枸杞实时荧光定量RT-qPCR内参基因筛选与验证

以9种不同基因型枸杞的不同组织(茎、叶、花、果)和不同发育期(FS_(1)~FS_(5))的果实为试材,选取Act-1/Act-3、Ef1a、Gapdh、H3b、Acx4、Pp2a、Rh37、Samc、Tub为候选内参基因,利用实时荧光定量技术(RT-qPCR)检测了9个候选基因在不同基因型枸杞的不同组织和不同发育阶段果实中的表达水平。并采用geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta Ct、RefFinder分析方法,评估候选内参基因的表达稳定性,并选择Beat基因验证内参基因。结果表明,Ef1a为不同基因型枸杞的不同组织和5个发育时期果实中表达较稳定的内参基因,Gapdh为表达最不稳定的内参基因;在宁夏枸杞中表达最稳定的内参基因为Rh37,其次为Ef1a。进一步采用Beat基因对不同基因型枸杞的不同组织(茎、叶、花、果)和5个发育时期果实中的表达模式进行验证,表明Ef1a、Act-1基因可作为枸杞稳定的内参基因。

霉菌毒素在发酵全混合日粮中的动态变化研究

试验为研究发酵全混合日粮霉变过程中霉菌毒素的变化规律,采取人工辅助的方法促使饲料霉变,测定其中玉米赤霉烯酮(ZEN)、T-2毒素(T-2)、黄曲霉毒素(AFT)、呕吐毒素(DON)和伏马菌素(FB)含量,分析5种毒素之间的互作效应。结果显示,ZEN、T-2、AFT、DON和FB之间的关系以负相关为主;FB_(1)与T-2之间具有相互促进繁殖的作用;FB_(1)与AFB_(1)、DON与AFB_(1)之间具有相互抑制繁殖的作用。研究表明,试验结果有助于有效预防和清除饲料中的霉菌毒素,为维护动物健康、提高经济效益提供技术参考。

柠条全日混发酵饲料不同配比对颗粒饲料成型品质的影响研究

【目的】为研究柠条全日混发酵饲料不同配比对颗粒饲料成型品质的影响。【方法】试验设计不同精饲料与粗饲料(柠条发酵饲料)比例及不同水分含量处理,按照颗粒饲料生产工艺流程生产颗粒饲料,比较不同水平下精粗料占比对颗粒饲料感官性状、含粉率、粉化率、硬度、容重、密度、长度和直径等物理指标和营养成分的影响。【结果】结果表明:当柠条全日混发酵饲料粗料占20%、精料占80%,且混合料含水量为21.1%时,颗粒饲料感官性状要优于其他比例颗粒饲料;且不同处理颗粒饲料的粉化率、含粉率随着饲料含水量的增加而减小,硬度则逐渐升高,容重显著降低,颗粒的长度随之先降低后升高;添加发酵饲料的粗蛋白含量均较未添加的高,EE、CF、NDF、ADF、ADL含量及能量均较未添加发酵饲料的低。【结论】颗粒饲料营养成分提高,利于家畜消化吸收,颗粒饲料品质上升。

枸杞果实发育阶段类胡萝卜素的变化

以3种果实颜色不同品种宁杞1号、宁夏黄果和黑果枸杞为试验材料,采用高效液相色谱法测定枸杞果实类胡萝卜素的总含量,并对枸杞果实发育阶段的类胡萝卜素进行定性定量分析。结果表明:果实成熟时,‘宁杞1号’、‘宁夏黄果’、‘黑果枸杞’果实颜色存在明显差异,分别呈现红色、黄色和黑色。‘宁杞1号’和‘宁夏黄果’果实类胡萝卜素总量随着果实颜色加深逐渐增加,而‘黑果枸杞’则逐渐减低。枸杞果实5个发育阶段均含有类胡萝卜素5个主要成分,即新黄质、叶黄素、玉米黄素、β-胡萝卜素和β-隐黄质,其中‘宁杞1号’和‘宁夏黄果’以玉米黄素所占比例最大,而‘黑果枸杞’以新黄质所占比例最大。‘宁杞1号’和‘宁夏黄果’果实中玉米黄素、β-隐黄质和β-胡萝卜素随着果实发育逐渐增加,‘黑果枸杞’果实中新黄质随着果实发育逐渐增加。

