蛋白酶体抑制剂MG132对慢性缺氧致小鼠记忆损伤的作用及其机制

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132对慢性缺氧所致小鼠记忆功能损伤的作用及其机制。方法(1)利用低氧工作站构建小鼠中脑多巴胺能神经元MN9D细胞缺氧损伤模型。将MN9D细胞分为常氧组及缺氧12 h、24 h和48 h组,观察缺氧对MN9D细胞中酪氨酸羟化酶(TH)、泛素的K48链(Ub-K48)和Ub-K63表达的影响;将MN9D细胞分为常氧组、缺氧组、缺氧+MG132(25、50、100、200)μmol/L组,观察MG132对缺氧细胞中上述蛋白表达的影响。(2)利用低压舱建立低压缺氧小鼠记忆功能损伤模型。将C57小鼠随机分为常氧组、缺氧3 d组、缺氧21 d组,每组10只,观察低压低氧对小鼠中脑黑质致密部(SNc)TH、Ub-K48和Ub-K63表达的影响;将小鼠随机分为常氧组、缺氧21 d组、缺氧21 d+MG132组,每组8只,观察MG132对缺氧所致小鼠空间记忆损伤的影响。(3)采用Western blotting检测不同缺氧时长及MG132预处理再低氧处理的MN9D细胞中TH、Ub-K48和Ub-K63的蛋白表达水平;采用新物体识别测试检测各组小鼠记忆功能,免疫荧光染色检测SNc区TH阳性免疫反应面积百分比,Western blotting检测小鼠SNc区TH、Ub-K48和Ub-K63表达水平。结果(1)与常氧组比较,缺氧24 h组MN9D细胞中Ub-K48和Ub-K63表达水平增高(P<0.05),TH表达水平降低(P<0.05);各缺氧组Ub-K48/TH和Ub-K63/TH表达水平均增高(P<0.05)。与缺氧组比较,缺氧+MG132100μmol/L组和缺氧+MG132200μmol/L组MN9D细胞中Ub-K48/TH和Ub-K63/TH表达水平降低(P<0.05)。(2)与常氧组比较,缺氧3 d组和缺氧21 d组小鼠中脑SNc区TH表达水平降低(P<0.001),Ub-K48/TH和Ub-K63/TH表达水平升高(P<0.05);缺氧21 d组小鼠新物体识别指数降低(P<0.01),SNc区多巴胺能神经元TH阳性免疫反应面积百分比降低(P<0.05)。与缺氧21 d组比较,缺氧21 d+MG132组小鼠新物体识别指数升高(P<0.01)。结论蛋白酶体抑制剂MG132可改善慢性缺氧所致小鼠记忆损伤,其机制可能与抑制Ub-K48和Ub-K63,上调多巴胺能神经元TH表达有关。

羟基脲诱导胚胎样血红蛋白表达对小鼠缺氧的改善作用

目的 探讨羟基脲(hydroxyurea,HU)对密闭缺氧小鼠的保护作用及机制。方法 将60只6~8周龄、体质量18~22g的雄性C57BL/6J小鼠随机分成常氧对照组(NC组,n=10)、常氧HU组(NHU组,n=10)、缺氧对照组(HC组,n=20)、缺氧HU组(HHU组,n=20)。HU组每天腹腔注射HU100mg/kg;对照组每天注射等量生理盐水。4周后取NHU组和NC组小鼠的骨髓进行转录组测序;再将HHU组和HC组置于密封瓶,进行密闭缺氧,记录其生存时间;在缺氧15min时,取脑、肾组织进行免疫组化,同时取未缺氧的NHU组和NC组脑、肾组织进行对照;并对骨髓进行RT-qPCR验证,外周血进行Westernblot验证。结果 HHU组小鼠密闭缺氧的生存时间显著延长(P<0.05);脑和肾脏缺氧程度显著降低(P<0.05)。外周血氧亲和力显著提高,且P50与小鼠生存时间存在显著的负相关关系(Pearson=-0.738,P<0.01)。转录组共检测到65389个基因,其中NHU组上调基因50个,下调基因272个(|log2FC|≥1,Q<0.05),对差异显著的基因进行功能富集,结果发现在分子组成上,血红蛋白复合体居于首位;分子功能上,主要富集到影响血红蛋白各亚基结合的分子;生物学功能上主要富集到红细胞发育相关的生物学过程。差异分子中,Erfe、Hbb-y、Hbb-bh1、Hba-x>1.5倍以上,而下调基因有红系发育相关基因Klf1、Sox6、Gata1等;经验证,NHU组Hbb-y、Hbb-bh1、Hba-x的mRNA显著升高,外周血HbE(ε-globin)蛋白表达增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HU对密闭缺氧小鼠具有明显的保护作用,可能与HU诱导高氧亲和力的胚胎样血红蛋白表达,从而促进携氧的作用有关。

