树突状细胞体外高效诱导白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞生成

[目的]研究体外诱导产生的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)及其抗白血病反应。[方法]应用mGM鄄CSF及mIL鄄4细胞因子从小鼠骨髓细胞扩增出成熟树突状细胞(DC),使其负载冻融法制备的白血病细胞相关抗原(TAA),通过观察DC诱导的白血病特异性CTL的免疫表型,MTT分析其对于L7212细胞的抑制率,利用ELISA评价IL鄄2和IL鄄4水平。[结果]骨髓单个核细胞经mGM鄄CSF、mIL鄄4的联合作用7天后光镜及扫描电镜下观察到大量成熟DC生成。经负载TAA的DC活化后T细胞中CD3+、CD8+、CD25+细胞明显增多。FCM显示CD3+、CD8+、CD25+T细胞显著增多,CD8+细胞多于CD4+细胞。活化后T细胞对L7212细胞有特异性杀伤活性,在效靶比为50∶1培养72h后杀伤率达90.1%±2.7%。DC与T细胞共培养上清中IL鄄2的分泌水平为4.656±0.62pg/ml,明显高于普通T细胞培养组的1.436±0.11pg/ml(P=0.011),IL鄄4水平则无明显变化(P>0.05)。[结论]mGM鄄CSF及mIL鄄4配伍诱导生成的DCs经L7212冻融抗原负载后可在体外高效诱导白血病特异性CTL生成。

急性白血病患者血清中VEGF水平与临床关系的研究

目的:探讨急性白血病患者血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的水平与临床的关系及血管新生在急性白血病发病中的作用。方法:采用双抗体夹心ELISA方法测定急性白血病患者血清中的VEGF。结果:急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)患者血清中VEGF的水平与正常对照相比,明显增高(P=0.0003)。处于完全缓解期的ANLL患者仍有较高的VEGF分泌。急性淋巴细胞白血病(ALL)患者血清VEGF水平虽比正常对照增高,但无统计学意义(P=0.067),其分泌量与ANLL患者相比,明显减低(P=0.001)。结论:ANLL患者存在着血管新生,VEGF在其发病机制中可能起着重要的作用。

双自杀基因慢病毒转移系统的建立及其对T淋巴细胞的体外杀伤作用

目的利用分子生物学方法构建CD和TK双自杀基因慢病毒转移载体。方法将慢病毒基因转移系统中的3种成分质粒(包膜质粒、包装质粒及目的基因转移质粒)用脂质体共转染入病毒包装细胞293T,荧光显微镜下观察;透射电镜下观察病毒颗粒;大量收集病毒上清,浓缩后用之感染T淋巴细胞,荧光显微镜下观察。结果荧光显微镜观察到对照组大量绿色荧光蛋白(GFP);透射电镜证实有大量病毒颗粒存在。单独使用前体药物5-氟脲嘧啶(5-FC)和/或无环鸟苷(GCV)后,细胞的存活率与未转染T淋巴细胞比较,差异显著(P<0.01),与单独使用5-FC或GCV比较,联合使用5-FC和GCV时T细胞的存活率明显降低(P<0.01)。结论慢病毒基因转移系统可使双自杀基因发挥强大的杀伤作用,为一种有效的基因转移系统。

非清髓性异基因骨髓移植治疗白血病的动物实验研究

[目的]探讨非清髓性异基因骨髓移植及加供者淋巴细胞输注治疗小鼠白血病的疗效。[方法]荷L7212白血病的615(H鄄2K)小鼠,于接种白血病细胞后第2天接受60Co鄄γ射线全身照射(TBI8.5Gy或5Gy)分为若干组,照射当天移植供鼠BALB/C(H鄄2d)小鼠的骨髓细胞(5×106)和脾细胞(1.5×107),移植后第2天腹腔注射环磷酰胺(200mg/kg);供者淋巴细胞输注组分别于移植后第7天、14天、21天再次输注供鼠脾细胞5×106、1×107、2×107,观察受鼠的移植物植入、移植物抗宿主病(GVHD)、受鼠生存时间及移植相关并发症等。[结果]非清髓性预处理能保证移植物的稳定植入,非清髓性异基因骨髓移植组小鼠生存时间为22.3±4.8天,与非清髓空白组14.7±3.4天和传统移植组18.3±3.2天比较均有显著性差异(P<0.05),供者淋巴细胞输注(DLI)组小鼠平均生存时间明显延长,为34.3±2.5天,与非清髓移植组比较均有显著性差异(P<0.05),且无明显GVHD表现和病理学改变,移植相关并发症减少。[结论]非清髓性异基因骨髓移植能在减轻GVHD的同时保留一定的移植物抗白血病(GVL)效应,移植后行DLI可在减轻移植相关并发症的基础上进一步增强GVL效应。

