痤疮丙酸杆菌对动物的免疫调节作用及应用

痤疮丙酸杆菌(PA)是人类皮肤和自然环境中的常见微生物,具有非特异性免疫增强作用,可激活多种免疫相关细胞,具有诱生干扰素、提高体液免疫水平、上调细胞TLR-2和TLR-4的表达等多种生物学活性。PA具有显著的活化抗原递呈细胞的作用,常被用于动物的非特异性免疫刺激剂,PA制剂可提高外周血单核细胞中IFN-γ和自然杀伤细胞裂解酶水平及上调抗菌肽的表达,提高动物对病原细菌的抵抗力,胸膜肺炎放线杆菌与PA具有交叉免疫保护反应,在开发相关疫苗过程中具有潜在作用。

痤疮丙酸杆菌对小鼠抗胸膜肺炎放线杆菌血清7型9型的免疫保护

为明确痤疮丙酸杆菌(PA)对具有抗胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型和血清9型的异源免疫保护作用,对小鼠免疫PA分离株S14后,分别用APP血清7型(CCVC-265)和血清9型(CCVC-267)攻毒。结果表明,免疫保护率达60%和70%;而用猪抗PA血清免疫小鼠后以APP血清7型和血清9型攻毒,免疫保护率达100%。血清特异性抗体效价检测显示,PA免疫小鼠后,可诱导小鼠产生特异性的抗APP血清7型和9型的抗体,ELISA方法检测特异性抗体平均效价为1 800和2 800。PA对APP血清7型和9型的感染具有良好的保护作用。

奶牛乳房炎疫苗防治的研究进展

奶牛乳房炎是奶牛场的常发病和难以防治的疾病,危害奶牛业的发展,是造成奶牛业经济损失的主要因素。现就奶牛乳房炎的疫苗防治等进行综述,为奶牛乳房炎的防治提供一定的参考依据。

毕赤酵母工程菌株表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白发酵条件的优化

能分泌表达重组人溶菌酶-鲎素融合蛋白的巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(X33/pPICZαA-human lysozyme-TachyplesinⅠ构建的)。除了基因本身内在特性外,表达条件对外源基因的表达量也有着极显著的影响。本文在摇瓶水平上通过发酵液起始pH、甲醇诱导浓度、诱导时间这3个因素进行表达条件优化。通过生长曲线,Bradford检测以及平板扩散试验分析,获得摇瓶发酵表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白的最佳条件为发酵液初始pH 5.0,甲醇诱导浓度为2.0%,诱导时间为72 h;Bradford检测法分析显示表达量最高,平板扩散试验显示融合蛋白对金黄色葡萄球菌(ATCC25923)抑菌能力最明显,为进一步大规模发酵表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白奠定了基础。

猪胸膜放线杆菌中黏附素的研究进展

胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)是引起猪传染性胸膜肺炎疾病的病原菌,APP引起猪致病的毒力因子有多种,其中黏附素作为细菌粘附宿主的第一步中的关键作用被广泛关注。黏附是APP感染宿主的第一步,分泌到革兰氏阴性菌表面的自转运黏附素调节着细菌对宿主细胞的黏附,是重要的毒力因子。本研究综述了自转运黏附素的结构和功能特征,初步探讨其对于疫苗应用的潜力。

免疫激活:关于toll样受体与nod样受体的探索

toll样受体和nod受体在天然免疫应答中是重要的家族。激发配体促进受体相互作用的精确检测从而导致多重信号的形成和多级信号转导的触发。这个过程能导致促炎因子的上调、细胞凋亡和调控其他免疫防御。最近,在这些受体家族中识别激活配体和配体的分子基础的检测上有重大进展。理解这些过程,对于新的疫苗佐剂的开发、感染性疾病的治疗、炎症反应和潜在的疾病甚至癌症,都提供了必要的信息。