枸杞己糖激酶基因LbHXK的克隆及表达分析

该研究以宁夏枸杞‘宁杞1号’果实为材料,利用RT-PCR技术,分离出枸杞己糖激酶基因LbHXK的全长序列(1494bp),该基因包含完整开放阅读框ORF,编码498个氨基酸,蛋白质分子量为53.88kD,理论等电点5.96;LbHXK基因编码的蛋白具有己糖激酶家族显著的特征,包含一个己糖激酶小亚基(Gly91~Val228)和一个大亚基结构(Asn229~Asp476),该蛋白三级结构为V型,并且存在一个葡萄糖结合结构域;LbHXK与茄科烟草的同源性最高为93.36%。实时荧光定量分析发现,LbHXK基因在不同组织均有表达,叶中最高,茎中次之,根中最低,且组织间差异不显著;随着果实发育LbHXK基因表达量呈先升后降的变化趋势,并在色变期(开花后约22d)达到最高,随后到果实成熟期降至最低,且果实发育前中期显著高于后期。该研究结果为进一步探讨枸杞LbHXK基因的功能奠定了基础。

干旱胁迫及复水对宁夏枸杞幼苗生长和叶绿素含量的影响

本研究以"宁杞1号"为试材,通过盆栽控水法,设定正常灌水(CK)、轻度干旱(LD)、中度干早(MD)和重度干旱(SD)4个处理,分别于干旱处理后15 d(胁迫初期)、30 d(胁迫中期)和60 d(胁迫末期)进行复水,研究干旱胁迫及复水对枸杞幼苗生长和叶绿素含量的影响。结果显示:在胁迫初期,随着胁迫的加重,各干旱处理枸杞幼苗的株高、地径、叶绿素a含量、叶绿素b含量、叶绿素a+b含量缓慢降低,且干旱处理及复水后枸杞幼苗的5个指标均与对照无显著差异。在胁迫中期和后期,各干旱处理随着胁迫的加剧,枸杞幼苗的5个指标显著下降;其中,轻度和中度干旱处理及复水能恢复到对照水平,但是重度干旱后复水不能恢复到对照水平。初步认为,枸杞在干旱胁迫早期及时进行复水,植株能很快恢复到正常生长状态,且具有一定程度的补偿效应。该研究有助于挖掘枸杞的抗旱性,为制定枸杞节水栽培技术提供参考依据。

生长季平茬对柠条可食部分生物量及营养价值的影响

为了研究柠条生长季平茬不同月份可食部分生物量及营养价值的变化规律,针对柠条不同月份植株生物量、可食部分鲜重、不可食部分鲜重及其常规营养物质进行观测和综合分析。结果表明:3-7月可食部分和不可食部分生物量均上升,8-10月又下降。以DMI排序来看,3-6月的高于7-10月的。通过沙地、梁地可食部分柠条营养成分来看,CP、NDF动态变化趋势一致,CP含量分别为16.36%、15.37%,NDF含量分别为60.68%、60.60%。7月份以后CF、NDF、ADF、ADL含量较3-6月的含量高。柠条生长季平茬,3月萌动期、9月初霜期平茬对柠条营养物质影响较大,结合第2年返青后的生长情况,建议柠条平茬时间以5-8月最佳,以提高其品质和可食牧草产量,达到更新复壮、永续利用的目的。

灌溉方法和整枝方式对塑料大棚西红柿农艺性状的影响

灌溉方法和整枝方式对塑料大棚西红柿农艺性状的影响试验研究结果表明,不同的整枝方式和灌溉方法对秀玉西红柿植株农艺性状影响较大,采用吊蔓单干整枝植株高度明显比吊蔓换头落蔓整枝植株低,降幅约为25.3%;吊蔓换头落蔓整枝比吊蔓单干整枝结果层数多出5层,增产在13.90%-23.58%,延长上市时间26 d。滴灌比沟灌节约用水近1/2,且水分利用率在76 kg/m3以上。秀玉西红柿在吊蔓换头落蔓整枝+滴灌条件下,能明显提高植株生长势、单果重和总产量,有效节约用水。

不同肥料喷施对拱棚韭菜生长及产量的影响

以汉中雪韭为试材,进行了不同肥料喷施对拱棚韭菜生长和产量影响的研究。试验结果表明,不同肥料喷施能提高拱棚韭菜生长、产量和抗疫病能力,参试的7种喷肥中超级蔬菜、喜润、翠秀和金毛增产、增值效果最佳,可在宁夏盐池县花马镇移民区拱棚韭菜生产中大力推广。

