日本血吸虫(中国大陆株)若干酶类基因的发现

目的 运用表达序列标签 (EST)技术 ,从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)cDNA文库中分离、鉴定出有潜在应用价值的血吸虫基因序列。方法 应用EST方法 ,从日本血吸虫cDNA文库中随机挑选出单个重组克隆 ,PCR扩增出插入片段 ,并进行PCR产物直接测序 ;将获得的序列资料与EBI和GenBank进行BLASTn和BLASTx同源性检索 ,对可能的酶类基因序列进行分析。结论 采用EST策略 ,可获得日本血吸虫 (中国大陆株 )若干酶类基因序列EST ,为进一步的cDNA全长扩增和克隆奠定基础。

迷你临床演练评量在检验实习教学中的应用

1995年由美国内科医学会开发的迷你临床演练评量（mini-CEX，mini-Clinical Evaluation Exercises），目前已成为国外医学院临床实践考核的常用考核工具[1]。具体操作方法是：在例行的临床工作中中,由考官直接观察考生对病人进行的医疗行为,并于结束观察后询问考生有关病人的诊疗计划,通过结构式表格项目进行评分,并及时给予反馈。

404例血培养阳性报警时间分析

目的：分析不同细菌在全自动血培养仪（BacT／Alert3D）中的血培养阳性报警时间（TTP，timeto—positivityofbloodculture）及其意义。方法：回顾性分析微生物实验室在2010年1月至2012年12月期间接收的7688瓶血培养标本，对404例阳性结果的阳性报警时间进行统计分析。结果：404例阳性分离株中，肠杆菌科细菌、肠球菌、非发酵菌、链球菌、葡萄球菌、假丝酵母菌和厌氧菌阳性报警时间中位数依次是：11．7h、13．3h、15．2h、16．8h、23．5h、29．6h和48h。90．6％的标本在48小时内即出现阳性报警。结论：大部分阳性分离茵可在全自动血培养仪（BacT／Alert3D）48小时内检出，阳性报警的快慢因菌种不同而存在差异。

血吸虫基因组计划的现状及发展方向

血吸虫基因组计划是当今寄生虫学研究的热点领域之一。本文就血吸虫基因组的现状及发展方向作了综述,主要包括cDNA文库、表达序列标签(EST)序列分析、基因组文库和图谱、数据库建设及功能分析等方面。

211例泌尿生殖道分泌物支原体培养与药敏实验结果分析

支原体可导致多种泌尿生殖系统炎症,与不孕、不育症也密切相关。因此,支原体检测也具有较大的临床意义。随着广谱抗菌药物的广泛使用,支原体耐药株日益增多,给临床治疗带来很大的困难。

Mini-CEX在检验科教学工作中的应用

临床教学是医学教育的重要组成部分,对于如何培养具有扎实理论基础,兼有出色临床操作技能的医学生,是临床教学值得探讨的问题。目前的临床技能考核方法较固定,考核频次较少,未能真实反映实习生的工作能力。近年来,国内临床教学医院陆续引进国外医学院校常用的演练评估工具miniCEX,用于评估临床实习医生、住院医生以及进修生的学习结果。

行政干预对医院病原菌分布及耐药率的影响

目的通过行政干预减少头孢三代抗菌药物的使用,观察能否减少病原菌的耐药率。方法采用回顾性调查的方法,对3年内分离的病原菌进行统计分析。结果共分离到6591株病原菌,排在前5位的是大肠埃希菌(24.7%)、肺炎克雷伯菌(20.8%)、铜绿假单胞菌(12.0%)、金黄色葡萄球菌(11.4%)、表皮葡萄球菌(6.8%);2006年经行政干预后,革兰阴性杆菌减少,病原菌的耐药率有所下降。结论行政干预控制头孢三代抗菌药物的使用,可减少革兰阴性杆菌耐药的发生。

4541份血培养标本检出病原菌分布及耐药性分析

目的分析该院2013-2014年血培养分离菌的分布特点及耐药情况。方法用BacT/Alert 120全自动血培养仪对4 541份血液标本进行检测,对其鉴定及药敏结果进行回顾分析。结果 4 541份血培养共检出病原菌317株,阳性率为7.0%,革兰阴性杆菌179株,占检出病原菌总数56.5%;革兰阳性菌127株,占检出病原菌总数40.1%;真菌11株,占检出病原菌总数3.4%。其中肠杆菌136株占42.9%,肠杆菌以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌居多,分别占19.0%、14.0%,非发酵菌29株占9.1%,以鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌为主,分别占5.0%、4.0%,革兰阳性菌以葡萄球菌为主,前4位分别为金黄色葡萄球菌10.0%、表皮葡萄球菌8.0%、溶血葡萄球菌8.0%及人葡萄球菌5.0%。肠杆菌对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、美罗培南较敏感,鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌对环丙沙星、左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦较敏感,葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁、替考拉宁敏感。结论菌血症、败血症和真菌血症临床病死率较高,临床医师应加强血液感染患者血液中病原菌的检测,提高治愈率。

