Caspase-3在成年ALS转基因模型鼠脊髓中的表达变化

目的研究Caspase-3蛋白在肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓不同发病时期的表达变化,探讨ALS发病过程中细胞凋亡情况。方法利用免疫组织化学(SP二步法)方法检测Caspase-3在ALS转基因模型鼠脊髓的发病前期(95d)、发病中期(108d)、发病后期(122d)表达变化,并与同窝野生型鼠(WT)比较。结果 ALS转基因模型鼠脊髓中Caspase-3阳性细胞在发病前期(95d)变化不明显,与同窝野生型鼠比较,差异无显著性;发病中期(108d)Caspase-3阳性细胞明显增多,与同窝野生型鼠比较,差异具有统计学意义;发病后期(122d)Caspase-3阳性细胞显著增多,但较发病前期有所下降,与同窝野生型鼠比较,差异具有统计学意义。结论 Caspase-3阳性细胞在ALS发病不同时期发生变化,表明细胞凋亡在ALS的发生发展中发挥着重要作用。

分泌型卷曲相关蛋白4在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,及sFRP4在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠95d、108d和122d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定,分离脊髓和制备冷冻切片,部分鼠分离脊髓,提取RNA和蛋白。分别应用免疫组织化学染色技术、RT-PCR和Western blotting检测sFRP4 mRNA和蛋白水平在不同时间点的变化情况。结果与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠sFRP4 mRNA和蛋白表达在95d、108d和122d均升高(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,sFRP4阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角,白质轴突呈阳性反应,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠sFRP4阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示,sFRP4标记的阳性细胞共表达胶质纤维酸性蛋白和β-tubulinⅢ,ALS转基因鼠sFRP4/GFAP双阳性细胞增多。结论在ALS转基因鼠发病脊髓中sFRP4阳性细胞明显增多,sFRP4 mRNA和蛋白表达升高,表明sFRP4与肌萎缩脊髓侧索硬化症的发生密切相关。

芒果苷对H_2O_2诱导的BRL细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨芒果苷对过氧化氢诱导的正常大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用。方法选取正常大鼠肝细胞株BRL,通过过氧化氢诱导法制备细胞氧化损伤模型,实验设对照组、H_2O_2组、芒果苷组。HE染色、台盼蓝染色观察细胞形态变化和存活率变化;比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达变化。结果对照组BRL细胞贴壁生长良好,排列紧密。H_2O_2诱导后细胞形态不规则,胞膜皱缩,贴壁能力下降;细胞存活率降低;抗氧化酶SOD、GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P<0.05);Bax和Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。与H_2O_2组相比,芒果苷可显著改善H_2O_2引起的细胞形态变化,提高细胞存活率;提高SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05);抑制Bax和Caspase-3蛋白表达(P<0.05),上调Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。结论芒果苷对BRL细胞氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与其提高细胞清除氧自由基能力和抑制细胞凋亡有关。

《系统解剖学》PPT课件制作体会

系统解剖学是医学相关专业的基础课程,其内容抽象,专有名词多,结构复杂,依托PPT课件进行教学可以促进学生对知识的理解记忆,课件制作也成为教师的基本功之一。在PPT课件制作过程中要注重教学设计的重要性,同时也要做到页面简洁,图片文字清晰,内容间距离合适,字体、字号和颜色合理,恰当地运用视频、音频等,以达到界面清新、主次分明、动静结合、符合学习者视觉心理,有利于学习者观看、体会和思考的效果。

N-acetylserotonin对H_2O_2诱导大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨N-acetylserotonin(NAS)对H2O2诱导正常大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用。方法:选择正常大鼠肝细胞株BRL,采用H2O2诱导法制备BRL细胞氧化应激损伤模型,HE染色和台盼蓝染色观察细胞形态及细胞存活率的变化;比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。结果:对照组BRL细胞贴壁生长良好,排列紧密,胞膜完整,细胞界限清晰。H2O2诱导后细胞膜皱缩,形态不规则,细胞界限模糊,贴壁能力下降,出现大片细胞缺失;细胞存活率下降;SOD活性降低,而MDA含量升高。NAS可明显改善H2O2引起的细胞形态变化,使细胞存活率升高,增加SOD活性并降低MDA含量。结论:NAS可通过增强抗氧化系统的激活、减轻抗氧化系统受抑制的程度,发挥对H2O2诱导的BRL细胞氧化损伤的保护作用。