抗大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体制备及其生物学特性鉴定

【目的】制备大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体,为大片吸虫病的免疫诊断、防治等研究奠定基础。【方法】利用杂交瘤技术,以大片吸虫分泌排泄抗原为免疫原制备单克隆抗体,并用ELISA、硫氰酸盐洗脱法等方法鉴定其生物学特性。【结果】通过间接ELISA筛选及3次亚克隆后,共获得5株大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为6D3、6B4、7D2、7D1和7D4。经鉴定,发现5株杂交瘤细胞染色体数为90～110条,均大于亲本细胞,其亚类鉴定分别属于IgG2b、IgM、IgM、IgG1和IgM,其轻链均为κ型;5株单克隆抗体(6D3、6B4、7D2、7D1、7D4)的上清效价分别为1:400、1:3200、1:25600、1:6400和1:6400,腹水效价分别为1:104、1:104、1:105、1:107和1:106;而表位测定结果表明,5株单克隆抗体中,6D3与7D1、7D2以及7D4与7D1、7D2作用于不同表位,6D3与6B4可能识别同一表位或重叠表位,或同一表位有空间位阻,7D4与6D3以及6B4与7D4、7D1、7D2可能具有空间位阻;5株单克隆抗体的相对亲和力为:6B4>7D4>7D1>6D3>7D2;5株杂交瘤细胞株均能稳定地分泌单克隆抗体。【结论】制备获得的分泌排泄抗原单克隆抗体可用于大片吸虫病的诊断和免疫机理等方面的进一步研究。

复制慢性高原病动物模型实验教学中注意事项分析

该文主要介绍实验教学中高原红细胞增多症合并高原心脏病动物模型复制的方法和注意事项,通过模型的复制,以及对存在的具体问题和注意事项的逐步剖析,使学生全面了解实验方法和取材方法,在实验前熟悉低压舱使用、动物饲养及动物取材注意事项,为学生提供一个标准化的模型复制程序,使复制高原红细胞增多症合并高原心脏病的动物模型更加稳定,降低动物的死亡率,提高模型复制的成功率,确保模型复制过程中进舱人员的安全。