彭阳黄土丘陵区油用紫斑牡丹不同栽培方式适应性研究

为了解甘肃油用紫斑牡丹在宁夏南部山区的适应性情况,引进甘肃兰州牡丹园的三年生油用紫斑牡丹种苗,采用5种栽培方式开展驯化栽培与适应性观测研究。结果表明:(1)5种栽培方式下油用紫斑牡丹越冬后均能正常生长,成活率在92%以上,其各项生长指标从引种后第二、三年迅速增加,均能开花结实,其中穴窝覆膜、平植覆膜、起垄覆膜栽培方式生长势较强;(2)5种栽培方式物候期较原产地提早2～6 d;(3)5种栽培方式适应性依次为穴窝覆膜>平植覆膜>起垄覆膜>露地起垄>露地平植。

枸杞果胶酯酶基因 LbPME 克隆及表达分析

以宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)'宁杞1号'果实为材料,利用RT-PCR技术,克隆出LbPME的全长序列为1152 bp,包含完整的开放阅读框(ORF),编码有384个氨基酸,蛋白质分子量为42.63 ku,理论等电点9.20;LbPME编码的蛋白包含2个可能的N-糖基化结合位点(Asn46和Asn183),4个底物结合位点(Thr166、Gln201、Arg301和Trp303)和2个酶活性位点(Asp224和Asp245)。分析发现,该蛋白由多个呈右手螺旋的β折叠肽链组成,且含有1个中空三角柱状的PME经典结构;LbPME与茄科的烟草的同源性达到90.86%。利用实时荧光定量技术,发现不同组织中LbPME均有表达,且在茎中最高而叶中最低,两者存在显著差异;随着果实的发育,LbPME表达量呈现出先升后降趋势,在青果期表达量最高,随后显著降低,在成熟期维持较低水平。本研究结果为进一步探讨枸杞LbPME的功能奠定了基础。

不同果色枸杞鲜果品质性状分析及综合评价

【目的】探讨不同果色枸杞鲜果品质性状指标间的相互关系,构建枸杞鲜果品质性状的综合评价体系,为合理评价与挖掘利用鲜食枸杞种质资源提供理论参考。【方法】以32份枸杞鲜果为材料,测定枸杞鲜果产量性状、风味性状和功能活性等24项品质指标,利用相关分析和主成分分析,筛选枸杞鲜果品质评价指标;运用层次分析确立评价指标的权重,采用数据标准化处理,建立不同果色枸杞鲜果品质综合评价体系。【结果】不同果色枸杞鲜果品质性状变异丰富,变异系数为14.3%—113.4%,其中苹果酸变异系数最大,蔗糖、黄酮次之,横径、总糖较小;通过相关分析和因子分析,从24项指标中筛选出纵径、横径、果糖、葡萄糖、草酸、酒石酸、黄酮、多糖等8项指标作为枸杞鲜果品质评价代表性指标;综合考虑8项指标对枸杞鲜果品质的影响程度,构建层次结构模型,优化出8项指标的权重系数分别为17.74%、17.74%、10.75%、10.75%、5.38%、5.38%、10.75%、21.51%;根据数据标准化处理公式,计算出供试材料的综合评价值,不同果色枸杞鲜果综合品质存在较大差异,主要表现为红色果>紫色果>黄色果>暗红色果>黑色果。【结论】不同果色枸杞鲜果品质可用果实纵径、横径、果糖、葡萄糖、草酸、酒石酸、黄酮和多糖等8项指标进行综合评价,红色鲜果综合品质表现较优,黑色鲜果综合品质表现较差。影响枸杞鲜果品质评价的关键因子依次为产量因子、功效因子和风味因子。

不同果色枸杞果实糖积累特征及其与蔗糖代谢酶活性的关系

以‘宁杞1号’(红色)、‘宁夏黄果’(黄色)和‘黑果’(黑色)3份不同果色枸杞为试材,测定枸杞果实发育过程中糖含量与蔗糖代谢酶活性的变化,并分析糖含量与蔗糖代谢酶活性的相关性,以探讨不同果色枸杞糖积累差异的生理基础,为进一步阐明枸杞品质形成及调控机理提供理论依据。结果显示:(1)气相色谱(GC)法检测结果为‘宁杞1号’果实含8种糖,‘宁夏黄果’含7种糖,‘黑果’仅检测到4种糖;且成熟期枸杞果实均以果糖、葡萄糖和蔗糖为主。(2)在枸杞果实发育过程中,各材料果实的果糖和葡萄糖含量呈现逐渐升高趋势,果实发育的后期升高幅度高于初期;而各材料蔗糖和赤藓糖含量却呈现出不同的变化趋势,不同发育时期材料间差异各异。(3)不同果色枸杞蔗糖代谢酶活性在枸杞果实发育过程中差异较大,其中酸性转化酶(AI)在果实发育的初期活性较低,材料间差别小,但在果实发育的后期活性高,材料间差异较大;从枸杞果实发育色变期到成熟期,供试材料AI和蔗糖合成酶(SS)活性高于中性转化酶(NI)和磷酸蔗糖合成酶(SPS);在整个果实发育过程中‘黑果’保持着较低果糖含量和蔗糖代谢酶活性。(4)3种果色枸杞果糖含量均与AI活性达到显著相关关系,红色与黑色枸杞己糖(果糖和葡萄糖)含量与NI达到显著相关关系。研究表明,不同果色枸杞果实中的糖种类与含量、蔗糖代谢酶活性差异较大,AI活性升高有利于枸杞果糖的积累,转化酶在枸杞果实己糖积累过程中发挥着重要的作用。

