毛花猕猴桃蛋白酶的提纯和性质

用硫酸铵盐析，磷酸盐除果胶和两次ＤＥＡＥ纤维素柱层析等方法，从毛花猕猴桃（ＡｃｔｉｎｉｄｉａｅｒｉａｎｔｈａＢｅｎｔｈ．）无细胞提取液中提纯蛋白酶，在聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现一条带，纯酶的活力为３２５Ｕ／ｍｇ，比活力提高８９倍，总收率约为３７％。用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量为２３ｋＤ，用等电聚焦电泳测定等电点为４８。酶的最适ｐＨ为３８，最适温度为４３℃左右。纯酶制剂对其底物牛血红蛋白的Ｋｍ值为５５６×１０－３ｍｍｏｌ。酶的紫外吸收光谱最大值为２７８ｎｍ。二巯基苏糖醇、巯基乙醇、Ｌ半胱氨酸盐酸盐等还原剂对该酶有明显的激活作用，而碘乙酸、对氯汞苯甲酸对其有抑制作用，这表明该酶属于巯基酶类。