基于数据挖掘技术总结姚新苗教授治疗膝痹病的用药规律

目的:通过数据挖掘技术总结“浙派中医”骨伤医家姚新苗教授治疗膝痹病的用药规律及思路。方法:收集整理2011年1月—2018年8月姚新苗名中医治疗膝痹病的医案,经过筛选并按照统一标准处理后,以符合纳入标准的中药处方为基础,建立数据库。运用古今医案云平台进行数据挖掘,分析医案的组方用药频次、关联分析和聚类分析。结果:共收集膝痹病患者的有效处方192则,药物193味。姚新苗治疗膝痹病善于使用经方,最常用的方剂为黄芪桂枝五物汤、桂枝芍药知母汤。频数分析得出最常使用的药物为牛膝、桂枝、土茯苓、甘草、生地黄,药性以温、寒、平为主,药味以苦、辛、甘为主,归经以归肝、脾、肾经为主。结论:姚教授治疗膝痹病注重使用经方,主张标本兼治,肝、脾、肾同调。

益骨汤对去势大鼠骨密度及经典BMP2信号通路的影响

目的观察益骨汤对去势大鼠骨组织中经典骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)2信号通路的影响,旨在探讨益骨汤防治骨质疏松症(osteoporosis,OP)的作用机制。方法将44只12周龄雌性Wistar大鼠随机分为四组,每组11只。正常组不进行任何处理,模型组、戊酸雌二醇组和益骨汤组大鼠进行去势手术以模拟骨质疏松。造模成功后,分别以10ml/kg双蒸水灌胃(正常组、模型组)、0.36mg/kg戊酸雌二醇水溶液灌胃及10ml/kg益骨汤灌胃,1次/d。12周后,双能X射线骨密度仪测定股骨骨密度(bone mineral density,BMD),实时聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测BMP2经典信号通路BMP2、Smad1、Runx2、OSX基因的表达,免疫组织化学法、Western blot法检测BMP2经典信号通路BMP2、Smad1、Runx2、OSX蛋白的表达量。结果①双能X射线骨密度仪测定股骨骨密度,结果显示,与模型组比较,益骨汤组大鼠的BMD升高(P<0.01)。②实时荧光定量PCR检测,与模型组比较,益骨汤组大鼠的BMP2、Smad1、Runx2、Noggin基因表达量升高(P<0.05)。③免疫组织化学法检测:与模型组比较,益骨汤组大鼠的BMP2、Smad1、Runx2、OSX蛋白表达量升高(P<0.05)。④Western blot法检测:与模型组比较,益骨汤组大鼠的Smad1、Runx2、OSX蛋白含量升高(P<0.05)。结论益骨汤可能通过激活BMP2经典信号通路及抑制Noggin的高表达,促进骨形成和防治骨质疏松。

姚新苗运用四辨理论治疗骨质疏松经验介绍

介绍姚新苗教授运用四辨理论治疗骨质疏松症的临床经验。姚新苗教授认为,骨质疏松症的病机为“因虚致瘀,亏瘀致痿”,以亏虚为本,虚瘀夹杂,脾虚为始,肾虚为渐。临证以辨病、辨证、辨部、辨度为要诀,即在注重辨证论治的基础上,必须兼顾骨痿之病、骨痿之位和骨痿之脏腑演变。以补肾健脾活血为治法,创益骨汤化裁施治。临证标本兼施,脾肾同治,固本以强筋骨,延缓骨痿进程。

短链脂肪酸调控骨代谢防治骨质疏松症研究进展

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是以绝经后女性及老年人为主要发病人群的代谢性骨病,随着我国老龄化社会进程的加快,OP发病率逐年升高^([1])。骨代谢平衡是以成骨细胞(osteoblast,OB)为主导的骨形成与以破骨细胞(osteoclast,OC)为主导的骨破坏相互作用的过程,当骨代谢平衡被打破就会导致骨质疏松^([2])。研究^([3-4])表明,短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)参与骨代谢疾病的发生发展并具有重要的调节作用。近年来,由于肠道微生物学及多组学的发展,SCFAs已经成为了OP防治与机制研究的一大热点,本文综述SCFAs调控骨代谢防治OP相关机制研究,报道如下。

