消癌舒胶囊急性毒性及长期毒性的实验研究

目的研究消癌舒胶囊的急性毒性及长期毒性。方法雌性KM小鼠40只,随机分成4组,消癌舒给药剂量为2.36、2.94、3.68、4.6 g/kg,单次灌胃给药,每次0.2 mL/10 g,观察小鼠一般情况及中毒、死亡情况,连续观察14 d,测定半数致死量(LD50);雌性KM小鼠20只,消癌舒给药剂量为27.6 g/kg,分3次灌胃给药,给药容积0.4 mL/10 g,观察小鼠的一般情况及中毒反应,连续观察14 d,计算小鼠消癌舒的最大耐受量倍数;120只雌性SD大鼠随机分为4组(30只/组):消癌舒低、中、高剂量组(1、2.3、4.6 g/kg)及空白对照组,每日灌胃给药1次,每周测1次体重和摄食量,分别于给药3、6个月及停药1个月(恢复期)后,每组随机处死10只动物,并检测血液学、血清生化、脏器系数及各组织病理学指标。结果急性毒性实验显示消癌舒各组小鼠实验期间未见死亡,一般情况良好,不能求出LD50,小鼠的最大耐受量是人用量的375倍;长期毒性实验显示消癌舒给药3个月大鼠体重和摄食量均有降低(P<0.01),给药6个月大鼠摄食量降低(P<0.05),停药1个月均恢复正常;消癌舒给药3个月,给药组红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板(PLT)增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其它血液学及血清生化指标未见异常,连续给药6个月,给药组中性粒细胞百分比(NEUT)、尿素氮(UREA)、血糖(GLU)增加,淋巴细胞百分比(LYMPH)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其它血液学及血清生化指标未见异常,消癌舒停药1个月血液学及血清生化指标均恢复正常;给药3、6个月及恢复期消癌舒各剂量组大鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑、卵巢、子宫等脏器系数及其组织形态学均未见明显异常。结论消癌舒胶囊无明显急性毒性及长期用药毒性反应,临床用药量安全。

异钩藤碱抗血小板聚集和释放作用的研究

目的 探讨异钩藤碱(Isorhy)抗血小板聚集和释放的作用。方法 利用胶原和凝血酶诱导血小板聚集,将实验分为对照组,Isorhy低(0.33 mmol·L^(-1))、中(0.65 mmol·L^(-1))、高(1.30 mmol·L^(-1))剂量组和阳性药阿司匹林(ASA)(1.69 mmol·L^(-1))组。以比浊法测定Isorhy体外给药对家兔血小板聚集和解聚的影响,荧光分光光度法检测血小板五羟色胺(5-HT)的释放,硫代巴比妥法检测丙二醛(MDA)的含量,检测肝素凝血酶凝固时间(HTCT)确定血小板因子4(PF4)的释放。结果 Isorhy在0.33~1.30 mmol·L^(-1)浓度范围内能剂量依赖性地抑制胶原和凝血酶诱导的血小板聚集,并促进血小板解聚;Isorhy能够抑制血小板5-HT释放和MDA的生成,延长HTCT。结论 Isorhy具有抗血小板聚集和释放的作用。

人参总皂苷在实验性肺纤维化小鼠中的抗氧化损伤作用

目的探讨人参总皂苷(TG)对小鼠肺纤维化的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法 60只昆明种小鼠随机分为假手术组、模型组、TG 40,80和160 mg·kg-1组及阳性药醋酸泼尼松5 mg·kg-1组。气管内灌注博来霉素(BLM)5 mg·kg-1建立肺纤维化小鼠模型。制模次日ig给药,每天1次,连续28 d,计算小鼠肺系数、HE染色及Masson染色观察肺组织病理形态改变、实时荧光定量PCR法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)m RNA的表达;试剂盒检测小鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)、谷胱甘肽(GSH)含量、一氧化氮合酶(NOS)和髓过氧化物酶(MPO)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和羟自由基(·OH)的水平。结果与假手术组比较,模型组小鼠肺系数显著升高(P<0.05),肺泡炎及肺纤维化明显,α-SMA m RNA的表达明显升高(P<0.01),小鼠肺组织HYP,·OH,NOS和MPO活性升高(P<0.05),但GSH和T-AOC水平下降(P<0.05);TG和醋酸泼尼松给药后能显著降低模型小鼠的肺系数(P<0.05),减轻肺纤维化程度;TG可使模型小鼠肺组织匀浆中·OH,NOS,MPO和HYP活性降低(P<0.05),GSH和T-AOC的水平显著升高(P<0.05)。结论 TG能改善博来霉素所致小鼠肺纤维化,其作用机制可能与其增加机体的抗氧化能力,减轻氧化损伤有关。