缺氧上调成纤维细胞葡萄糖转运蛋白1的表达

目的探讨成纤维细胞缺氧后葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT-1)表达特点与规律。方法分离培养大鼠肺成纤维细胞,将细胞分成4组(n=3):常氧组[普通培养箱(5%CO2,21%O2,37℃)]及缺氧12、24、48 h组[置缺氧培养箱(1%O2,5%CO2,94%N2,37℃)中培养12、24、48 h]。取各组细胞进行免疫荧光和免疫印迹分析蛋白水平的表达变化,RT-PCR分析细胞GLUT-1mRNA水平的变化,GOD-PAP测定培养上清葡萄糖含量。结果免疫印迹检测结果显示,缺氧12、24、48 h组GLUT-1的蛋白表达均显著高于常氧组(P<0.05),缺氧48 h组GLUT-1表达显著高于缺氧12、24 h组(P<0.05),缺氧24 h组与缺氧12 h组差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果与免疫印迹结果相一致,缺氧12、24、48 h组GLUT-1蛋白表达水平均高于常氧组;RT-PCR及琼脂糖凝胶电泳结果显示,GLUT-1 mRNA表达水平随缺氧时间逐渐升高,缺氧12 h组与常氧组相比差异无统计学意义(P>0.05),缺氧24、48 h组均显著高于常氧组(P<0.05),缺氧48 h组显著高于缺氧24 h组(P<0.05);缺氧12、24、48 h组上清中葡萄糖含量均较常氧组显著降低(P<0.05)。结论缺氧上调大鼠肺成纤维细胞GLUT-1的表达,有利于细胞在缺氧状态下对葡萄糖的摄取。

缺氧对大鼠肺成纤维细胞甲酰肽受体1表达的影响

目的研究缺氧对大鼠肺成纤维细胞甲酰肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)表达的影响。方法分离大鼠肺成纤维细胞,用48孔Boyden趋化小室观察大鼠成纤维细胞在不同浓度(0、10、100、1000 nmol/L组)的FPR激动剂(fMLF)作用下的趋化能力。将细胞置于低氧培养箱中培养(1%O2,5%CO2,94%N2,37℃)24 h,取细胞培养上清,结合FPR特异性拮抗剂tBoc处理,检测缺氧培养上清中FPR介导的趋化活性。将细胞分为常氧组[普通培养箱(5%CO2,95%空气,37℃)]和缺氧组[置低氧培养箱中培养(1%O2,5%CO2,94%N2,37℃)2、12、24 h],用免疫印迹、PCR检测大鼠肺成纤维细胞FPR1和FPR激活物膜联蛋白A1(annexin A1,AnxA1)的蛋白、mRNA水平。不同浓度fMLF作用下细胞中FPR1、AnxA1的蛋白水平。使用tBoc预处理细胞并缺氧24 h后,检测FPR1、AnxA1的蛋白水平。结果fMLF可明显引起大鼠肺成纤维细胞趋化100 nmol/L组引起趋化至膜下侧的细胞数增多最为显著(P<0.05)。缺氧后的细胞培养上清趋化活性显著高于常氧组(P<0.05),加入tBoc后其趋化活性显著降低(P<0.05),降低程度显著高于常氧组。缺氧12 h,肺成纤维细胞的FPR1蛋白水平显著增加(P<0.05)。缺氧12、24 h与缺氧0 h组相比较,AnxA1的蛋白水平显著增加(P<0.05)。与常氧组相比较肺成纤维细胞的FPR1、AnxA1的mRNA水平显著增加(P<0.05);随着fMLF浓度的升高,FPR1和AnxA1的蛋白表达水平逐渐增加,100、1000 nmol/L组与0 nmol/L组相比,具有显著性差异(P<0.05)。甲酰肽受体拮抗剂tBoc可以显著削弱此效应。结论原代培养的大鼠肺成纤维细胞表达FPR1,缺氧促进大鼠肺成纤维细胞FPR1及其激活物表达与分泌,FPR1激活可进一步增强受体及其激活物的表达与分泌。

高原生理学与高原病理学教学内容的思考

文章分别从高原生理学与高原病理学的学科内涵,两个学科混合的利弊及高原生理学与高原病理学学科体系的建立几个方面进行了详细阐述。两个学科体系的建立,对于改进高原医学专业的授课内容,调整教学方案,促进教学改革等有重要意义。

