内镜下黏膜切除术治疗结直肠息肉437例分析

目的探讨经内镜下黏膜切除术(EMR)治疗结直肠息肉的临床、病理及镜下特征,评估此术式的疗效和安全性,并指导医生进行疾病的诊断及治疗。方法取该院2014年8月-2015年8月行EMR切除息肉的437例(687枚)患者的临床病理资料进行回顾性分析,按照腺瘤癌变以及高危性腺瘤-低危性腺瘤-非腺瘤性息肉分组法,以年龄、性别、临床表现以及息肉内镜、病理特征等指标为变量进行统计分析,观察EMR治疗息肉的临床效果,评估其安全性。结果息肉内镜下检出率为48.28%,进行EMR治疗的息肉占全部息肉的34.90%,其中高危腺瘤占17.08%,从非腺瘤性息肉到高危性腺瘤,随着癌变可能性的增加,息肉发生部位从近端结肠向远端结肠转移,其形态更容易表现为有蒂息肉,且黏膜分叶和黏膜改变发生率逐渐增加。大肠息肉癌变与息肉有蒂、分布在远端结肠、直径大于1.0 cm、腺瘤含绒毛样成分、息肉黏膜分叶、充血、粗糙和糜烂有关。EMR治疗息肉,一次性切除率为99.70%,并发症发生率为1.14%。结论高危性腺瘤和癌变腺瘤在结直肠分布及内镜下表现中存在一定的特征,该院针对大小为0.5~3.0 cm的息肉,采用EMR联合钛夹治疗息肉的临床效果显著,并发症少,可有效阻断腺瘤-大肠散发性癌这一演化进程,是防治结直肠癌的有效手段。

SRPX2通过巨噬细胞促进人脐静脉内皮细胞血管生成能力的作用

目的:探究含sushi重复蛋白X连锁2蛋白(sushi repeat-containing protein X-linked 2,SRPX2)是否可通过巨噬细胞对血管生成产生影响及其可能的机制。方法:用shRNA-SRPX2及shRNA空载体转染HCT116细胞,并收集以上两种细胞和空白HCT116的细胞培养基作条件培养基,用3种条件培养基作用于人源单核细胞(THP-1)诱导的巨噬细胞,而后巨噬细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养,并以Transwell迁移实验检测HUVEC迁移能力,以Matrigel基质胶管腔形成实验检测管腔形成能力。用Western blot检测巨噬细胞中局部黏着斑激酶(FAK)的表达水平。结果:在Transwell迁移实验中,HCT116敲降SRPX2基因的条件培养基与巨噬细胞作用,并与HUVEC共培养后,HUVEC迁移细胞数明显减少(P <0. 01)。而在Matrigel管腔形成实验中,HCT116敲降组形成的管腔的交叉点数、成网数、节点数也有所减少(P <0. 05)。FAK蛋白检测发现,SRPX2重组蛋白作用后的巨噬细胞总FAK表达量和FAK蛋白磷酸化水平有所增高。结论:SRPX2可能通过FAK相关通路影响巨噬细胞,进而间接影响血管内皮细胞的血管生成能力。

NLE1在结肠癌中的表达及其对HT29细胞增殖凋亡的影响

目的验证Notchless同源物1(Notchless homolog 1,NLE1)在结肠腺瘤及腺癌组织中的表达水平,评价其可能作用及机制。方法通过免疫组化及实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法评价NLE1在结肠正常黏膜、腺瘤组织及腺癌组织中的表达水平。通过慢病毒转染,评价NLE1沉默对HT29细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。结果免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色显示,NLE1在结肠正常黏膜、腺瘤及腺癌组织中的高表达率分别为14.3%(15/105),44.0%(11/25)及68.6%(72/105),在腺癌中明显高于腺瘤(P<0.05),在腺瘤中明显高于正常黏膜(P<0.001)。实时荧光定量PCR显示,结肠正常黏膜、腺瘤及腺癌组织三组的NLE1 mRNA表达分别为1.38±0.82,5.04±2.09,7.57±1.25。腺癌组织中NLE1表达水平明显高于腺瘤(P<0.05),腺瘤组织中明显高于正常黏膜(P<0.01)。NLE1沉默显著抑制HT29细胞增殖(P<0.05)及克隆形成能力(P<0.05),促进其凋亡(P<0.05),并可促进Bax及Fas的表达。结论结肠腺癌中高表达的NLE1可能通过影响肿瘤细胞增殖凋亡从而发挥促进肿瘤发生的作用。