Mini-CEX在医学检验专业实践教学中的应用

迷你临床演练评估(mini-clinical evaluation exercise,mini-CEX)作为一种迷你型多次重点式评估,将理论联系实际,使参与双方的信息及时得到反馈,可培养学生批判性思维和创新性思维。在医学检验专业实践教学中应用mini-CEX,从不同侧面弥补了传统理论考核和操作考核的不足,提升了学生沟通能力和教师的带教水平,促进了教学相长。

日本血吸虫卵黄铁蛋白基因免疫在不同处理小鼠诱导免疫应答的观察

【目的】研究日本血吸虫卵黄铁蛋白DNA免疫在两种处理小鼠诱导的免疫应答及其保护作用。【方法】免疫小鼠分两大组进行 :实验Ⅰ组小鼠有预感染 ,实验Ⅱ组小鼠没有预感染。将构建的携带日本血吸虫卵黄铁蛋白基因的重组质粒pLXSN Fer1经左后腿肌肉注射BALB/c小鼠 ,共免疫 2次 ,间隔 2周。末次免疫后 5周以血吸虫尾蚴攻击感染 ,6周后剖杀小鼠 ,计数成虫负荷及肝组织虫卵数。设空载质粒免疫组为对照组。【结果】免疫小鼠后在实验Ⅰ组主要诱生IgG1和IgG3,在实验Ⅱ组主要诱生IgG2a和IgG2b ;实验组产生较高水平的IgA和IFN γ应答。pLXSN Fer1免疫小鼠获得一定程度的减虫率 (2 6 47% ,34 0 8% )和减卵率 (4 0 0 2 % ,36 83% )。【结论】日本血吸虫卵黄铁蛋白在两种不同处理小鼠均能产生一定程度的保护作用 ,有可能成为有价值的疫苗候选分子 。

序列标签法寻找日本血吸虫新基因

目的 寻找日本血吸虫新的疫苗候选分子 ,通过构建基因的反义核酸表达载体进行基因性质功能研究。 方法 运用表达序列标签法寻找并获得日本血吸虫新基因 ,对未知基因进行功能分析 ,并构建反义真核表达载体。 结果 获得表达序列标签 JAYL0 2 30的全长 c DNA序列 ,其推导氨基酸序列与人类和猪等生物的抗凋亡因子 1具有同源性 ,将之反向克隆入真核表达载体 p EGFP- N3中。 结论 表达序列标签法与生物信息技术结合有利于寻找新基因 。

日本血吸虫Dad1 cDNA和DNA序列的比较分析

目的 对日本血吸虫新基因Dad1进行深入分析。方法 抽提日本血吸虫成虫DNA做模板 ,根据SJDad1的开放读框序列设计一对引物进行扩增 ,将扩增产物克隆测序 ,应用BLAST2软件进行SJDad1的cDNA和DNA序列比较。结果 SJDad1的cDNA和DNA序列有一个碱基的差异 :距起始密码子ATG 339位cDNA该处是A ,而在DNA序列该处是G。结论 日本血吸虫Dad1不含内含子 ,cDNA和DNA序列的单碱基差异可能与RNA编辑有关。

日本血吸虫基因表达序列标签的获得和分析

为寻找日本血吸虫新基因并进行血吸虫基因功能研究 ,随机挑选日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫 c DNA文库克隆 ,培养后提取噬菌体 DNA作模板 ,进行 PCR反应扩增 ,将扩增产物部分测序产生表达序列标签 (EST) ,并将 EST输入Gen Bank和 EMBL,运用分子生物学软件比较其同源性 ,推导其蛋白序列并进行分析 ,结果得到 75个未曾登录的新基因 ,并对其中一些基因进行功能推测研究 ,认为表达序列标签是快速有效寻找基因的方法 。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染病人的护理管理

[目的]避免在护理耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染病人时发生院内交叉感染。[方法]加强护理人员的职业防护、陪护与探病者的管理;合理安排各项治疗、护理;加强对免疫力低下病人的保护;加强科与科之间的沟通等。[结果]各项管理措施能责任落实到人,确保措施落实到位且有记录,无因护理不当造成的院内交叉感染发生。[结论]加强对MRSA感染病人各个关键环节的护理管理可避免院内交叉感染的发生。

日本血吸虫表达基因EST测定及同源性分析

【目的】建立日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)表达基因的大规模随机测序体系。【方法】从SjcDNA文库中随机挑选出单个重组克隆 ,扩增出cDNA插入片段 ,采用PCR直接序列测定方法对插入片段 5′端进行部分序列测定。通过互联网将获得的表达序列标签 (expressedsequencetags ,EST)送入WHO血吸虫基因库进行同源性检索。【结果】完成了 16 0个Sj表达基因EST序列测定 ,获得了 12 6个可用于分析的EST ,并在GenBank登录。 10个为Sj已知编码基因 ,其中 3个为Sj抗原基因全长cDNA。【结论】建立了Sj表达基因EST测序及同源分析体系 ,为进一步开展Sj表达基因的研究奠定了基础。