利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对线粒体功能的影响

目的利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对HUVEC细胞和U87细胞线粒体功能的影响。方法利用细胞线粒体应激试剂盒,在不同浓度的HUVEC细胞和U87细胞中加入抑制剂(寡霉素、解偶联剂、鱼藤酮和抗霉素A),根据细胞浓度分为2000组、4000组、6000组和8000组,根据有无血清和不同的解偶联剂浓度分为血清+低解偶联剂组、血清+高解偶联剂组、无血清+低解偶联剂组和无血清+高解偶联剂组。在Seahorse XF-96中测定线粒体的耗氧率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR),并比较HUVEC细胞和U87细胞各组线粒体的基础氧耗、质子漏、最大呼吸能力、非线粒体的氧耗、储备的呼吸能力、三磷酸腺苷(ATP)生成能力、线粒体呼吸潜力和偶联效率;比较HUVEC细胞和U87细胞之间上述指标的差异;观察血清和解偶联剂浓度对HUVEC细胞线粒体功能的影响。结果在HUVEC细胞和U87细胞中,2000组OCR显著低于4000组、6000组和8000组(P<0.01);2000组的ECAR显著低于4000组(P<0.01),4000组显著低于6000组和8000组(P<0.01)。在HUVEC细胞中,与2000组比较,6000组和8000组的基础氧耗、储备的呼吸能力、ATP生成能力和最大呼吸能力增强(P<0.05),8000组非线粒体的氧耗和质子漏增强(P<0.05);在U87细胞中,与2000组比较,6000组和8000组的基础氧耗、非线粒体的氧耗和最大呼吸能力增强(P<0.05),8000组ATP生成能力、储备的呼吸能力和质子漏增强(P<0.05);HUVEC细胞和U87细胞各组间线粒体的偶联效率和线粒体呼吸潜力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。U87细胞8000组的质子漏高于HUVEC细胞(P<0.05);HUVEC细胞2000组、6000组和8000组的偶联效率高于U87细胞(P<0.05);HUVEC细胞6000组的ATP生成能力和储备的呼吸能力高于U87细胞(P<0.05);HUVEC细胞和U87细胞各组基础氧耗、最大呼吸能力、非线粒体的氧耗、线粒体呼吸潜力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。血清+低解偶联剂组储备的呼吸能力和线粒体呼吸潜力高于无血清+低解偶联剂组(P<0.05),其余指标组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);血清+高解偶联剂组和无血清+高解偶联剂组的线粒体功能各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论随着细胞浓度的不断增加,HUVEC细胞和U87细胞的OCR和ECAR不断升高,细胞浓度会影响两种细胞线粒体的OCR和ECAR,HUVEC细胞和U87细胞的质子漏和偶联效率存在显著差异,血清会影响HUVEC细胞线粒体储备的呼吸能力和线粒体呼吸潜力。

海豚链球菌疫苗对罗非鱼免疫功能的影响

以海豚链球菌Streptococcus iniae灭活菌苗为免疫原,通过注射、浸泡、口服3种途径对体重为(100±10)g的奥尼罗非鱼Oreochromis niloticus进行免疫,在免疫前和免疫后的第3、7、10、14、21天对试验鱼进行尾静脉采血,测定其血液中白细胞的数量、各类白细胞的数量及其吞噬活性,以及血清的抗菌活力、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶(SOD)活力及抗体水平。在免疫后第22天对所有试验鱼按照1.0×107cfu/尾进行攻毒。结果表明:各免疫组白细胞总数、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞数量均显著高于对照组(P<0.05);血清的抗菌活力、溶菌酶活性和抗体水平与对照组差异显著(P<0.05),SOD活力和对照组无显著差异(P>0.05);免疫的罗非鱼对海豚链球菌的抵抗力明显增强,其中注射组罗非鱼的免疫能力明显高于浸泡和口服组,加强免疫组的免疫能力均有明显增强趋势。