CASC19通过维持巨噬细胞M1型极化状态保持对结直肠癌的抑制作用

目的探讨长链非编码RNA癌症易感基因19(the cancer susceptibility 19,CASC19)在维持巨噬细胞M1型极化状态中的作用及其对结直肠癌细胞生长的影响。方法诱导单核细胞型淋巴瘤细胞Thp1分化为未极化的M0巨噬细胞,进一步诱导M0极化为经典活化的M1巨噬细胞和替代性活化的M2巨噬细胞;采用RT-qPCR检测M1和M2相关分子标记和CASC19的表达,明确巨噬细胞分化状态及CASC19转染效率;使用敲降CASC19的M1型巨噬细胞上清(M1 SI-CM组)及其阴性对照上清(M1 NC-CM组)刺激结直肠癌细胞SW480,采用活细胞实时动态成像、MTS法检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞迁移能力。结果RT-qPCR检测结果显示,巨噬细胞诱导极化成功,且CASC19在M1型巨噬细胞中的表达水平高于M0型和M2型(P<0.05);与M1 NC-CM组处理相比,CASC19敲降的M1 SI-CM处理组对结直肠癌细胞SW480增殖和迁移能力的抑制作用更弱(P<0.001);敲降M1型巨噬细胞中的CASC19后M1分子标记CD40、IL-1β的表达均降低,而M2分子标记CD206、IL-10、CD163的表达水平升高(P<0.05)。结论敲降CASC19能减弱M1型巨噬细胞抑制结直肠癌细胞增殖、迁移功能,可能是通过解除CASC19对巨噬细胞M1极化状态的维持作用实现。

重组硫酸软骨素蛋白SRPX2减轻小鼠葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎的作用

目的评价sushi重复蛋白X连锁2蛋白(SRPX2)在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠中的作用及其可能机制。方法 DSS+SRPX2组,DSS组小鼠各5只,自第1天起给予5%DSS溶液自由饮用,分别给予SRPX2重组蛋白及0.9%氯化钠溶液腹腔注射5 d,至第6天处死小鼠。另设正常对照组(不予处理)。记录各组小鼠疾病活动度(DAI)评分、结肠组织学评分;检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性;分离固有层单个核细胞(LPMC),酶联免疫吸附实验法检测LPMC中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)的表达;比色法试剂盒检测N6-腺苷酸甲基化(m~6A)修饰的RNA的水平。结果 DSS组小鼠第5天的DAI评分较正常对照组明显升高(P <0.01),DSS+SRPX2组DAI评分较DSS组均明显降低(P <0.05)。处死小鼠后,DSS组小鼠结肠组织学评分及MPO活性较正常对照组均明显升高(P <0.05),DSS+SRPX2组小鼠结肠的组织学评分及MPO活性均较DSS组明显降低(P <0.05)。DSS组小鼠LPMC中TNF-α、NF-κB水平较正常对照组均明显升高(P <0.05),DSS+SRPX2组小鼠LPMC中TNF-α、NF-κB水平均较DSS组明显降低(P <0.05)。DSS组小鼠LPMC中m~6A修饰的RNA的比例较正常对照组明显升高(P <0.05),而DSS+SRPX2组小鼠LPMC中m~6A修饰的RNA的比例较DSS组明显降低(P <0.05)。结论 SRPX2重组蛋白具有减轻DSS诱导的小鼠实验性结肠炎的作用,其作用可能与改变结肠组织LPMC中m~6A甲基化RNA的水平有关。

SRPX2经uPAR调控人单核细胞系THP-1来源巨噬细胞迁移及M2极化

目的评价SRPX2蛋白对人单核细胞系THP-1来源巨噬细胞迁移及极化功能的影响。方法经佛波酯(PMA)诱导人单核细胞系THP-1为巨噬细胞后,将SRPX2重组蛋白作用于巨噬细胞,Transwell法检测细胞迁移,免疫荧光法检测SRPX2与uPAR的定位,Western blot检测相应信号通路蛋白的表达。再用IFN-γ及LPS诱导巨噬细胞的M1极化,SRPX2重组蛋白作用后,反转录PCR检测M1/M2标志物表达。结果SRPX2明显促进人单核细胞系THP-1来源巨噬细胞的迁移(P<0.01),加入uPAR中和抗体后,明显抑制迁移(P<0.01)。在诱导M1极化的巨噬细胞中,经SRPX2重组蛋白作用后,M1标志物CD40和IL-6明显下降,而M2标志物CD206和IL-6明显上升(P<0.01)。SRPX2与uPAR及CD11b的表达存在共定位。SRPX2重组蛋白作用后巨噬细胞FAK及Akt磷酸化水平增高。结论SRPX2可能通过uPAR/CD11b/FAK/Akt通路促进人单核细胞THP-1来源巨噬细胞的迁移与M2极化。

三甲公立医院青年人才科研业绩影响因素及培养策略探析

目的通过开展医院青年人才科研工作相关调查,了解影响其科研业绩的影响因素,并分析不同人员特征在科研工作主客观影响因素的差异,从而提出有针对性的培养策略。方法对医院45岁以下963位青年科研人员(医生、医技和科研系列)进行自编式问卷调查与科研业绩评定,重点分析人口学特征及科研动机、自我效能、团队支持和外部环境4个主客观因素对科研业绩的影响因素。结果单因素分析结果显示:学位、年龄、出国时间、行政职务、研究生导师、职称系列、职称等级和科室类别,对科研业绩的影响有统计学意义(P<0.05)。多元线性回归显示,研究生导师类别、学位、职称等级、科室类别、自我效能、出国时间及职称系列等影响程度依次递减。结论根据调查结果,重点将影响科研业绩的预测因素作为科研工作提升和人才培养的抓手,提出优化人才选拔机制、开展精准施策和科学考核评估的人才培养体系思路。