人参茎叶总皂苷抑制肺纤维化小鼠血清氧化水平的研究

目的观察人参茎叶总皂苷(TG)对博莱霉素(BLM)致小鼠肺间质纤维化模型的保护作用。方法将120只昆明种小鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、人参茎叶总皂苷(40、80、160 mg/kg)组及醋酸泼尼松(5 mg/kg)组。气管内灌注博来霉素(5 mg/kg)建立小鼠肺纤维化模型,制模后连续给药28 d,观察各组小鼠肺组织病理形态改变,检测小鼠血清中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量,总抗氧化能力(T-AOC)、羟自由基(.OH)水平,超氧化物歧化酶(SOD)及髓过氧化物酶(MPO)活力。结果制模28 d后,模型组小鼠肺系数明显高于假手术对照组(P<0.01),肺泡炎及肺纤维化明显,血清中.OH、MPO水平及MDA的含量增高,GSH含量、T-AOC水平及SOD的活力显著下降(P<0.05)。与模型对照组比较,TG(80、160 mg/kg)及醋酸泼尼松给药能使模型小鼠的肺系数明显降低(P<0.01);肺纤维化程度明显减轻,且血清中.OH水平、MPO活力、MDA含量显著下降,而使GSH含量、T-AOC水平及SOD活力明显提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TG对博来霉素所致的小鼠肺纤维化具有保护作用,其作用机制可能与其抑制氧化损伤有关。

海马注射miR-181c对CCI模型大鼠机械痛和NF-L表达的影响

目的:在坐骨神经缩窄性损伤(CCI)大鼠海马背侧CA1区给予miR-181c激动剂及抑制剂,观察大鼠机械痛阈以及海马神经微丝轻链多肽(NF-L)表达变化。方法:雄性SD大鼠分为假手术组(sham)、CCI组+生理盐水组、CCI+miR-181c激动剂组和CCI+miR-181c抑制剂组。在术前和术后第1、3、5、7、10和14 d测定机械缩足反射阈值(MWT);免疫组化观察NF-L表达,Western Blot检测三结构蛋白2(TRIM2)、NF-L和N-甲基-D天门冬氨酸受体NR1亚单位(NMDAR1)的表达。结果:与sham组相比,CCI+生理盐水组MWT降低(P <0.05);与CCI组相比,miR-181c激动剂组MWT明显升高(P <0.05),而miR-181c抑制剂组MWT进一步降低(P <0.05)。免疫组化观察到,与sham组相比,CCI+生理盐水组NF-L阳性纤维减少;与CCI组相比,CCI+miR-181c激动剂组NF-L阳性纤维增多,而CCI+miR-181c激动剂组NF-L阳性纤维减少。Western Blot实验显示,与sham组相比,CCI+生理盐水组海马TRIM2的表达升高(P <0.05),而NF-L与NR1的表达下降(P <0.05);与CCI组相比,CCI+miR-181c激动剂组TRIM2表达下降(P <0.05)而NF-L与NMDAR1(NR1)表达上升(P <0.05);而CCI+miR-181c抑制剂组TRIM2表达上升(P <0.05),NF-L与NR1表达下降(P <0.05)。结论:海马CA1区给予miR-181c可以减轻CCI大鼠机械痛敏,抑制海马TRIM2表达,促进NF-L与NR1表达上调,减轻海马神经元损伤。

活塞式智能可调节液体减速带设计及振动分析

为了解决汽车通过减速带时影响车内乘员舒适感、轮胎磨损、汽车悬架损伤等问题,设计了一种活塞式智能可调节液体减速带。本减速带采用结构钢作为材料,承载能力强,环境影响较小,使用寿命长。减速带下方设置装有剪切增稠液的活塞缸,当车辆以高速或低速通过减速带时会使剪切增稠液呈现出固态或液态,从而迫使机动车在通过减速带时降低车速,达到减速的目的。本减速带还具有超高速智能防护功能,当车速过高时,本减速带也会降下,防止过大冲击对乘员造成伤害。借助MATLAB仿真软件,分别探讨了圆弧形和梯形减速带在相同高度和宽度的振动分析,得出在不同车速下机动车通过减速带时的纵向加速度的变化轨迹。结果表明,相同速度下,圆弧减速带和新型梯形减速带对车带来的影响较小,可以直接代替传统减速带。本文设计的活塞式智能可调减速带既克服了圆弧减速带高度不可调整的弊端,又克服了梯形减速带高速通过时受影响较大的弊端,可为未来先进智能减速带的设计提供理论依据和参考价值。