胸膜肺炎放线杆菌血清8型自转运黏附素基因克隆测序及功能区对比

为研究胸膜肺炎放线杆菌(APP)三聚体自转运黏附素(TAAs)的功能,通过PCR的方法首次获得APP血清8型的基因序列并提交GenBank(bankit1392817 HQ399552),运用生物信息学的方法对APP血清8型基因序列进行分析,并与GenBank公布的已知血清型的基因序列进行比对。结果表明:与血清7型同源性达到93%;与血清3,5b型同源性均达到92%。对APP血清8型序列软件预测分析发现,含有大量的Ylhead和Hep_Hag基序,所得序列是三聚体自转运黏附素N段序列,具有良好的抗原性。

反转录病毒介导的稳定表达HIV-1 Gag蛋白和增强型绿色荧光蛋白细胞系的建立

本研究旨在建立中国流行株人免疫缺陷病毒(HIV-1)衣壳蛋白(Gag)哺乳动物稳定表达细胞系。将HIV-1核心蛋白基因gag和增强型绿色荧光蛋白基因EGFP依次串联插入反转录病毒载体pFB-neo,构建重组反转录病毒载体pFB-gag-EGFP,并与含有辅助病毒gag-pol和env基因的质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK293T细胞,包装出的反转录病毒感染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白EGFP表达,验证HIV-1核心蛋白Gag表达,G418抗性筛选阳性细胞。结果表明,HIV-1核心蛋白Gag和增强型绿色荧光蛋白可在SP2/0细胞中稳定表达,HIV-1核心蛋白gag基因稳定表达细胞系成功建立,为抗AIDS治疗用基因工程制剂及靶向药物的活性检测提供了理想方法。

反转录病毒载体介导的EGFP基因在SP2/0小鼠骨髓瘤细胞中的表达

为了构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的反转录病毒载体,并观察EGFP基因在SP2/0小鼠骨髓瘤细胞中的表达情况。试验将增强型绿色免疫荧光基因片段定向插入反转录病毒载体pFB-neo,获得重组反转录病毒质粒pFB-NE,利用三质粒共转染系统,将含有目的基因的重组反转录病毒质粒pFB-NE以及含有辅助病毒gag-pol和env基因的质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK-293细胞,用产生的重组反转录病毒感染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,并在荧光显微镜下观察EGFP基因的表达。结果表明:重组反转录病毒载体pFB-NE构建正确,重组病毒包装成功,EGFP基因在细胞中能够稳定表达。

Th17细胞调节宿主免疫应答功能研究进展

T细胞诱导的特异性免疫应答是机体血液淋巴细胞特异性免疫应答的重要组成部分,Th17细胞作为第3类因子可区分于体液中其他辅助T细胞。基于此,论述了Th17细胞系在对抗胞外寄生和胞内寄生细菌以及真菌感染中的作用。一系列研究表明,Th17细胞系能够紧密联系固有免疫和特异性免疫,使机体产生强烈的感染炎症反应。Th17细胞系既能参与宿主免疫,又能导致病理性炎症反应,具有双重的作用。

新时代政务新媒体网络影响力提升策略研究

政务新媒体在引导网络舆论格局、加强公众互动和开展政务服务方面发挥着重要的作用.本文在界定政务新媒体概念的基础上,总结我国政务新媒体建设相关的政策演进历程和现状,分析存在的问题,提出从加强顶层设计、统筹发展规划,推进资源整合、强化互联互通,优化内容建设、丰富表现形式,落实制度保障、促进专业发展4个方面提升政务新媒体网络影响力的策略.

甲基强的松龙治疗急性期多发性硬化症的应用效果及神经功能评分影响观察

目的:探讨甲基强的松龙治疗急性期多发性硬化症的应用效果及神经功能评分影响.方法:纳入我院84例2017年1月13日-2018年6月12日急性期多发性硬化症患者.随机数字表分组,地塞米松组采取常规药物治疗,甲基强的松龙组则采取甲基强的松龙治疗.比较地塞米松组、甲基强的松龙组疗效;住院的时长以及费用;治疗前后患者EDSS神经功能评分;不良反应.结果:甲基强的松龙组疗效、住院的时长以及费用、EDSS神经功能评分相比较地塞米松组更好,P<0.05.甲基强的松龙组不良反应和地塞米松组无明显差异,P>0.05.结论:甲基强的松龙治疗急性期多发性硬化症的效果理想.

