混合性肾细胞癌行腹腔镜下肾部分切除术1例报告及文献复习

目的:分析单侧肾脏嗜酸细胞性乳头状肾细胞癌(OPRCC)和肾透明细胞癌(CCRCC)并存的混合性肾细胞癌(RCC)患者的临床及病理特点,以提高对该疾病的认识。方法:回顾性分析1例OPRCC和CCRCC并存的混合性RCC患者的临床资料。患者,男性,52岁,因体检发现右肾肿物入院。双肾平扫和增强CT显示右肾占位性病变,考虑恶性肿瘤的可能性大。行腹腔镜下右肾部分切除术。结果:术后病理回报显示:(右肾下极)混合性RCC。免疫组织化学染色检测,CK(AE/AE3)(部分+)、Vimentin(部分+)、EMA(部分+)、CK7(+)、CD10(+)、CAIX(局部+)、P504s(+)、PAX-8(弱+)、TFE3(-)、HMB45(-)、MelanA(-)、SDHB(+)和Ki-67(阳性率为2%)。确诊为右肾混合性RCC。患者术后恢复快,术后未接受任何辅助治疗,术后3个月CT检查,未见肿瘤局部复发及转移,术后6个月随访无不适症状。结论:OPRCC和CCRCC并存的混合性RCC患者无特异性临床表现,确诊主要依靠病理组织学检查,治疗方法首选手术治疗;肿瘤恶性程度较低,进展较慢,预后较好,术后仍需长期密切随访。

从“阴虚与血瘀”理论探讨糖尿病合并缺血性卒中的病机及治疗原则

从中医基础理论和现代医学的病因病机方面,论述"阴虚与血瘀"理论与糖尿病合并缺血性卒中发生、发展过程中的相关性,为糖尿病合并缺血性卒中的治疗提供一定的理论依据。笔者认为糖尿病合并缺血性卒中与"阴虚血瘀"理论紧密相关,糖尿病合并缺血性卒中涉及多个脏腑,主要与肝脾相关。根据阴虚与血瘀的病机、治疗原则制定柔肝健脾通络法。

井穴放血治疗急性咽炎的临床观察

通过井穴点刺放血治疗急性咽炎的临床研究,探讨其治疗急性咽炎的临床疗效,并筛选具有较佳疗效的穴位。将60例患者随机分为少商、商阳、中冲、少冲、关冲、少泽6组,每组10例,根据每治疗组的不同穴位放血治疗,每日1次,共3天,进行症状积分和疗效判定。各组组内治疗前后症状积分有显著差异(P<0.0001),表明各组在缓解急性咽炎的症状方面均有疗效;组间比较中冲组、少商组优于其他组(P<0.001),表明中冲和少商穴在井穴选穴上具有优越性。疗效上总显效率在18.3%,总有效率88.3%,得知井穴放血对治疗急性咽炎有很好的疗效,其中少商、中冲组总有效率100%,优于其它组。结论:井穴放血疗法能较好的改善急性咽炎患者症状,提高疗效,其中中冲、少商效果较好。

siRNA抑制人前列腺癌PC-3细胞株VEGF的表达及细胞增殖

目的:研究小干扰RNA(siRNA)对PC-3人前列腺癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的抑制作用及抑制癌细胞增殖和诱导凋亡的作用。方法:体外合成特异性靶向人VEGF基因的siRNA,并转染到PC-3细胞中;RT-PCR和Western blotting检测siVEGF对VEGF基因和蛋白表达的抑制作用;MTT法检测siVEGF对癌细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测siVEGF诱导细胞凋亡的作用。结果:转染siVEGF1和siVEGF2组VEGF mRNA表达水平与空白对照组比较分别下调了60.32%和70.73%;VEGF蛋白表达水平与空白对照组比较明显受到抑制,最高抑制率达72%;转染阴性对照质粒组VEGF基因和蛋白表达水平都无明显改变。转染siVEGF1和siVEGF2的细胞增殖受到抑制,增殖抑制率分别为49.5%和55.3%,细胞的凋亡率分别为33.9%和42.0%。结论:构建的siRNA VEGF能特异有效下调VEGF基因的表达,瞬时转染siRNA VEGF能有效抑制人前列腺癌细胞PC-3增殖并诱导其凋亡。