5-羟甲基糠醛对模拟高原大鼠血红蛋白氧结合特性及游泳耐力和空间记忆能力的影响

目的探讨血红蛋白变构剂5-羟甲基糠醛[5-(Hydroxymethyl)-2-furfural,5-HMF]对血红蛋白氧结合特性的作用及其对大鼠耐缺氧能力的影响。方法将SD成年雄性大鼠随机分为4组:平原空白组、高原空白组、平原用药组、高原用药组。空白组用生理盐水、用药组以50 mg/kg 5-HMF腹腔给药。高原暴露采用模拟海拔5 000 m低压舱内24 h。各组按原剂量经腹腔重复给药30 min后从腹主动脉采血,测血气及氧平衡曲线。大鼠经过游泳训练后,负重游泳力竭实验检测负重游泳力竭时间。大鼠经过记忆训练后,Morris水迷宫空间探索试验测大鼠空间记忆能力。结果高原空白组负重游泳力竭时间、目标象限大鼠滞留时间、穿越平台位置次数、血氧饱和度、血氧分压等指标,较平原空白组显著降低(P<0.05),高原用药后这些指标显著升高,但是负重游泳力竭时间、目标象限大鼠滞留时间仍低于平原水平。各给药组P50、希尔系数均较相应空白组显著降低(P<0.05)。平原用药组较平原空白组负重游泳力竭时间显著降低(P<0.05),血氧分压显著升高,其余指标无统计学差异(P>0.05)。结论 5-HMF在低氧条件下可增加血红蛋白氧亲和力、血氧饱和度及血氧分压,增强游泳耐力和空间记忆能力。

天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

本试验旨在研究天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响。从正常小鼠分离脾脏淋巴细胞体外培养,在细胞培养体系中分别加入终浓度为50、100、200、400 mg/L天门冬多糖或配合刀豆素(5 mg/L)作用24、487、2 h,以MTT法测定细胞的增殖程度。结果表明,天门冬多糖可显著促进体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞增殖,并与ConA有协同作用。

植物雌激素通过缺氧诱导因子-1α与核因子-κB下调缺氧肺泡上皮细胞膜联蛋白A1的表达

目的从人肺泡上皮细胞甲酰肽受体激动剂——膜联蛋白A1(Annexin A1,AnxA1)的表达变化,探讨植物雌激素影响缺氧肺部炎症浸润的机制。方法人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)接种于60 mm培养皿中常规培养,待培养皿中细胞长满约70%,根据是否用药分为:对照组(溶剂DMSO对照)、染料木黄酮(genistein,Gen)组、大豆苷元(daidzein,DD)组,每组细胞再根据是否缺氧再分为常氧组(N)、缺氧组(H)。Gen组、DD组于缺氧处理前分别加入Gen及DD,终浓度均为15μmol/L。缺氧组细胞置于缺氧培养箱(1%O2)24 h。取细胞培养上清及细胞裂解离心上清,结合甲酰肽受体特异性抑制剂tBoc2,通过趋化实验,检测其甲酰肽受体激动活性。用Western blot分析AnxA1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、核因子-κB(NF-κB)在蛋白水平的变化,用RT2-PCR法分析其mRNA水平的变化。结果缺氧后的细胞冻融上清及培养上清趋化活性显著高于常氧组(P<0.05),而植物雌激素处理后,两种上清的趋化活性均显著高于对照组(P<0.05)。Western blot与RT2-PCR检测结果显示,缺氧组AnxA1在蛋白水平和mRNA水平均高于常氧组(P<0.05),两种植物雌激素不同程度地削弱了缺氧对AnxA1的上调效果,同时对HIF-1α、NF-κB的蛋白水平也产生同样的影响。结论植物雌激素削弱了缺氧对AnxA1基因表达的上调效应,其机制与HIF-1α、NF-κB信号途径有关。

伊氏锥虫抗原变异型及其优势代表变异体的分离鉴定

以连续克隆分离的方法,从1株水牛伊氏锥虫中分离到40个克隆群体,从中分离鉴定出18个抗原变异型。经间接免疫荧光试验检测,发现其中2个抗原变异型(即HbTat1.18和HbTat1.15)分别能与约80%和60%克隆群体的血清发生较强的阳性反应,初步确定这2个抗原变异型为该虫株的优势代表变异体。这为伊氏锥虫免疫预防、免疫诊断、分子诊断以及遗传进化等的研究奠定了良好的基础。