考虑氢能交通运输时空特性的电-氢综合能源系统协同优化方法

电-氢综合能源系统(EH-IES)在新时代背景下有巨大潜力,受限于现有输氢管道长度,EHIES可视为由多个氢能子系统(HES)和电力网络耦合而成。若要充分利用EH-IES运行灵活性,可在考虑EH-IES协同优化的同时,利用氢储能的可移动性实现氢能在多个HES之间的最优调度。为此,提出了一种“就地制氢-交互运氢”的运行模式。以EH-IES为研究对象、总运行成本最小为目标函数,考虑氢气长管拖车(HT)运输所需时间与HES交互运行,建立了包含可再生能源、电制氢储氢站(PHSS)、HT、电氢负荷的综合能源系统联合优化模型。通过9辆HT、3座PHSS接入IEEE 30节点系统的算例对比分析了各HES交互对系统优化的影响,结果表明:所建立的优化模型能够减少总运行成本,提升风电消纳水平,提高电力系统运行灵活性,验证了所提模式的有效性与可行性。

峨眉天罡指穴法部分小导引手法源流探析

峨眉天罡指穴法(以下简称指穴法)是峨眉养生学派的一种推拿按摩方法。近年来对其研究极少,学界对其源流也有质疑。文章参考中医文献学研究方法,对指穴法创立的关键人物白云禅师进行了初步的考证。同时从推拿手法这一推拿学的核心内容出发,通过对金钩劲、捧沙劲和离经劲等具体手法的动作分析,结合史料对指穴法的演变和流传过程进行了初步探索,以期为进一步的研究继承工作提供基础。

健脾补肾方预防股骨头坏死塌陷的临床观察

为观察健脾补肾方预防痰瘀阻络型股骨头坏死塌陷的临床疗效,由中国中医科学院广安门医院骨科门诊收集50例(73髋)塌陷前股骨头坏死病例(ARCOⅠ,Ⅱ,Ⅲa),对符合纳入标准的病例予健脾补肾方口服,并对其进行随访,以ARCO标准作为影像学分级标准,Harris评分评价髋关节的功能。经过平均4.2年(3～5.4年)的随访,73髋中塌陷12髋、未塌陷61髋(未塌陷率83.56%),ARCOⅠ期7髋均未发生塌陷(未塌陷率100%),ARCOⅡ期49髋塌陷9髋、未塌陷40髋(未塌陷率81.63%),ARCOⅢa期17髋塌陷3髋、未塌陷14髋(未塌陷率82.35%)。Kaplan-Meier生存分析显示平均股骨头未塌陷生存时间为5年(4.8～5.2年),随访时间为3年时股骨头未塌陷率为92.5%,4年股骨头未塌陷率为74%,且趋于稳定趋势。Harris评分治疗前为71.93±11.25,治疗后为81.63±12.16,配对t检验示差异有统计学意义。结果提示健脾补肾方能延迟或预防痰瘀阻络型股骨头坏死的塌陷,显著改善髋关节功能,为股骨头坏死治疗的有效方法。

猪胸膜肺炎放线杆菌菌影的制备与免疫试验

通过鲎素抗菌肽和超高静水压联合作用,制备出一种胸膜肺炎放线杆菌菌影。利用胸膜肺炎放线杆菌血清5型(CVCC263)制备菌影并检测其灭活率。CVCC263菌影疫苗接种免疫仔猪,二免14d后攻毒,每天测量体温,并观察精神状态,呼吸,食欲等。攻毒第8天对存活猪进行剖杀,测量肺部病变面积,进行病理检测。结果显示,免疫组抗体效价及血清中的IgG、IgM、IgA、IL-2、IL-4含量均较对照组显著增加。免疫组临床症状和肺部病变面积均小于对照组。CVCC263菌影疫苗免疫仔猪抗APP感染的保护效果是明显的,并且APP5型的菌影疫苗可对APP7型感染有交叉保护。

