我国牛羊主产区小肠结肠炎耶尔森菌的病原特征研究

目的对2018-2020年我国牛羊主产区牛羊源小肠结肠炎耶尔森菌进行病原特征研究,为该菌的防控提供科学依据。方法对来自于6个地区的2291份样本进行分离培养、PCR鉴定、玻片凝集以及药敏试验,以掌握其感染情况、毒力基因型和血清型的分布以及耐药情况。结果在2291份样本中,共分离出该菌109株,总检出率为4.76%,其中辽宁地区检出率最高(20.42%),并且各地区检出率差异有统计学意义(χ^(2)=288.153,P<0.01),而各种类样本检出率差异无统计学意义(χ^(2)=1.734,P>0.05)。在本次分离菌株中,ystB基因为优势毒力基因,O∶5,27为优势血清型,菌株对氨苄西林、红霉素、磺胺异恶唑和头孢噻吩耐药率为100%,对多粘菌素B和氟苯尼考敏感率为100%。结论牛、羊源小肠结肠炎耶尔森菌在全国牛、羊主产区分布不广泛,但其多重耐药率较高,建议加强对该菌耐药性的监测与管理。

亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌侵袭鸡肠道上皮细胞的抑制作用研究

为研究亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)侵袭鸡肠道上皮细胞的作用,本研究首先通过二倍稀释法确定山奈酚的最小抑菌浓度(MIC)及其亚抑菌浓度,然后利用亚抑菌浓度山奈酚处理S.typhimurium后检测其SPI-1毒力基因表达水平及其对鸡肠道上皮细胞的侵袭变化规律和对雏鸡的致病性。结果显示,山奈酚对S.typhimurium CVCC542和SL1344株的MIC均>200μg/m L。亚抑菌浓度山奈酚能显著抑制S.typhimurium SPI-1毒力基因sip A、sop B、sop E2、hil A、hil C和hil D的基因表达,并显著降低S.typhimurium对鸡肠道上皮细胞侵袭数目,抑制S.typhimurium诱导鸡肠道上皮细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性升高和F-actin骨架重排,并延长雏鸡存活时间。上述结果表明,亚抑菌浓度山奈酚能够抑制S.typhimurium侵袭鸡肠道上皮细胞,并降低其对雏鸡的致病性,为山奈酚应用于防治S.typhimurium感染提供了实验依据。

鉴定小肠结肠炎耶尔森氏菌及其毒力基因的多重PCR检测方法的建立

针对小肠结肠炎耶尔森氏菌的高度保守基因foxA以及3种毒力基因ail、ystA、ystB设计并合成引物,建立一种多重PCR方法,该方法能够鉴定小肠结肠炎耶尔森氏菌,同时检测其位于染色体上的毒力基因。用单重PCR方法和所建立的多重PCR方法对145份牛粪可疑样品进行检测并加以分析。结果显示,建立的多重PCR方法重复性良好,特异性强,灵敏度高,对ystA、ail、ystB以及foxA基因的最低检测限依次为3×10^-3ng/μL、3×10^-3ng/μL、1.8×10^-3ng/μL和3.2×10^-3 ng/μL。对145份牛粪可疑样品的检测结果显示,其中38份样品只含有foxA基因,71份样品含有foxA和ystB基因,未检出含有ail和ystA基因的样品,与单重PCR结果一致。该方法可一次性检测4种基因,较单重PCR方法更省时省力,对于含有不同毒力基因的小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速检测具有重大意义。