奥尼罗非鱼血清免疫球蛋白的纯化及分子量的初步分析

通过饱和硫酸铵盐析结合Sephadex G-200柱层析的方法,纯化制备了健康非免疫状态下奥尼罗非鱼的免疫球蛋白,进行变性还原条件下的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹试验对血清的免疫球蛋白进行初步分析,发现SDS-PAGE电泳条件下血清重链分子量为85 kD,轻链分子量为30 kD。如果罗非鱼血清免疫球蛋白在自然状态与其他硬骨鱼类一样也为四聚体,那么其总分子量的理论值应为920 kD。

低氧促进Th17细胞浸润于肺组织并与肺血管改建相关

目的:观察低压低氧时肺组织中维甲酸相关孤儿受体(ROR)γt的mRNA表达水平及白细胞介素17(IL-17)水平的变化,探讨Th17细胞与缺氧肺血管改建的关系。方法:50只雄性BALB/c小鼠按低氧时间随机分为0 d、3 d、7 d、14 d和28 d组,每组10只。低压低氧组小鼠均置入模拟海拔6 000 m的低压舱内饲养3 d、7 d、14 d和28 d。常氧组置常压常氧环境下饲养(即0 d组)。于相应时点通过心导管检测右室收缩压,随后快速处死取材,测量右心室重量指数,用流式细胞术检测脾脏组织Th17细胞(CD4+IL-17+RORγt+)的比例,用ELISA法检测血清中IL-4、IL-6、IL-17水平及肺组织中IL-17水平,采用real-time PCR法检测肺组织RORγt的mRNA表达水平。结果:与对照组(0 d组)相比,低压低氧7 d、14 d和28 d组小鼠右心室收缩压力、右心肥厚指数和血清IL-17含量均升高,其差异有统计学意义(P<0.05);脾脏组织中IL-17+RORγt+CD4+T细胞的百分比随缺氧时间延长呈上升趋势,14 d和28 d组与对照组相比差异显著(P<0.01);7 d、14 d和28 d组肺组织中RORγt的mRNA表达与对照组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);14 d和28 d组肺组织中IL-17水平与对照组相比显著升高(P<0.01)。肺组织中RORγt的mRNA表达水平、IL-17表达量与心室收缩压、右室肥厚指数呈显著正相关。结论:低压低氧促进脾脏T0细胞向Th17细胞分化,肺组织中RORγt的mRNA表达水平及IL-17水平显著升高,提示Th17细胞可能参与缺氧性肺动脉高压及肺血管改建的发生。

低氧上调肺腺癌细胞中Annexin A1的表达

背景与目的肿瘤的生长通常会面临缺血缺氧,已有的研究表明膜联蛋白Anx A1(Annexin A1)与肿瘤的关系密切,本研究旨在探讨低氧对肺腺癌细胞Anx A1表达的影响。方法将人肺腺癌细胞A549扩增后,分别在常氧(37oC、5%CO2、21%O2)和低氧(37oC、5%CO2、1%O2)条件下培养4 h、12 h、24 h,随后进行RT-PCR,观察Annexin A1 mRNA水平的变化,Western blot方法观察蛋白表达的变化;测定各组细胞中活性氧(reactive oxygen spe-cies,ROS)的含量,Western blot检测NF-κB核转位;分别以ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和NF-κB抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸脂(PDTC)干预后,测定各组细胞中Anx A1蛋白水平的变化。结果 RT-PCR结果显示低氧4h后Anx A1 mRNA水平上升,与常氧组比较有统计学差异(P<0.05),但随后缓慢下降;Western blot结果显示低氧上调A549细胞中Anx A1蛋白的表达,在缺氧4 h时尤为明显;随着细胞缺氧时间的延长,ROS的量也逐渐递增;ROS清除剂NAC和NF-κB抑制剂PDTC明显降低缺氧所致的Anx A1蛋白水平增加。结论低氧上调肺腺癌A549细胞中AnnexinA1 mRNA和蛋白水平的表达,ROS-NF-κB信号通路可能参与这一过程。