奶牛乳腺上皮细胞的克隆与特性分析

用组织块接种法分离培养奶牛乳腺上皮细胞,进行形态学观察、生长曲线的绘制和核型分析等生物学性状的检测,并进行酪蛋白基因的RT-PCR鉴定。结果显示,体外培养的奶牛乳腺上皮细胞生长旺盛,具有典型的上皮细胞形态特征;染色体数目为60;能够正常表达奶牛乳腺上皮细胞的2种特异性酪蛋白基因,即as1-酪蛋白基因和β-酪蛋白基因。表明成功获得了奶牛乳腺上皮细胞克隆。

胸膜肺炎放线杆菌三聚体自转运黏附素功能区的表达及黏附活性

试验对三聚体自转运黏附素(TAAs)的重要功能区第1 703～2 018氨基酸残基区域进行原核表达,并利用激光共聚焦显微镜观察重组蛋白在猪肺上皮细胞的结合部位,通过黏附抑制试验研究该蛋白的生物活性。结果显示,扩增的adh4基因片段与GenBank中相应的基因序列的同源性达100%,表达得到相对分子质量约为31 000的Adh4蛋白,该蛋白能够黏附在猪肺上皮细胞膜表面。猪肺上皮细胞经Adh4蛋白处理后,降低了APP对它的黏附能力,同时Adh4抗体可以抑制该菌对细胞的黏附,黏附菌数与其稀释度呈负相关。结果表明,Adh4蛋白可以介导APP对猪肺上皮细胞的黏附作用,进一步证明了位于N端1703～2018氨基酸残基区域是三聚体自转运黏附素蛋白的功能区,为研究胸膜肺炎放线杆菌的黏附机制奠定了基础。

边疆民族地区统筹推进大中小学思政课一体化建设研究述评

边疆民族地区的大中小学思政课建设对铸牢中华民族共同体意识、应对复杂多变的社会环境、促进教育公平、传承民族文化、服务国家发展战略具有重要意义。全面推动边疆民族地区大中小学思政课的一体化建设,充分体现了对党的二十大精神以及习近平总书记关于思政课“八个相统一”建设原则的全面深化与践行。边疆民族地区统筹推进各级学校思想政治教育一体化建设研究涵盖内涵解读、价值探究、现状解析以及对策研究四个维度,展示了从具体细节到宏观视角,从个案分析到整体趋势的研究范式。通过对当前研究主题、发展趋势的探讨及文献计量分析,结果发现:该领域在研究内容拓展、一体化建设机制等方面仍有局限。面对当前的挑战,未来研究应着重将理论知识与实践深度融合,不断拓展研究的深度和广度,同时在方法论上寻求创新,以推动边疆民族地区统筹推进大中小学思政课一体化建设研究迈向新高度。

Dvl3-DEP肽段对rpS6诱导的大鼠睾丸生精上皮损伤的修复作用

为了确定Dvl3-DEP肽段对rpS6诱导的大鼠睾丸生精上皮损伤的修复作用及其潜在机制,该文采用大鼠睾丸内rpS6四重磷酸化突变体表达模型诱导了生精上皮损伤,并进一步在睾丸内过表达DEP肽段以修复rpS6诱导的损伤,进而分析DEP肽段对睾丸生精上皮功能的调控作用。该文还对血睾屏障通透性、睾丸生精上皮损伤、细胞骨架蛋白结构及其聚合能力、细胞骨架结构调控蛋白的表达等进行了检测。结果显示,DEP可有效修复rpS6诱导的血睾屏障损伤,同时显著降低睾丸生精小管损伤比例。对睾丸组织切片中的肌动蛋白和微管蛋白的鬼笔毒素染色和免疫荧光染色结果显示,DEP肽段的过表达有效维持了细胞骨架蛋白的功能性结构。进而,DEP肽段可维持组织中肌动蛋白和微管蛋白的聚合水平。肌动蛋白调控蛋白Eps8的上调表达和微管蛋白调控蛋白MARK4的下调表达提示,DEP对rpS6诱导的细胞骨架结构损伤的修复作用是通过以上两种调控蛋白的表达差异来实现的。研究证实了DEP肽段对睾丸生精上皮功能的保护作用,并创新性地采用了rpS6四重磷酸化突变体作为诱导睾丸损伤的模型,为动物睾丸损伤的疗法研究及药物开发提供了参考依据。