干旱胁迫对宁夏枸杞叶片蔗糖代谢及光合特性的影响

以宁夏枸杞品种‘宁杞1号’为材料,采用防雨棚内盆栽控水法研究了轻度干旱(LD)、中度干旱(MD)、重度干旱(SD)和正常灌水(CK)4种土壤水分条件下枸杞叶片糖分含量、蔗糖代谢酶活性和光合参数的响应规律,为宁夏枸杞在干旱地区高产栽培提供参考依据。结果显示:(1)干旱胁迫降低了枸杞青果期叶片蔗糖和淀粉含量,轻度干旱胁迫可提高枸杞色变期叶片果糖和蔗糖含量,而成熟期叶片淀粉含量则随着干旱加重而升高。(2)干旱胁迫降低了青果期枸杞叶片中性转化酶(NI)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)和蔗糖合成酶(SS)的活性,降低了色变期和成熟期叶片酸性转化酶(AI)和SS的活性,但提高了色变期和成熟期叶片NI的活性。(3)随着干旱胁迫的加剧,叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)呈降低趋势,瞬时水分利用率(WUE)呈现:LD>CK>SD>MD的变化趋势。研究认为,轻度干旱胁迫能促进宁夏枸杞成熟期叶片蔗糖积累和水分利用率提高,有利于更多光合同化物输送到果实中。

BGA土壤调理剂对土壤结构及养分的影响

研究BGA土壤调理剂对土壤体积质量、总孔隙度、团聚体和养分含量的影响。结果表明,施用BGA土壤调理剂能降低土壤体积质量0.7%、使土壤总孔隙度、毛管孔隙度和非毛管孔隙度增加,对增大土壤持水量和毛管持水量都具有明显效果。对7mm以下土壤团聚体的形成有促进作用,且能增强土壤团聚体在水中的稳定性。降低土壤pH,使土壤有机质、全氮、全磷、全钾、速效磷和速效钾分别增加12.0%、3.1%、5.7%、0.29%、29.2%和41.3%,增加的效果接近PF施肥的效果。

4种枸杞果实发育过程中糖积累与蔗糖代谢酶的关系

为了探讨枸杞Lycium果实糖积累差异及其品质形成的生理机制,以4种枸杞为试材,在枸杞果实发育期间,测定果实糖质量分数与蔗糖代谢酶活性变化。结果表明:宁夏枸杞Lycium barbarum果实中检测到10种糖,云南枸杞L.yunnanense和中国枸杞L.chinense果实中检测到7种糖,北方枸杞L.chinense var.potaninii果实中检测到6种糖;成熟期枸杞果实以果糖、葡萄糖和蔗糖为主。在果实发育过程中4种枸杞果糖和葡萄糖质量分数整体呈现出逐渐升高趋势,果实发育的后期升高幅度高于初期;而蔗糖质量分数呈现出2种变化趋势,不同发育时期种间有差异。4种枸杞蔗糖代谢酶活性在枸杞果实发育过程中差异较大,其中,酸性转化酶(AI)在果实发育的初期活性较低,种间差别小,但在果实发育的后期活性高,种间差别大。在整个果实发育过程中供试种蔗糖合成酶(SS)活性始终高于磷酸蔗糖合成酶(SPS);云南枸杞维持着较低果糖和葡萄糖质量分数。3种枸杞果实中果糖质量分数与AI活性显著正相关(P<0.05),转化酶在枸杞果实糖积累过程中发挥着重要作用。