山东省1970～2005年白血病死亡率及其变化趋势

目的分析山东省1970～2005年白血病的死亡率和变化趋势。方法收集1970～1974年、1985～1989年、1990～1992年和2004～2005年山东省全死因死亡回顾调查资料,计算死亡率和世界人口标化死亡率,采用Joinpoint回归模型分析变化趋势。结果 4个时期白血病死亡率分别为1.97/10万、3.63/10万、3.96/10万和4.36/10万,其中男性分别为2.20/10万、4.05/10万、4.25/10万和4.86/10万,女性分别为1.73/10万、3.19/10万、3.66/10万和3.85/10万。男女各个年龄组的白血病死亡率都呈上升趋势;其中5～岁以下有一小高峰,而60～岁开始增速增加,到80～岁达到最高峰。1970～1992年白血病死亡率上升幅度比较大,校正资料缺失年后,年均上升3.546%,有统计学差异;而1992年后上升幅度比较小,年均上升0.445%,无统计学差异。按抽样的县市分析,在工业经济发展比较快的地方白血病死亡率上升幅度大。结论在过去35年中山东白血病死亡率呈缓慢上升趋势。

骨髓增生异常综合征患者血红素加氧酶表达水平及其临床意义

目的观察初诊低危骨髓增生异常综合征(MDS)患者血红素加氧酶-1(HO-1)表达水平的变化及其基础水平与患者预后的关系,探讨HO-1在该病中可能的作用机制和临床应用前景。方法收集60例初诊低危MDS患者以及20例缺铁性贫血(IDA)患者的骨髓单个核细胞(BMMNCs),予不同浓度(0、5、10、20μM)的HO-1诱导剂Hemin体外孵育,用蛋白免疫印迹法检测HO-1蛋白表达水平和MAPK信号通路中c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化表达水平的变化,并随访分析HO-1的基础表达水平与患者无进展生存期(PFS)的关系。结果①低危MDS患者BMMNCs中HO-1蛋白基础表达水平与IDA患者比较差异无统计学意义(P>0.05);随着Hemin干预浓度的增加,HO-1蛋白表达量逐渐升高,JNK信号分子磷酸化表达水平亦逐渐升高,呈浓度依赖性(均为P<0.05);②HO-1高表达的患者PFS长于低表达患者组(中位数41.6个月vs.32.0个月,P=0.047)。COX回归分析显示HO-1表达水平是判断低危MDS患者预后的独立因素(P=0.006)。结论在低危MDS患者中,HO-1高表达者预后较好,HO-1可能通过JNK信号分子途径影响MDS的疾病过程。上调HO-1有可能成为改善疾病预后的新的治疗靶点。

达雷妥尤单抗联合方案治疗初诊多发性骨髓瘤效果观察

目的探讨达雷妥尤单抗(Dara)联合方案治疗初诊多发性骨髓瘤(NDMM)的效果及安全性。方法回顾性病例系列研究。回顾性收集山东大学齐鲁医院、烟台市毓璜顶医院、青岛医学院附属医院黄岛院区、泰安市中心医院2020年4月至2022年3月应用含Dara方案治疗的34例NDMM患者临床资料。分析患者疗效、生存及不良反应发生情况。采用Cox比例风险模型分析患者总生存(OS)及微小残留病(MRD)转阴的影响因素。结果34例NDMM患者中,男性19例,女性15例;年龄<65岁21例,≥65岁13例。中位随访时间[M(Q1,Q3)]为22个月(19个月,26个月),应用Dara周期数的中位数为7个(5个,11个),总体反应率(ORR)97.1%(33/34)。是否接受造血干细胞移植、治疗不同周期数分层患者间最佳疗效分布差异均有统计学意义(均P≤0.05),其他临床特征分层患者间差异均无统计学意义(均P>0.05)。1年无进展生存率79.4%,1年OS率94.1%。多因素Cox回归分析结果显示,含Dara方案治疗周期数是MRD转阴的独立影响因素(6个周期比2个周期,HR=0.267,95%CI:0.076~0.935,P=0.039),年龄≥65岁为OS的独立危险因素(HR=35.313,95%CI:1.709~729.669,P=0.021)。3级及以上血液学不良反应发生率为20.6%(7/34),非血液学不良反应主要为感染[44.1%(15/34)]、四肢及躯干水肿[41.2%(14/34)]。结论以Dara为基础的方案治疗NDMM的ORR较高,随着治疗周期数的增加,缓解深度加深,且不良反应较轻。