姚新苗学术经验述要

浙江省国医名师姚新苗教授,从事中医骨伤、康复学临床和基础研究四十余载,提出了骨质疏松症“因虚致瘀,亏瘀致痿”的致病理论,并创制补肾活血方——益骨汤分级诊疗骨质疏松症,形成了益骨汤联合传统中医功法防治骨质疏松症的方案;提出“骨筋经”理论、以“针药功”三法并用分期分度诊治腰椎间盘突出症与脊柱相关疾病的新策略;强调导引练功治未病,注重“古今相融、中西交融”,倡导骨筋经动态平衡观,形成“以筋为主”“荣经为先”的学术思想;践行“针药功结合”的中医综合治疗技术,形成“理筋为先,针药并重,结合正骨调曲,练功贯彻始终”的治疗主干线。文章就其学术思想和治疗经验作了介绍,并附相关医案。

从“骨肉不相亲”理论探讨益骨汤治疗骨质疏松症

[目的]探讨益骨汤治疗骨质疏松症与“骨肉不相亲”理论之间的关系。[方法]通过临床跟师、临证记录及参阅文献,对“骨肉不相亲”相关理论进行归纳总结,并结合益骨汤防治骨质疏松症的基础与临床研究,探讨益骨汤与“骨肉不相亲”理论之间的联系。[结果]姚新苗教授认为,骨质疏松症的发病机制为“亏瘀致痿”,据此提出“补肾活血法”,并创制“益骨汤”治疗骨质疏松症。“骨肉不相亲”理论则揭示“骨痿”的发病机制为“土胜水”,由此进一步提出“骨痿者生于大热”,并据此提出“治痿独取阳明”治疗痿证。“亏瘀致痿”理论是“骨肉不相亲”理论的继承创新,“补肾活血法”是“治痿独取阳明”理论的传承发展。在该指导思想下创制的骨质疏松症经验方益骨汤,经过基础和临床研究证实,能够补肾壮骨、健脾活血,从多方面改善骨质疏松症。[结论]益骨汤从“骨肉不相亲”理论治疗骨质疏松症,理论可行,证据充实,为该病的预防和治疗提供了一定的思路。

姚新苗从肝肾论治痛风病经验

姚新苗认为痛风的病因为肝肾受损、筋脉不利。病机为肝肾精血亏虚,筋脉失于濡养,不荣则痛。病位在半表半里之间,病性为本虚标实。在具体的临证过程中,姚师首辨虚实缓急,次辨寒热表里,根据患者所苦,对症用药,重视肝肾同治,同时也注重全身调护,防止正虚邪恋,病情反复,迁延难愈。

基于数据挖掘分析姚新苗治疗痹证用药规律

目的:探讨姚新苗治疗痹证的用药规律。方法:对2020年1月—2021年9月就诊于浙江中医药大学附属第三医院姚新苗专家门诊的505例痹证患者进行临床资料采集,并使用Excel 2013建立病例资料信息库,基于古今医案云平台工具(V2.3.5),对数据进行规范化处理及用药频数、属性、聚类等数据分析。结果:505例患者共涉及中药255种,从用药频数看,姚新苗治疗痹证多选用甘草、生姜、桂枝、白芍、牛膝、大枣、柴胡、黄芩、茯苓、白术、姜半夏、当归等中药,其功效主要为调和营卫、温通经脉、缓急止痛等。从药性频数和归经频数看,药性以温、平为主;药味以甘、辛、苦为主;归经以脾、肝、肾、胃经为主。结论:姚新苗治疗痹证以调和营卫为治法,并根据辨证分清本虚标实,邪有异同,选方用药,逐层深入治疗痹证,做到祛邪不伤正。

益骨汤对骨质疏松大鼠骨组织蛋白表达的影响

目的益骨汤是临床上用于治疗骨质疏松症的中药复方。然而,其治疗绝经后骨质疏松症的作用机制尚不清楚,需要进一步深入研究。方法使用TMT定量蛋白质组学对从模型组和益骨汤组大鼠骨组织中提取的蛋白质进行蛋白质组学分析,确定益骨汤干预后的差异表达蛋白以鉴定感兴趣的生物学相关蛋白,同时进行功能注释相关分析以探究其生物学功能及作用机制。结果GO功能富集分析得到GO条目156个,主要包括骨骼肌功能、酶活性和横纹肌作用;KEGG富集显示,矿物质吸收通路被显著富集。PPI蛋白质互作关系表明,相关蛋白可能是通过影响骨骼肌从而影响了骨质疏松的发生。结论益骨汤对绝经后骨质疏松治疗有效果。其中,益骨汤的作用机制可能是通过肠道影响矿物质吸收从而影响了相关蛋白的表达,进而调控绝经后骨质疏松的发生和发展。