siRNA抑制人前列腺癌细胞PC3的MDM2表达及细胞增殖

目的研究siRNA MDM2对人前列腺癌细胞PC3的MDM2表达和细胞增殖的作用。方法构建PGCsilencerTM-MDM2 siRNA,并转染入PC3细胞,分别用RT-PCR和Western blot检测siMDM2对PC3细胞MDM2基因和蛋白表达的抑制作用;用MTT法检测siMDM2对PC3增殖抑制的作用,用流式细胞术检测siMDM2对PC3细胞凋亡的影响。结果PT-PCR和Western blot结果显示siMDM2能显著抑制PC3细胞MDM2基因和蛋白的表达,抑制率最高可达65%;MTT和流式细胞术结果证明siMDM2能显著抑制PC3细胞增殖并诱导细胞凋亡。结论siMDM2能特异有效地抑制MDM2在PC3中的表达,并抑制PC3细胞增殖,促进其凋亡。

可溶性血管内皮生长因子受体2片段的表达及其对血管内皮细胞增殖的影响

目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体2（sKDR）抑制血管内皮细胞增殖及在血管生成中的作用。方法提取脐静脉内皮细胞（HUVEC）总RNA,扩增KDR基因膜外1~4结构域,构建原核表达载体pQE40-KDR,转化E.coli M15,经IPTG诱导表达,镍离子柱亲和层析纯化后复性,用Western blot检测sKDR蛋白的表达,MTT比色法和鸡胚尿囊膜（CAM）试验分别检测其对HUVEC增殖的影响及其对血管生成的作用。结果经RT-PCR扩增得到了1150 bp左右的sKDR片段,并在pQE40原核表达系统中表达了sKDR蛋白,以包涵体形式存在。纯化后蛋白电泳呈现相对分子质量50000左右的单一条带,纯化蛋白占总蛋白的98%,蛋白含量为80μg/ml。Western blot证实其为重组sKDR蛋白。MTT检测结果显示,sKDR可抑制血管内皮生长因子（VEGF）刺激的HUVEC增殖,并阻滞VEGF诱导的CAM血管增生。结论已成功构建sKDR原核表达载体,并在大肠杆菌M15中获得表达,纯化的sKDR片段具有与VEGF结合的生物学功能,有望成为基因治疗肿瘤血管形成的理想靶点。

精子凋亡与精子密度、活力、形态关系探讨

目的探讨精子凋亡与精子密度、活力、形态关系。方法分析69例男性不育患者精液样本,采用计算机辅助精液分析进行精液参数检测,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,瑞-姬染色检测精子凋亡率。结果精子凋亡率与精子密度之间没有显著相关性(P>0.05),精子凋亡率与精子活力、正常形态精子百分率之间有显著负相关性(P<0.01,P<0.05);活力异常组精子凋亡率高于活力正常组,两组比较差异有显著性(P<0.05);严格标准下,形态异常组精子凋亡率高于形态正常组,两组比较差异有显著性(P<0.01)。结论精子凋亡率与精子活力和正常形态精子有相关性,精子凋亡率增加可能是弱精子症和畸形精子症患者不育的原因之一。