日本血吸虫(大陆株)成虫基因表达谱的研究

报告作者 1998年至 2 0 0 0年有关日本血吸虫 (大陆株 )成虫基因表达谱研究的结果 ,主要包括 :已测定 5 5 1条EST ,其中 5 19条EST已送入国际基因数据库 (GenBank/dbEST) ,并获得了GenBank的登录号。经同源整合后 ,5 19条EST序列归类为 388个基因序列 ,其中 ,2 4条 (6 19%)为日本血吸虫已知基因序列 ;18条 (4 6 4 %)EST与曼氏血吸虫已知基因序列同源 ,90条 (2 3 19%)EST与其它生物的已知基因序列同源 ,同源基因包括精氨酸酶、酰胺酸酶、微纤维蛋白、肌动蛋白、细胞色素C氧化酶、二硫异构酶、加长因子、热激蛋白 70、Y盒结合蛋白和抗凋亡因子等。其余的 2 5 6条 (6 5 98%)EST在Gen Bank中未发现有已知基因的同源序列。将非日本血吸虫同源序列EST或未检索到同源序列的EST初步定义为日本血吸虫亲基因 /未知基因序列EST ,共 36 4条。已克隆日本血吸虫精氨酸酶基因、Y 盒结合蛋白基因和抗凋亡 1因子 3个新基因的全长cDNA ,其GenBank的登录号分别为AF4 0 2 6 15、AF36 7371和AF33376 5。本研究结果丰富了血吸虫基因组数据 ,并为进一步筛选日本血吸虫疫苗候选基因或药物靶位提供了科学依据。

403例尿培养分离病原菌的耐药性监测

目的监测并分析2007-2011年尿分离菌菌种分布及耐药性,为临床治疗尿路感染提供流行病学依据。方法回顾性分析医院2007-2011年尿标本分离菌的菌种分布和药敏率,采用WalkAway系统进行细菌鉴定及药敏试验,酵母菌鉴定采用API系统。结果共分离出403株病原菌,前5位病原菌依次为大肠埃希菌130株占32.3%、肺炎克雷伯菌28株占6.9%、粪肠球菌27株占6.7%、铜绿假单胞菌24株占6.0%、屎肠球菌21株占5.2%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率分别为62.3%和53.6%;粪肠球菌对氨苄西林和呋喃妥因耐药率分别为7.7%和11.1%;未发现万古霉素和利奈唑胺的耐药株。结论大肠埃希菌为泌尿系感染的主要病原菌;酶抑制剂复合制剂可作为大肠埃希菌感染的经验用药;氨苄西林和呋喃妥因可用于粪肠球菌尿路感染经验治疗。

日本血吸虫（中国大陆株）表达基因的EST序列测定及同源性分析

目的 运用表达序剜标签技术(EST方法)，从Sj cDNA文库中分离、鉴定和鉴定血吸虫表达基因序列。方法 应用EST方法，从Sj cDNA文库中随机挑选出单个重组克隆进行PCR直接序列分析，通过互联网将获得的EST序列送入NCBl GenBank进行同源性检索，并对检索结果进行分析。结果 分离了46个Sj cDNA克隆，并对18个克隆cDNA插入片段的PCR进行直接序列分析，获得了16个EST序列。其中13个EST序列为GenBank中已知的血吸虫基因序列．3个未发现明显同源(score<200)基因序列。结论 采用EST-PCR直接序列分析方法可大量获得血吸虫表达基因EST序列，为进一步开展日本血吸虫（中国大陆株）表达基因的研究奠定了基础。

中段尿分离病原菌的分布与耐药分析

目的探讨广州黄埔区三家医院尿培养分离菌的分布特点及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法收集2013年1月-2016年6月广州黄埔区三家综合性三甲医院的中段尿标本分离菌2 978株,采用全自动微生物鉴定/药敏测试系统对分离菌株进行细菌鉴定及药敏试验,观察分析病原菌分布特点及耐药性情况。结果 2 978株病原菌中革兰阳性菌546株占18.33%、革兰阴性菌2 432株占81.67%;居前四位的病原菌分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌,分别占46.68%、12.29%、9.64%、6.01%;粪肠球菌对呋喃妥因、利奈唑胺、万古霉素及替加环素耐药率较低,均<10%,屎肠球菌对氨苄西林、高浓度庆大霉素、高浓度链霉素、利福平、环丙沙星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率较高,均>60%;产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为61.01%(848/1390)和53.01%(194/366);肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物较敏感。结论尿培养分离病原菌以革兰阴性菌为主,耐药菌株分离率高,定期监测和分析尿培养分离病原菌的分布特点及耐药性变化,对指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。