益骨汤联合经皮穴位电刺激(TEAS)治疗老年性骨质疏松症疼痛临床研究

目的观察益骨汤联合经皮穴位电刺激(TEAS)治疗老年性骨质疏松症疼痛的临床效果。方法将60例患者随机分为实验组和对照组,实验组采用益骨汤联合鲑鱼降钙素(密盖息)和TEAS法进行治疗,对照组采用单纯密盖息进行治疗。于治疗前、治疗后、治疗后3个月分别采集病史,并进行视觉模拟评分法(VAS)疼痛评分、骨密度评定。结果治疗后及治疗后3个月实验组与对照组相比,骨密度明显升高(P<0.05)。治疗后及治疗后3个月实验组与对照组相比,VAS疼痛评分明显下降(P<0.05)。结论益骨汤联合TEAS法缓解老年性骨质疏松症引起的疼痛明显优于单纯密盖息治疗。

益骨口服液对去势大鼠骨质疏松症痛阈及骨密度的影响

[目的]观察益骨口服液对去势大鼠骨质疏松症痛阈及骨密度的影响。[方法]将84只SD大鼠随机分益骨口服液组、密盖息组、益骨口服液及密盖息联合组、生理盐水对照组,每组各21只;造模成功后,分别予益骨口服液、密盖息、益骨口服液及密盖息、生理盐水等不同药物灌胃,于治疗后第10d、第30d、第60d、第90d四个时点分别测量各组大鼠痛阈、股骨骨密度。[结果]治疗第10d、30d、60d、90d益骨口服液组、密盖息组、益骨口服液及密盖息联合组与对照组相比,去势大鼠痛阈明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗第10d、30d,益骨口服液组、密盖息组、益骨口服液及密盖息联合组股骨骨密度与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),在治疗第60d、90d时,骨密度明显提高差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]益骨口服液能提高去势大鼠痛阈、骨密度,从而减轻骨质疏松大鼠疼痛。

益骨汤对骨质疏松大鼠成骨细胞相关基因表达的实验研究

目的:观察益骨汤对骨质疏松大鼠成骨细胞中WNT10b、β-catenin、BMP-2、BMP-4、DKK1相关基因的表达水平的影响,探讨DKK1在骨质疏松大鼠中发生的作用及益骨汤促成骨细胞增殖的可能机制。方法:将100只大鼠随机分为A组(假手术组)、B组(益骨汤治疗组)、C组(倍美力阳性对照组)、D组(正常对照组)、E组(DKK-1反义寡核苷酸对照组)5组,每组各20只;造模成功后,分别予蒸馏水、益骨汤、倍美力、蒸馏水及DKK1反义寡核苷酸进行干预。培养3个月后,用双能X线骨密度仪进行骨密度测定;提取另一侧股骨总RNA,行RT-PCR检测WNT10b、β-catenin、BMP-2、BMP-4、DKK1 mRNA水平;提取总蛋白,利用Western Blot检测WNT10b、β-catenin、BMP-2、BMP-4、DKK1的蛋白含量。结果:益骨汤治疗组、DKK-1反义寡核苷酸组对WNT10b、β-catenin、BMP-2、BMP-4表达比正常对照组明显上调,差异有统计学意义(P<0.05),且益骨汤治疗组5种基因的表达明显高于其他组;而益骨汤治疗组DKK1的表达比正常对照组明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益骨汤能够促进WNT10b、β-catenin、BMP-2、BMP-4基因表达上调,可以抑制DKK1在成骨细胞增殖中的过度表达。

姚新苗运用“治未病”思想防治膝痹经验

姚新苗是浙江省名中医，第五批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师。长期从事骨伤临床、教学、科研工作，在骨伤科疾病的诊治方面积累了丰富的临床经验，其对膝痹病的论治则更有其独到的见解，尤其是强调“治未病”思想在早期膝骨性关节炎的干预，笔者有幸随姚师临证，受益颇多，现将有关经验介绍如下。