留茬高度对小叶锦鸡儿光合生理和生长特征的影响

[目的]研究不同留茬高度小叶锦鸡儿生长和光合生理的变化规律,揭示不同留茬高度下小叶锦鸡儿生长和光合能力的强弱,探索其平茬时的最适留茬高度,为寻求合理抚育管理措施、指导小叶锦鸡儿生产实践提供理论依据。[方法]选择2003年人工种植小叶锦鸡儿为研究材料,设置未平茬(CK)、留茬高度5 cm(T_(1)),10 cm(T_(2)),15 cm(T_(3)),20 cm(T_(4)),25 cm(T_(5))共6个处理于2018年秋季进行平茬,分别测定次年生长季小叶锦鸡儿生长和光合生理指标。[结果]平茬能显著提高小叶锦鸡儿株高、冠幅、新稍长的增长;不同留茬高度处理净增长量均不同,留茬高度15 cm处理株高、冠幅长和宽度、新稍长净增长量值最高,分别较未平茬处理增加了203.44%,278.10%,292.59%,385.43%;留茬高度5,10和20 cm处理的净增长量次之,留茬高度25 cm的值最低,较未平茬处理分别增加了25.15%,26.38%,25.93%,88.48%;一定留茬高度平茬能显著提高小叶锦鸡儿净光合速率(P_(n))、蒸腾速率(T_(r))和水分利用效率(WUE);不同处理小叶锦鸡儿日变化均有不同程度的光合、蒸腾“午休”现象;留茬高度15 cm处理叶片P_(n),T_(r),WUE日均值均最高,分别比未平茬处理增加了2.52,0.37和1.52倍;留茬高度5,10和20 cm处理次之,留茬高度25 cm处理值最低,其P_(n)和WUE值分别比未平茬处理增加了0.45和0.32倍,而T_(r)值比未平茬处理降低了0.02倍。[结论]平茬后次年生长季内,留茬高度15 cm的平茬小叶锦鸡儿具有较强的生长补偿和光合能力,留茬5,10和20 cm植株的生长补偿和光合能力次之,留茬25 cm植株的生长补偿和光合能力最弱。

枸杞酸性转化酶基因的克隆与表达

以枸杞果实为试验材料,利用RACE技术克隆枸杞酸性转化酶基因Lb AI的全长c DNA序列,应用生物信息学软件分析Lb AI预期编码蛋白质特征;采用气相色谱法和实时荧光定量PCR技术,分析不同发育阶段枸杞果实及不同颜色成熟果实中可溶性糖含量及Lb AI在果实中的相对表达量。结果显示:Lb AI的c DNA序列全长2 252bp,开放阅读框(ORF)长1 920 bp,编码642个氨基酸,Lb AI编码的蛋白质相对分子量和等电点(p I)分别为70 600和5.9,Gen Bank登录号为KM191309。进化树分析结果显示,枸杞与马铃薯和番茄的亲缘关系最近,相似性在85%以上。随着果实生长发育,枸杞果实中果糖和葡萄糖含量不断升高,而蔗糖呈现出降低趋势;不同颜色枸杞果实中糖含量差异较大,成熟红色和黄色果实中果糖和葡萄糖含量显著高于黑色果实,但蔗糖含量在黑色果实中最高,在红色果实中最低;Lb AI相对表达与果实中葡萄糖含量变化基本一致。表明Lb AI基因在枸杞果实糖积累过程中具有重要的作用。

宁夏中部干旱带旱地玉米覆膜免耕对土壤典型理化性状影响研究

对宁夏中部干旱带旱地覆膜免耕农田土壤理化性状变化进行了研究,结果表明：覆膜免耕具有一定的增温效应,可显著增加地表0~10 cm土壤容重,覆膜免耕10~40 cm土壤容重低于播种期覆膜和露地种植,加速土壤速效P消耗,有效增加土壤有机质含量,对土壤水分具有表聚效应,使玉米各生育时期耕层土壤含水量均高于露地种植,且随覆膜免耕时间的延长,0~100 cm土壤含水量逐步增加。

甜瓜不同基因型子叶与真叶光合特性的比较

研究了属于2个变种、4个不同基因型的甜瓜幼苗期子叶与真叶的光合性能和幼苗期真叶光合作用对光照强度的响应。试验结果表明,幼苗期甜瓜子叶的光合速率明显低于真叶,不同变种间子叶及幼苗期真叶光合速率有显著差异,但变种间或基因型间真叶光合速率差异不及叶位间差异明显。苗期真叶光合作用对光照强度的响应可用二次方程描述,但不同基因型甜瓜的光补偿点、光饱和点、单叶最大光合速率和表观量子产额等均有一定差异。