小鼠PE右心室导管的制作及应用研究

目的建立一种制作简单、成本低廉、性能稳定的小鼠右心室压力检测方法。方法选取一段长度约为15cm的PE-50导管（外径：0．9mm，内径：0．5mm），将一端制成适宜弧度，另一端插入7号注射器针头连接压力换能器。选取80只SPF级雄性C57BL／6小鼠，用自制PE右心室导管行右侧颈外静脉插管至右心室，记录成功例数和每次操作时间。另取40只SPF级雄性C57BL／6小鼠随机分为对照组和慢性低压低氧组，每组20只。慢性低压低氧组小鼠在模拟海拔5000m低压舱内不间断喂养4周，对照组在舱外同时喂养。模型复制成功后，用自制PE右心室导管行右心室插管，记录右心室收缩压；分离左、右心室并称质量，计算Hermann-Willson指数并与右心室收缩压进行相关性分析。结果采用此自制PE右心室导管，右心室插管成功率为90％（72／80），从分离血管至检测出右心室波形所需时间每只3～5rain。慢性低压低氧组右心室收缩压（39．52±4．34）mmHg和Hermann-Willson指数0．356±0．039均显著高于对照组（21．24±2．70）mmHg、0．256土0．020，二者呈显著正相关（P〈0．01）。结论采用本法检测右心室压力，制作简单，使用方便快捷，成功率高，性能稳定且成本低廉，可以推广应用。

血红蛋白变构剂及其抗缺氧效应的研究进展

向机体需氧细胞运输氧是红细胞（RBC）的主要功能，血红蛋白（Hb）是其完成功能的主要载体。Hb每克可结合1．34ml氧，约为血浆溶解氧量的70倍。缺氧环境的适应与Hb的氧亲和力极为相关，一些高原动物，如鹿鼠、黄嘴针尾鸭、斑头雁等。通过Hb氨基酸突变引起氧亲和力增高，以达到适应高原的目的。

抗水牛伊氏锥虫变异表面糖蛋白抗原单克隆抗体的研制

用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白(variant surface glucoprotein,VSG)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过3次克隆和间接ELISA方法筛选,获得3D7、5B9 2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用间接ELISA方法检测杂交瘤细胞培养液上清效价和小鼠腹水效价,其中细胞培养上清效价分别为1∶6400和1∶12800,腹水效价分别为1∶105和1∶106。单抗的亚型鉴定结果表明,3D7、5B9分泌的抗体都为IgG1亚类κ链。

脐带血与成人血波尔效应及协同效应差异的研究

目的探讨脐带血与成人血波尔效应及协同效应的差异。方法收集新鲜脐带血与成人血各3份,用氧平衡曲线仪,按先检测氧离曲线,加10μl 1 mol/L HCl后继续检测氧离曲线,加15μl 1 mol/L Na OH后再次检测氧合曲线的顺序,检测各样本的氧离(合)曲线,并读取各样本氧离(合)曲线的P50与希尔系数(HC)。比较两组样本P50的变化值(ΔP50)与变化率(%ΔP50)。根据各组均值用希尔方程绘制曲线比较移动幅度。结果在HCl及Na OH作用下,脐带血P50、HCHCl、HCNa OH、ΔP50HCl、%ΔP50HCl、ΔP50Na OH、%ΔP50Na OH均显著低于成人血(P<0.05),氧离(合)曲线移动幅度不及成人血。结论在酸(碱)环境下,脐带血氧亲和力高于成人血,而波尔效应及协同效应均差于成人血。