Neurogenin 1在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化

目的：研究neurogenin 1 （Ngn1）转录因子在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症（ALS）转基因模型鼠脊髓内的表达变化,探讨其在ALS转基因鼠发病中的作用.方法：选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各18只,分别于95、108 d和122 d取材,部分鼠经4％多聚甲醛心灌注固定,分离脊髓、制备冷冻切片;部分鼠分离脊髓、提取蛋白和RNA,分别应用免疫荧光显色、免疫印迹和RT-PCR检测Ngnl蛋白及mRNA在ALS转基因鼠发病中的变化.结果：与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Ngnl mRNA和蛋白表达在95、108 d和122 d均降低.免疫荧光实验结果显示,Ngnl阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Ngnl阳性细胞光密度值明显减小.结论：在ALS转基因鼠发病脊髓中Ngnl阳性细胞光密度值明显减少,mRNA和蛋白表达降低,表明Ngnl与ALS的发生密切相关.

红景天苷药理作用及其机制研究进展

红景天(Rhodiola),又名罗森根,蔷薇根景天,属于景天科多年生草本植物,极具营养价值,在我国东北、四川和西藏等地区广泛生长,是一种具有食用价值和药用价值的多功能植物,在我国具有几千年的应用历史。大量研究发现,该药材具有抗氧化、抗炎、抗癌、调节代谢和神经保护等功效,可用于神经退行性疾病、心血管疾病、糖尿病、癌症等许多疾病的治疗。

Wnt11及其受体Fzd5在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓内的表达变化

目的检测Wnt11及其受体Fzd5在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,探讨Wnt11及其受体Fzd5在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠龄95 d、108d、122 d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定、分离脊髓、冰冻切片,应用免疫荧光技术,检测脊髓中Wnt11及其受体Fzd5的表达变化;部分鼠取出脊髓、匀浆,应用RT-PCR技术检测不同时间点Wnt11及其受体Fzd5 mRNA的表达变化。结果免疫荧光结果显示,与同窝野生型鼠比较,95 d、108 d和122 d龄ALS转基因鼠脊髓中Wnt11阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示,Wnt11标记的阳性细胞与GFAP和β-tubulinⅢ共表达,ALS转基因鼠Wnt11/GFAP双阳性细胞增多。与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Wnt11 mRNA水平在95 d、108 d和122 d均升高。Wnt11受体Fzd5表达情况与Wnt11一致。结论 Wnt11和Fzd5在ALS转基因鼠脊髓中表达增多,表明Wnt11及其受体Fzd5表达升高与肌萎缩脊髓侧索硬化症密切相关。

以执业医师资格考试为导向的人体解剖学教学改革研究

执业医师资格考试既是学生的行业准入考试,也是检验医学院办学水平的标准。针对执业医师资格分阶段考试对医学教育提出的新挑战,实现执业医师资格考试和人体解剖学的有效衔接十分有必要。由于人体解剖学教学具有严肃性、严谨性,教学内容枯燥繁杂,导致学生学习积极性不高,专业技能有待提升。对此,在执业医师资格考试导向下,文章结合人体解剖学理论、实践教学,改革教学大纲,推行联合集体备课制,改进教学方式,优化考核方式,进而有效提升学生的综合素质。

姜黄素对高胆固醇血症模型大鼠脑微循环障碍的改善作用及其机制

目的:探讨姜黄素对高胆固醇饮食致高胆固醇血症模型大鼠脑微循环氧化应激和炎症状态的影响,阐明其作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和姜黄素组,每组10只。对照组大鼠每日给予普通饲料,其余2组大鼠每日给予高胆固醇饲料,连续喂饲28 d。造模同时灌胃给药,姜黄素组大鼠给予姜黄素200 mg·kg^-1·d^-1,对照组和模型组大鼠给予等量1%羧甲基纤维素钠溶液,每日1次。连续给药28 d后,取大鼠血清,采用酶法检测各项血脂水平。提取大鼠脑微血管,采用黄嘌呤氧化酶法检测大鼠脑微血管组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)水平,Western blotting法检测大鼠脑微血管内皮细胞中细胞间黏附因子1(ICAM-1)、血管间黏附因子1(VCAM-1)和E-选择素(E-selectin)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显降低(P<0.01),大鼠脑微血管组织中SOD活性明显降低(P<0.01)、MDA水平明显升高(P<0.05),大鼠脑微血管内皮细胞中ICAM-1、VCAM-1和E-selectin蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,姜黄素组大鼠血清中TC、TG和LDL-C水平明显降低(P<0.05),HDL-C水平明显升高(P<0.05),大鼠脑微血管组织中SOD活性明显升高(P<0.05)、MDA水平明显降低(P<0.05),大鼠脑微血管内皮细胞中ICAM-1、VCAM-1和E-selectin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:姜黄素可以通过改善高胆固醇血症模型大鼠的血脂状况,增加脑微血管抗氧化酶能力,减低氧化应激损伤,减少脑微循环内皮细胞中黏附因子表达,进而改善脑微循环障碍。

