基于单细胞质谱流式技术分析膀胱肿瘤微环境中免疫细胞的组成

目的探讨单细胞质谱流式技术(single-cell mass cytometry,CyTOF)分析膀胱癌组织与癌旁组织浸润性免疫细胞亚群特征的效果,为膀胱癌异质性研究提供新的策略。方法收集4例膀胱癌患者新鲜癌组织及其癌旁组织,通过酶解法联合机械法解离制备成单细胞悬液。采用CyTOF检测肿瘤浸润性免疫细胞中26种免疫相关标志物的表达情况。结果通过细胞相似性分析,将膀胱CD45^+免疫细胞分成25个亚群(CD4^+T细胞簇7个、CD8^+T细胞簇8个、巨噬细胞簇4个、B细胞簇2个、树突状细胞簇1个和其他类型的免疫细胞簇3个)。膀胱癌组织与癌旁组织浸润性免疫细胞亚群相对含量存在差异,膀胱癌组织中T细胞相对富集,占比为76.73%;癌旁组织中B细胞和巨噬细胞相对富集,占比分别为15.20%和23.82%。膀胱癌组织中CD4^+Treg细胞的平均占比高于癌旁组织(2.20%vs 0.81%,P=0.016)。结论CyTOF可有效区分膀胱肿瘤微环境中的免疫细胞亚群,实现对肿瘤异质性的检测,可为膀胱癌的精准治疗提供依据。

基于质谱流式技术的蛋白组学在肝癌肿瘤异质性的研究

目的:利用质谱流式技术建立研究肝细胞癌(HCC)肿瘤异质性的方法。方法:收集肝癌患者样本并制备成单细胞悬液。通过质谱流式技术用15种肿瘤干细胞标志物和28种免疫细胞相关的标志物对肝癌组织及其癌旁组织进行蛋白组学检测。结果:质谱流式分析有效地分出肝癌干细胞样亚群,并将免疫细胞分为25个细胞亚群。肝癌组织与其癌旁组织在肿瘤干细胞表达及免疫微环境组成方面存在差异。结论:质谱流式技术可实现对肿瘤干细胞样细胞和免疫细胞的精细分群,是检测肿瘤异质性的有效方法。

基于质谱流式技术研究HBV和非HBV相关肝癌的免疫微环境

目的:利用单细胞质谱流式技术(CyTOF)研究HBV相关肝癌和非HBV相关肝癌的免疫微环境特征。方法:收集42例HCC患者的癌组织样本(28例HBV相关肝癌和14例非HBV相关肝癌)并制备成单细胞悬液。通过质谱流式技术用35种免疫细胞相关抗体对肝癌组织进行单细胞组学检测,并分析肿瘤浸润性免疫细胞中免疫相关标志物的表达情况。结果:CyTOF成功将HBV相关与非HBV相关肝癌的CD45+免疫细胞分成了21个细胞亚群。HBV相关肝癌组织与非HBV相关肝癌的免疫细胞组成存在明显差异,Th细胞在HBV相关HCC中占比最高,而Tc细胞在非HBV相关HCC中的占比最高。结论:成功构建HBV相关肝癌和非HBV相关肝癌的免疫微环境图谱,并揭示了HBV相关肝癌与非HBV相关肝癌的免疫微环境存在显著异质性。