住宅无天沟有组织排水探

<正> 一、引言住宅建设屋面排水均采用天沟、水斗、雨水管等排水构件。这些排水体系增加了工程造价,约占工程总造价的4～5％,也增加了施工难度,甚至带来事故。本文介绍一种多、高层住宅有组织无天沟排水,可克服上述弊端。二、五天沟有组织排水 (一)现状分析 1.降雨情况:全国各地的降雨量,受气象条件和地区、地形的影响。

不查表计算A_S的方法

在钢筋混凝土结构计算当中,经常遇到已知弯距M,混凝土强度等级fcm,钢筋级别fy,构件载面尺寸b×h,（或先假定b、h尺寸）求所需受拉钢筋载面面积As,通常采用以下计算方法:

废水冲厕设计初探

废水冲厕设计初探李湘新“我们正在以每天１１０亿ｔ的废水污染着水源……中国的水源将在我们这一代全部被污染……中国的湖泊也将在我们这一代干涸……”［１］一个声音在疾呼。水是人类生存和社会发展不可缺少的基本物质，而淡水又是不可替代的有限的宝贵资源，它并不...

住宅内墙商品化浅探

住宅内墙是否可商品化?如何商品化?有何益处?以及其技术经济性能、社会效益如何?本文作了阐述。

混凝土的施工温度与裂缝控制

本文通过对混凝土裂缝产生原因的分析,叙述了温度应力对混凝土裂缝产生过程,提出了如何加强控制,减少混凝土因温度应力产生裂缝的措施和方案。

树突细胞应用于荷白血病小鼠免疫治疗的实验研究

目的探讨白血病抗原活化的树突细胞(DC)应用于荷白血病小鼠异基因骨髓移植 (allo-BMT)后免疫治疗的可行性及有效性。方法应用mGM-CSF及mIl-4从小鼠骨髓细胞扩增出成熟DC,使其负载经冻融法制备的L7212白血病细胞相关抗原。将进行allo-BMT后的荷白血病小鼠分 A(对照组)、B(T细胞组)、C(DC+T细胞组)三组进行免疫治疗,观察小鼠生存率、生存期、移植物抗宿主病(GVHD)发生等情况及血清细胞因子水平和脾细胞细胞毒活力变化。对各组长期生存小鼠行二次攻击,以观察其体内抗白血病免疫能力。结果小鼠骨髓单个核细胞经mGM-CSF、mIL-4联合作用7 d可生成大量成熟DC。B、C二组复发率分别为30％及0％,移植后长期生存率分别为30％及 70％,两组差异均有统计学意义(P<0．05),而GVHD发生率差异无统计学意义。两组平均生存时间分别为(32．95±13．29)d、(41．15±13．88)d,差异有统计学意义(P<0．01)。MYT法检测发现C组小鼠脾细胞对L7212细胞产生特异性杀伤作用;EIJSA法检测显示血清中Th1类因子IL-2水平为 (419．75±26．66)pg／ml,明显高于其他两组(P<0．01)。二次攻击后B、C二组生存率分别为33．3％及85．7％,差异有统计学意义(P<0．05)。结论肿瘤抗原负载的DC联合供者淋巴细胞输注是增强 allo-BMT后移植物抗白血病效应、减少白血病复发的有效手段。

白血病抗原冲击致敏的树突状细胞应用于荷白血病小鼠免疫治疗的实验研究

目的探讨白血病抗原冲击致敏的树突状细胞(DC)应用于荷白血病小鼠异基因骨髓移植(Allo-BMT)后免疫治疗的可行性及有效性,并初步探讨其免疫机制。方法常规方法制备小鼠骨髓细胞,予 mGM-CSF+mIL-4培养诱导 DC 生成,并于第3天予反复冻融法制备的冻融抗原冲击致敏,第7天获负载肿瘤抗原的成熟 DC。