微小RNA-21和肿瘤抑素在膀胱癌中的表达及其相关性的研究

目的探讨膀胱癌中微小RNA-21和肿瘤抑素表达与临床病理特征之间的关系。方法采用SABC法对98例膀胱癌患者分别进行微小RNA-21和肿瘤抑素的免疫组化染色,其与肿瘤临床分期和细胞分级间的关系及微小RNA-21和肿瘤抑素在瘤细胞中的共表达情况。结果膀胱癌患者中微小RNA-21和肿瘤抑素的阳性表达率分别是69.4%和43.9%。与浅表性和分化较好的膀胱癌相比,侵袭性和分化差的癌细胞中微小RNA-21表达上调明显,而肿瘤抑素表达则显著下调,组间比较(P<0.01),差异有统计学意义。有68例患者存在微小RNA-21和肿瘤抑素共表达,两者之间呈负相关(P<0.05),差异也具有统计学意义。结论微小RNA-21和肿瘤抑素共表达失调可能促进膀胱癌的发生发展,抑制微小RNA-21表达,上调肿瘤抑素水平有希望成为有效治疗膀胱癌的一种新方法 。

张银霞主任四期论治月经不调经验

总结张银霞主任从不同分期治疗月经不调的临证经验。张银霞主任认为依据月经周期的不同可将月经分为行经期、经后期、经间期、经前期四期,依据月经周期时的阴阳消长变化、气血盛衰起伏的理论,采用不同的调经方法,并结合素体特点加减化裁。根据月经不同时期的变化特点,对月经不调分期辨证、中药治疗,临床显著疗效。

利用siRNA沉默VEGF对膀胱癌生长的影响

目的研究VEGF特异性RNA干扰对膀胱癌细胞体内外增殖的影响。方法针对VEGF构建siRNA真核表达载体PsilencerTM-VEGF-siRNA,并转染至膀胱癌细胞T24。RT-PCR观察VEGF的基因沉默效果;MTT比色分析检测细胞体外增殖能力;流式细胞计数检测细胞的凋亡。同时,通过裸鼠移植瘤模型观察VEGF基因沉默效果及对膀胱癌体内治疗的效果。结果转染siVEGF后膀胱癌细胞的VEG基因的表达显著被抑制(最高抑制率达79%)。与对照组比较,转染siVEGF组T24细胞的增殖活性明显低于转染阴性对照质粒组和空白对照组(P<0.01);流式细胞计数结果显示细胞发生凋亡。裸鼠体内致瘤实验显示,转染siVEGF组T24细胞在裸鼠体内增殖显著降低,肿瘤生长减慢。结论siVEGF能够有效的抑制膀胱癌中VEGF的表达,从而有效抑制膀胱癌细胞的生长。

柔肝健脾通络法治疗糖尿病合并缺血性卒中的临床观察

目的观察柔肝健脾通络法治疗糖尿病合并缺血性卒中的临床疗效。方法 198例患者按就诊先后顺序随机分为中药治疗组99例,脱落10例,对照组99例,脱落11例。中药治疗组常规治疗加服"柔肝健脾通络"中药汤剂,对照组以常规治疗为主,两组疗程均为28 d。结果两组病例治疗后总有效率比较差异无统计学意义;两组病例治疗前后NHISS评分、焦虑量表评分、抑郁量表评分、生理领域、心理领域及社会关系领域评分比较差异有统计学意义,且中药治疗组优于对照组,差异有统计学意义。结论柔肝健脾通络中药治疗糖尿病合并缺血性卒中在改善患者的生活质量及缓解患病后的焦虑抑郁确有疗效,可很好地改善患者的精神状态,提高生存质量。

张银霞治疗消渴病所致尿频经验

张银霞主任师承全国名老中医张献墀的学术思想,临床经验丰富,从医近五十年,擅长运用中、西医结合的方法治疗皮肤科、妇科、内科疾病,尤擅长糖尿病及其并发症,疗效显著。笔者跟随张银霞主任学习的过程中发现张主任治疗消渴病所致尿频有自己独特的认识与治疗策略,并逐渐对张银霞主任治疗消渴病所致尿频的临证经验进行了总结。在临床中,张银霞主任认为消渴病所致尿频多责之与肾与膀胱,同时又涉及脾、肺两脏,故从肺、脾、肾三脏的病机方面阐释了消渴病所致尿频的病机,从而确定治疗方案,张主任认为在治疗糖尿病所致尿频方面,除敛肾气,温肾阳,以助膀胱蒸腾汽化之外,亦要注重调肺气,健脾气,并在临床上多以金匮肾气、补中益气、养阴清肺等随症加减使用,疗效显著。