骨质疏松药物靶向治疗的研究进展

[目的]综述近10年来骨质疏松药物靶向治疗的研究进展。[方法]通过检索国内外对成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路认识及研究的文献,对骨质疏松药物靶向治疗不同作用机制进行总结。[结果]DKK1、GSK-3β、骨硬化蛋白的过度表达会抑制成骨细胞的活性及功能,而通过药物抑制通路中因子的表达对骨质疏松的治疗具有积极的意义。[结论]骨质疏松药物靶向治疗具有良好的前景。

医用臭氧对兔膝骨关节炎炎性因子水平的影响

目的观察医用臭氧在兔膝骨关节炎中的应用及对关节滑液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)水平的影响。方法取新西兰大白兔60只,采用改良Hulth法建立兔膝骨关节炎模型。根据处理方法不同分为空白对照组(n=20)、对照组(n=20)及观察组(n=20)。空白对照组不采取任何方法处理,对照组灌服生理盐水治疗,观察组采用医用臭氧治疗。采用酶联免疫吸附试验测定三组治疗前后TNF-α、IL-1β、MMP-1水平,比较三组治疗效果。结果观察组大白兔采用医用臭氧进行6周处理后关节软骨光泽明亮,光滑无裂纹,滑膜为白色、光泽、光滑,滑液量相对较少,无色;对照组新西兰大白兔局部软化,部分大白兔出血溃疡,滑膜充血、水肿,并且滑液量相对较多。三组处理前TNF-α、IL-1β、MMP-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组处理后TNF-α、IL-1β、MMP-1水平低于对照组和空白对照组(P<0.05),对照组处理后TNF-α、IL-1β、MMP-1水平低于空白对照组(P<0.05)。结论采用医用臭氧治疗兔膝骨关节炎效果理想,能降低关节滑液中TNF-α、IL-1β、MMP-1水平。

益骨汤含药血清通过经典Wnt信号通路促进成骨细胞增殖分化的研究

目的:在经典wnt信号通路抑制剂大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)的干预下,观察益骨汤含药血清对成骨细胞的经典Wnt信号通路的影响,探究益骨汤治疗骨质疏松的作用机制,为临床使用补肾活血中药防治骨质疏松症提供实验依据。方法:将40只雌性SD大鼠随机分成2组,益骨汤水提液组和空白对照组,连续灌胃10天,获取含药血清。从乳鼠颅盖骨中分离培养成骨细胞,实验分为4组,即A组(益骨汤含药血清组)、B组(DKK1组)、C组(DKK1+益骨汤含药血清组)、D组(空白血清对照组)。进行细胞增殖MTT检测、碱性磷酸酶活性检测,RT-PCR检测经典Wnt/β-catenin通路中β-链蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)、DKK1基因的表达情况。结果:根据MTT法动态观察各组成骨细胞增殖,发现成骨细胞增殖呈规律性:48 h至72 h成骨细胞呈对数增长期,96 h后细胞增殖逐渐受到抑制。同一时间点与B组比较,A、C、D各组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一时间点与D组比较,A组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,A、C、D组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与D组比较,A组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益骨汤含药血清可能是通过抑制DKK1的高表达,从而上调经典Wnt/β-catenin信号中β-catenin、LRP-5、TCF基因的表达,达到促进成骨细胞增殖,起到抗骨质疏松作用。