L-苏糖酸亚铁治疗缺铁性贫血的多中心随机对照研究

目的了解L-苏糖酸亚铁(FL-T)治疗缺铁性贫血(IDA)的疗效及不良反应。方法采用多中心、随机、双盲、双模拟、阳性药物平行对照试验方法,140例就诊于三所医院的IDA患者,按照入选标准,以随机区组的方法随机分入实验组及对照组,分别予以FL-T胶囊4粒+模拟琥珀酸亚铁2片(A组)、琥珀酸亚铁2片+模拟FL-T胶囊4粒(B组),3次/d,口服,8周为1疗程。治疗前、第4周及结束时测定血清铁、总铁结合力、血清铁蛋白等有关铁参数;每2周随访1次,随访血常规、网织红细胞计数及药物的不良反应。结果两种药治疗8周,IDA的完全缓解率分别为89.06%和85.07%,总有效率分别为98.44%和97.01%,两组间差异无统计学意义。两组用药后Hb不断增长,以8周达到最高值(P<0.01)。两种铁剂治疗后铁参数均出现了有意义的变化(P<0.05),表现为血清铁上升,贮存铁及血清铁蛋白增加,总铁结合力下降。不良反应A组13.85%,B组14.71%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论FL-T治疗IDA起效快、疗效显著、不良反应轻微且发生率低。

鼠尾草酸逆转K562/A02细胞多药耐药的机制研究

目的 探讨鼠尾草酸（Canosic acid,CA）对人类白血病多药耐药（MDR）细胞系K562/A02细胞的逆转作用及机制.方法 MTT法测定CA作用前后K562/A02细胞对阿霉素（ADM）的敏感性.流式细胞术（FCM）和激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）测定细胞内ADM的平均荧光强度,计算细胞内ADM浓度.半定量RT-PCR检测细胞mdr1 mRNA表达水平.采用流式细胞术和Western blot 检测细胞膜P糖蛋白（P-gp）表达.结果 CA可将ADM对K562/A02细胞的IC50值由16.31μg/ml降至1.35μg/ml,逆转倍数为12.08倍.流式细胞术检测结果表明CA可将K562/A02细胞内ADM的荧光强度由17.05提高到60.53（P〈0.01）.LSCM结果显示CA可恢复ADM在K562/A02细胞的细胞核和胞质中的弥散分布,并使细胞内ADM的浓度由4.9 Oμg/ml提高至15.4μg/ml.RT-PCR结果显示K562/A02细胞mdr1 mRNA水平明显高于K562细胞,CA处理后K562/A02细胞mdr1 mRNA水平明显降低（P〈0.01）.流式细胞术检测K562/A02细胞膜上P-gp的荧光强度在经CA处理后由44.40降至22.80（P〈0.05）.Western blot结果显示CA处理后的K562/A02细胞膜上P-gp的表达明显降低.结论 在体外,CA可有效逆转人白血病细胞K562/A02的MDR,其逆转耐药的机制可能与P-gp蛋白表达下调并抑制其功能有关.

常用抗菌药物对血清半乳甘露聚糖检测结果的影响

近年来侵袭性真菌感染（invasive funsal infections，IFI）在临床上的发病率逐年增高。随着抗肿瘤治疗力度加强和器官移植的开展等，侵袭性曲霉病（invasive aspergillosis，IA）的发生率明显增高。国际上ELISA法血清半乳甘露聚糖（GM）检测诊断正日益成为IA的重要辅助诊断手段，该检测方法的假阳性问题也逐渐得到重视，在我们对IA高危患者进行血清GM抗原监测过程中也发现了数例假阳性结果，且与某些抗菌药物的使用有关。为此，特予进一步研究。

肝脾γδT细胞淋巴瘤一例并文献复习

目的 分析肝脾γδT细胞淋巴瘤（HSTCL）的病因、诊断、治疗及预后。方法 分析1例HSTCL患者的临床诊疗经过并复习相关文献。结果 该例患者通过脾脏切除病理学确诊，给予DVLD方案（脂质体多柔比星＋硼替佐米＋左旋门冬酰胺酶＋地塞米松）化疗，疗效待评估。结论 HSTCL临床罕见，诊断困难，预后极差，尽早给予高强度化疗联合造血干细胞移植为一种疗效较好的治疗手段。