芒果苷对小鼠肝缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨芒果苷对小鼠肝缺血-再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法成年昆明小鼠24只,体重18~20g,随机分成缺血-再灌注损伤组(I/R组)、芒果苷组和假手术组(sham组)。I/R组采用夹闭肝蒂30min、再灌注6h制作肝缺血-再灌注损伤模型。芒果苷组于缺血前30min时腹腔注射芒果苷20mg/kg;sham组和I/R组腹腔注射等容量生理盐水。再灌注6h时,取材,HE染色,光学显微镜下观察肝细胞形态学变化;比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的水平及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;Western blot检测肝组织Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果经芒果苷处理后,芒果苷组与I/R组相比肝细胞形态学异常明显减轻;血清ALT(133.73±11.53)含量和肝组织MDA(7.59±0.97)含量较I/R组明显降低,差异有统计学意义(t=-7.22,P<0.05;t=-3.07,P<0.05);肝组织SOD(119.40±13.95)和GSH-Px(97.59±14.07)含量较I/R组升高,差异有统计学意义(t=3.34,P<0.05;t=3.32,P<0.05)。经芒果苷处理后,芒果苷组与I/R组相比肝组织Caspase-3及Bax蛋白表达降低,差异有统计学意义(t=-3.18,P<0.05;t=-8.86,P<0.05);Bcl-2蛋白表达升高,差异有统计学意义(t=4.47,P<0.05)。结论芒果苷对小鼠肝缺血-再灌注损伤具有保护作用,其保护机制可能与其抗氧化作用和抑制细胞凋亡有关。

NeuroD1在ALS转基因鼠脊髓的表达

目的研究b HLH信号通路中激活型转录因子NeuroD1在肌萎缩脊髓侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)转基因模型鼠脊髓中的表达变化,进一步探讨b HLH信号通路在ALS转基因鼠发病中的作用机制,为临床治疗提供理论依据。方法选取ALS转基因鼠和同窝出生的野生型鼠各18只,分别于95d、108d和122d取材,应用免疫荧光染色观测鼠脊髓中NeuroD1阳性细胞数,RT-PCR和Western blot分别检测鼠脊髓NeuroD1 mRNA及蛋白水平。结果免疫荧光实验结果显示,NeuroD1阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠NeuroD1阳性细胞明显减少(t=6.82,P<0.05;t=17.22,P<0.05;t=5.86,P<0.05)。与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠NeuroD1 mRNA(t=3.82,P<0.05;t=5.85,P<0.05;t=4.96,P<0.05)和蛋白表达在95d、108d和122d均降低(t=8.49,P<0.05;t=8.74,P<0.05;t=5.94,P<0.05)。结论在ALS转基因鼠发病脊髓中NeuroD1阳性细胞明显减少,NeuroD1 mRNA和蛋白表达降低,表明NeuroD1与ALS的发生密切相关。

间充质干细胞治疗多发性硬化的研究进展

多发性硬化(MS)是由自身免疫介导的中枢神经系统白质脱髓鞘性疾病,其发病机制仍未被阐明,临床表现复杂,传统治疗手段尚属姑息性。间充质干细胞具有自我更新和多向分化的特点,其易于分离、扩增迅速,具有免疫调节和神经修复功能,在治疗MS中具有巨大潜力和应用价值。本文通过对近年来文献研究与分析,就间充质干细胞(MSCs)治疗多发性硬化的基础研究及临床应用进行了较全面的综述,为本领域研究提供有价值的参考。

星形胶质细胞与运动神经元的相关关系

星形胶质细胞作为中枢神经系统中最丰富的神经胶质细胞,是中枢神经系统最主要的支持细胞,为神经元提供营养支持和保护作用。在肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)发病过程中,退行性病变的神经元以及过度激活的胶质细胞将导致神经元所处微环境恶化,使神经元的损伤进行性加重。因此,研究星形胶质细胞与运动神经元的关系对探讨ALS的发病机制及其干预治疗具有非常重要的意义。

经典Wnt信号通路与神经退行性疾病关系的研究进展

Wnt信号通路调节多种基因的转录,参与调控生物体的生长、发育以及细胞的增殖、分化和凋亡等重要的生理病理过程。在神经退行性疾病中,经典Wnt信号通路发生改变影响神经元的增殖、分化或对神经元产生毒性作用,导致神经元功能损伤。因此,研究经典Wnt信号通路与神经退行性疾病的发病机制及其治疗的关系有重要意义。