小鼠。采用PCR法鉴定小鼠基因型,按基因鉴定结果分为野生型(wild-type,WT)组与DKO组小鼠。监测各组小鼠体质量、血糖与饮水进食量;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠尿白蛋白与尿肌酐水平,并计算尿白蛋白排泄率;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)与过碘酸六胺银(periodic acid-silver metheramine,PASM)染色检查各组小鼠肾组织病理改变。结果PCR检测结果显示,成功构建lepr^(db/db)/eNos^(-/-)DKO小鼠。与同窝对照组相比,DKO小鼠的体质量、血糖水平与饮水进食量均显著高于同窝对照小鼠。DKO小鼠的尿白蛋白与尿白蛋白排泄率显著高于WT小鼠。病理学结果显示,DKO小鼠的肾小球体积明显增大,系膜基质增生明显。结论基于CRISPR/Cas9基因编辑技术可成功构建lepr^(db/db)/eNos^(-/-)DKO小鼠,DKO小鼠可反映糖尿病肾病的典型表现,为深入研究糖尿病肾病的作用机制提供动物模型。

基于演化序搜索的混合贝叶斯网络结构学习方法

贝叶斯网络是一种不确定性知识表示与推理的有效工具,学习其结构是利用这一工具进行推理的基础。现有的贝叶斯网络结构学习算法,在智能教育等应用场景中往往面临着难以权衡有效性与高效性的问题。一方面,评分搜索类方法能搜索到高质量的解,但面临着算法复杂度高的挑战。另一方面,混合类方法效率高,但所找到的解的质量不尽如人意。针对上述问题,提出了一种基于演化序搜索的混合贝叶斯网络结构学习方法(EvOS)。该方法首先通过约束类算法构建无向图骨架,然后利用演化算法搜索最优节点序,最后使用该节点序指导贪婪搜索得到贝叶斯网络结构。基于常用基准数据集以及教育知识结构发现任务,验证了所提方法的有效性与高效性。实验结果表明,所提方法相较于评分搜索类方法,能够在保持相仿精度的情况下最高加速百倍,且有效性显著高于混合类方法。

组织蛋白酶在糖尿病及糖尿病肾病作用机制中的研究进展

组织蛋白酶(cathepsin,CTS)是哺乳动物体内最重要的蛋白水解酶之一,在细胞内外均存在。其在体内参与多种生理、病理过程,如调节自噬、细胞凋亡、维持细胞外基质稳态、抗原提呈、病毒感染及炎症等。近年来其与代谢性疾病的关系受到了广泛关注,组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB)、组织蛋白酶D(cathepsin D,CTSD)、组织蛋白酶L(cathepsin L,CTSL)、组织蛋白酶S(cathepsin S,CTSS)被认为是代谢性疾病中的主要参与者,它们参与糖尿病(diabetes mellitus,DM)及糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的发病及进展过程,可能成为潜在的预测及治疗新靶点。本文主要对CTSB、CTSD、CTSL、CTSS在DM及DN中的作用及机制进行综述。

大学生学习情况调查分析——以上海W大学为例

本文以"中国大学生学习性投入调查问卷"(NSSE-China)为工具,对"上海W大学"本科生的学习情况作抽样调查,对数据进行统计分析,并将所得结果和全国院校、地方本科院校、"211"院校及"985"院校作横向比较研究。总体揭示了2013年度上海W大学与其他院校间的水平差异,并通过定位判断了W大学在各类院校中所处的位置,对W大学大学生学习与发展情况有了比较深入的了解。此研究方法同样适用于其他各类院校。

基于因子分析法的财务共享中心建设效果分析--以云南白药为例

我国医疗行业正在进行转型升级,为企业创造更大的价值。大部分医药企业在发展过程中因为业务拓展需要扩大企业规模,导致财务信息互通不到位、不及时,数据错报等问题。因此,大多数医药企业开始建设财务共享中心,实现财务信息的统一。将医药企业与我国发展大趋势相结合,利用因子分析法分析云南白药集团财务共享中心建设效果,为我国其他医药企业财务共享中心的建设提供建议,以期促进我国医药企业的发展。

学情调研的空间度量——以上海W校为例

本文以NSSE-China等为工具,综合过去几年W校学习性投入的问卷调查和全国各类院校的数据,运用因子分析,距离判别等方法,对该校学生近几年的学习情况进行了纵向比较,将W校与国内其他院校在各个学习指标上进行横向比较,以便衡量W高校在全国的位置,通过各种有效学习活动的程度来衡量大学教学质量,进行数据挖掘,得出一些科学结论,并进一步为W校培养优秀人才提出具体合理的建议。

新型AB_5型氧化合金/碳复合材料作为锂离子电池负极性能研究

对回收的废旧镍氢(MH-Ni)电池负极材料AB5型储氢合金进行改性再利用,经过高温氧化处理和添加改性石墨制成复合材料后,用于高性能锂离子电池负极材料。通过X射线衍射(XRD)和电子显微镜(SEM)对材料进行了简单表征,采用恒电流充放电仪对材料进行电化学性能测试。实验结果表明,所制得的AB5型氧化合金/碳复合材料的首次充电容量和放电容量分别为1639.7和681.2mAh/g,均远高于石墨的理论容量(372mAh/g),并且连续循环180次后可逆容量仍保持在420mAh/g,表现出了很高的比容量和良好的循环稳定性,可以成为能够取代商业化石墨负极的理想锂离子电池负极材料之一。

桑树种植技术

1、桑苗种植法 1）种植办法 种桑苗前先用磷肥加黄泥水浆根，提高成活率。坡地及半旱水田平沟种，水田起畦种，按上述规格拉线种植，种后徊土至青茎部，踏实后淋足定根水。

基于主成分分析的大学生学习情况调查分析——以上海J大学为例

本研究以"中国大学生学习性投入调查问卷"(NSSE-China)为工具,对"上海J大学"本科生作分层随机抽样调查,并进行统计分析,将结果和全国院校、地方本科院校、"211工程"院校和"985工程"院校作横向比较研究。总体揭示了2013年度上海J大学与其他院校的水平差异,定位了J大学在各类院校中所处位置。对J大学学生学习与发展情况有了比较全面科学的了解,此研究方法同样适用于其他各类院校。