金钗石斛生物碱激活自噬抑制谷氨酸诱导的大鼠海马神经元轴突变性

目的观察金钗石斛生物碱(ADNL)对谷氨酸诱导的大鼠海马神经元轴突变性的保护作用,并探讨该保护作用与影响细胞自噬的关系。方法体外培养的大鼠海马神经元被随机分为对照组、模型组、ADNL(3.5、35、350μg·L^(-1)组、ADNL(350μg·L^(-1)+3^(-1)甲基腺嘌呤(3MA,1 mmol·L^(-1)或羟氯喹(HCQ,50μmol·L^(-1)组。谷氨酸(50μmol·L^(-1)诱导神经元轴突变性,βⅢTubulin免疫荧光观察轴突变性形态学改变并作定量分析,MTT比色法检测细胞活力,神经元过表达GFP^(-1)LC3B观察自噬体数量的变化,DQ^(-1)RED^(-1)BSA检测自噬体的降解,Western blot检测突触后密度蛋白^(-1)95(PSD95)、突触素(SYN)、LC3BⅠ、LC3BⅡ和p62蛋白水平。结果谷氨酸可诱导大鼠海马神经元轴突变性,变性指数显著增高,细胞活力、PSD95和SYN蛋白水平显著降低(P<0.05或P<0.01),除ADNL(3.5μg·L^(-1)对变性指数(72 h)、细胞活力和SYN蛋白水平未见显著影响(P>0.05)外,谷氨酸诱导的上述各指标的改变均被ADNL显著抑制,而且ADNL(350μg·L^(-1)对轴突变性的保护作用可被自噬抑制剂3MA拮抗。在谷氨酸诱导的轴突变性神经元中GFP^(-1)LC3B荧光斑点数量减少(P<0.01)、LC3BⅡ/LC3BⅠ比值降低(P<0.01),p62降解受阻(P<0.01),表明自噬功能被抑制。不同浓度的ADNL均可增加GFP^(-1)LC3B荧光斑点数量,增高LC3BⅡ/LC3BⅠ比值,促进p62和DQ^(-1)RED^(-1)BSA降解,其中对GFP^(-1)LC3B荧光斑点的影响呈浓度依赖性。ADNL(350μg·L^(-1)对自噬功能的影响可被自噬抑制剂3MA或HCQ拮抗。结论 ADNL通过激活自噬改善谷氨酸诱导的大鼠海马神经元轴突变性。

柚皮素对糖尿病肝损伤小鼠的保护作用

目的观察柚皮素对糖尿病肝损伤小鼠的保护作用。方法高糖高脂饲料喂养4周后采用小剂量链脲佐菌素(STZ)连续5 d腹腔注射建立小鼠糖尿病模型,制模7 d后随机分为模型组,柚皮素低、中、高剂量(30、 60、 120 mg·kg^-1·d^-1)组和阳性对照(二甲双胍120 mg·kg^-1·d^-1)组(n=15),另选正常小鼠分为正常对照组和正常给药(柚皮素120 mg·kg^-1·d^-1)组(n=6),连续灌胃给药8周,监测小鼠空腹血糖(FBG)。小动物超声检测肝脏病理改变,取血检测小鼠血脂和肝功能水平,肝脏称重,采用HE染色和油红O染色检查小鼠肝脏组织病理学和脂质沉积情况。结果与正常对照组比较,模型组小鼠FBG显著增高(P <0.05);肝肾回声比值和肝脏指数显著增加(P <0.05);血总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均显著增加(P <0.05);肝功能天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)显著增加(P <0.05),而白蛋白(ALB)、 ALB-球蛋白(GLOB)比值显著降低(P <0.05)。正常给药组与正常对照组比较各指标均无显著变化(P>0.05)。与模型组比较,柚皮素中、高剂量组FBG和肝肾回声比值均显著降低(P <0.05);柚皮素高剂量组肝脏指数降低(P <0.05), TC、 TG和LDL-C水平显著下降(P <0.05), HDL-C显著升高(P <0.05),AST和ALT显著降低(P <0.05), ALB显著上升(P <0.05);柚皮素高剂量组和阳性对照组比较各指标均无显著差异(P> 0.05)。结论柚皮素可降低糖尿病肝损伤小鼠血糖,改善血脂水平和肝功能,减少肝脏脂质蓄积。

加味五味石膏汤通过调节Th1/Th2免疫失衡及抑制NLRP3/caspase-1炎症小体对支气管哮喘小鼠的保护作用

目的:考察加味五味石膏汤对卵清蛋白(Optical Variable Attenuator,OVA)所致的支气管哮喘(Bronchial Asthma,BA)小鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。方法:40只BALB/c雌性小鼠随机分为5组:空白对照组、OVA模型组、氯雷他定0. 01 g/kg组、加味五味石膏汤5. 46 g/kg、10. 92 g/kg组。每组8只。除空白对照组外,其余均采用OVA致敏和激发来制备哮喘模型。除空白对照组和OVA模型组外,其余各组致敏后21天～30天连续给药10 d干预。观察小鼠的整体情况,评估小鼠哮喘发作的程度;采用HE染色法观察支气管病理学改变;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法检测血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中免疫球蛋白E(Ig E)、IL-4和IL-5的水平;采用Western Blot法检测肺组织中蛋白的表达情况。结果:与空白对照组相比,OVA模型组小鼠出现明显的哮喘发作症状,血清和BALF中Ig E、IL-4和IL-5水平显著升高,而加味五味石膏汤5. 46 g/kg、10. 92 g/kg能显著缓解小鼠的哮喘症状,显著抑制血清和BALF中Ig E、IL-4和IL-5水平的升高,显著降低肺组织中NLRP3和caspase-1蛋白表达。结论:加味五味石膏汤对OVA所致的小鼠支气管哮喘具有明显的治疗作用,与氯雷他定的治疗效果相当,其机制可能与调节Th1/Th2免疫失衡及抑制NLRP3/caspase-1炎症小体信号通路介导有关。