腰部核心肌群锻炼对腰椎间盘突出症患者腰背伸肌群的生物力学影响

目的:探讨腰部核心肌群锻炼对腰椎间盘突出症患者腰背伸肌群的生物力学影响。方法:2015年6月至2017年6月,在牵引、卧硬板床等一般治疗的基础上,采用包括仰卧抬腿、单桥运动、双桥运动、膝手平衡、俯卧撑等锻炼项目在内的腰部核心肌群锻炼治疗腰椎间盘突出症患者60例。男38例,女22例;年龄32~73岁,中位数50岁。病变节段,L1~212例、L2~323例、L3~418例、L4~57例。病程8年6个月至14年7个月,中位数11年5个月。每日每项10次,依次进行,连续锻炼4周。分别于治疗前和治疗结束后,采用疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)及简明健康状况调查表评价患者腰部疼痛情况及生存质量,采用腰椎功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)和日本矫形外科协会(Japanese orthopaedic association,JOA)腰痛评分系统评价患者腰椎功能,对患者腰背伸肌群积分肌电、平均功率频率及腰背伸状态下峰力矩、平均功率、腰背屈伸比等表面肌电和力学评价指标进行测定。结果:60例患者均顺利完成治疗。与治疗前相比,治疗结束后患者腰部疼痛VAS评分、ODI降低,生存质量评分、JOA评分增高[(4.33±1.67)分,(3.12±2.13)分,t=3.463,P=0.001;(28.82±7.46)%,(12.85±3.62)%,t=14.919,P=0.000;(69.48±7.91)分,(73.13±7.97)分,t=2.518,P=0.013;(16.52±4.17)分,(22.62±3.08)分,t=9.114,P=0.000];腰背伸肌群积分肌电、平均功率频率增加,腰背伸状态下峰力矩、平均功率增加,腰背屈伸比降低[(102.68±23.71)μV,(124.92±29.38)μV,t=4.563,P=0.000;(38.62±8.72)Hz,(47.17±9.43)Hz,t=5.156,P=0.000;(70.14±14.24)Nm,(86.53±15.32)Nm,t=6.070,P=0.000;(29.41±9.38)W,(42.97±10.18)W,t=7.588,P=0.000;(83.97±12.51)%,(72.48±9.02)%,t=5.771,P=0.000]。结论:对于腰椎间盘突出症患者,腰部核心肌群锻炼能增强腰背伸肌群收缩力和肌肉的协调平衡能力,可有效缓解腰部疼痛、提高生存质量、改善腰椎功能。

大鼠脂肪干细胞的分离培养鉴定及多向诱导分化研究

目的:通过体外分离培养脂肪干细胞,并进行传代、表型鉴定及多向诱导分化,进一步了解其生物学特性,为临床运用奠定实验基础。方法:取SD大鼠附睾近心端,肾周及腹股沟韧带皮下脂肪组织,采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法,对脂肪干细胞进行分离、体外培养及扩增、表型鉴定及成骨成脂诱导分化,在倒置显微镜下观察原代及传代细胞形态变化,并采用MTT法检测第3、5、7、9代细胞增殖能力,用流式细胞仪检测细胞表面抗原标记,取第3代细胞进行成骨成脂诱导分化,并采用茜素红染色、油红O染色方法进行鉴定。结果:采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法得到的脂肪干细胞,其细胞形态较为均一,基本呈长梭形,旋涡状生长,并形成集落样生长。MTT法检测第3、5、7、9代ADSCs呈典型的"S"形增殖曲线,符合干细胞的特性,脂肪干细胞表型鉴定结果显示CD29阳性高表达,CD34阴性表达,CD45低表达,CD105弱阳性表达,脂肪干细胞能向成骨细胞及脂肪细胞分化。结论:脂肪干细胞取材较方便,含量丰富、并能够在体外分离培养,其稳定表达特异性的表面抗原,并且经过相应诱导培养后可向成骨及成脂多向分化,可作为优良的骨组织工程的种子细胞来源。

骨科大手术围手术期血浆D-二聚体和纤维蛋白原动态监测及临床意义

深静脉血栓形成（deep vein thrombosis,DVT）是骨科大手术以及骨科创伤患者的常见并发症,DVT可以导致血栓后综合征（post-thrombotic syndrome,PTS）和肺动脉栓塞（pulmonary embolism,PE）,甚者可导致患者死亡。国内的一项多中心研究结果[1]显示,关节置换后DVT的发生率在未预防组为31%、预防组为12%,经过血栓预防治疗后,术后出现症状性静脉血栓DVT的概率为1%~10%。静脉造影是临床诊断DVT的金标准,但因其有创性且有一定的设备技术要求,所以使用并不广泛。纤维蛋白原（fibrinogen,

运用数据挖掘技术分析姚新苗治疗骨质疏松症辨证用药规律

目的:基于数据挖掘技术分析姚新苗治疗骨质疏松症的辨证用药规律。方法:收集2010年1月—2016年8月期间姚新苗治疗骨质疏松症的病例处方,用SPSS17.0、SPSSClementine11.1软件进行数据分析,主要包括频数分析和关联规则分析。结果:姚新苗治疗骨质疏松症,最常见的证型为肾虚血瘀型、肝肾阴虚型、脾肾阳虚型。关联规则挖掘出证型与药物之间的强关联规则13条,频数分析得出最常使用的药物为盐补骨脂、骨碎补、枳壳、丹参、山药。结论:姚新苗治疗骨质疏松症经验丰富,注重补肾及活血。