siRNA抑制人膀胱癌T24细胞株VEGF的表达及细胞增殖

目的探讨siRNA(small interfering RNA)对T24人膀胱癌细胞株VEGF基因表达的抑制及癌细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法体外构建两个针对VEGF基因的siVEGF的重组质粒,转染T24细胞;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定VEGF基因的表达,并用MTT法和流式细胞仪检测siVEGF对细胞的增殖抑制率和凋亡的影响。结果构建的两个siVEGF重组质粒分别使VEGF基因表达下调到空白组的21.02%和30.13%;control siRNA组的VEGF基因表达与空白组无明显差异。转染siVEGF后T24细胞生长受到抑制,并发生细胞凋亡,凋亡率分别为45.5%和35.9%。结论siVEGF可以有效抑制T24细胞株中VEGF的表达,从而抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡。

反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生物学行为的影响

目的探讨反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生长及转移的影响。方法通过构建裸鼠原位膀胱癌移植瘤模型并灌注携带基因的腺病毒载体,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时采用免疫组化法检测肿瘤细胞增殖和凋亡指数。结果肿瘤大小:治疗组为(14.60±5.31)mm2,对照组为(58.92±7.16)mm2,两组比较P<0.01;肿瘤细胞增殖率:治疗组为41.30%,对照组94.70%,两组相比P<0.05;凋亡指数治疗组和对照组分别是30.18和9.53,两者比较P<0.05;治疗组5只中无一只发生盆腔淋巴结转移,而对照组3只出现转移(60.0%),两组比较P<0.01。上述各项组间差异均有统计学意义。结论反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对人膀胱癌裸鼠原位移植瘤具有良好的靶向性,能够通过抑制肿瘤细胞增殖和加速肿瘤细胞凋亡,遏制实验性裸鼠膀胱移植癌模型的生长转移,从而为该载体用于人类膀胱癌的治疗提供了一定的实验依据。

缺氧诱导因子-1α在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在膀胱癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学技术对30例新鲜的膀胱癌患者的肿瘤组织和15例正常膀胱组织检测HIF-1α的表达情况,比较两组之间的差异。结果 30例膀胱癌组织中23例(76.7%)呈阳性表达,而15例正常膀胱组织中仅1例阳性表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α蛋白的高表达可能与膀胱癌的发生、发展和复发有关。

因子分析对IgA肾病数据资料挖掘的初步探索性研究

IgA肾病（IgA nephropathy）[1]是指以肾小球系膜增生基质增多伴以IgA为主的沉淀物,临床上常以血尿反复发作为特点,但可呈现以无症状血尿到急进型肾炎间各种表现的原发性肾小球疾病,它是我国目前发病率较高的肾小球疾病。

许彭龄以黄芪建中汤加减治疗气虚发热验案

患者,男,49岁,主因＂左侧肢体活动不利伴言语不能2年余＂由门诊以＂重型颅脑损伤术后＂于2012年11月15日入院,患者2010年因车祸致＂大面积颅脑损伤＂,经开颅去骨瓣、脑室-腹腔引流术以及颅骨修补术等治疗。入院2天后患者出现体温升高,体温39.0℃,患者羸弱,面色无华,无汗,无恶寒、寒战,时有咳嗽咳痰,痰少质黏不易咳出,四末不温,腹部喜按,舌淡,苔薄白,脉沉。

抗人膀胱癌抗独特型抗体佐剂疫苗的临床初步应用

目的 研究抗人膀胱癌佐剂疫苗对人体的主动免疫治疗作用 ,为扩大临床应用提供理论依据。方法 用抗人膀胱癌抗独特型抗体主动免疫治疗膀胱癌病人 ,同时用生理盐水注射作为对照组 ,检测血清中人抗鼠抗体的产生情况 ,并检测治疗前后各项体液免疫指标及 NK细胞活性变化。结果 与对照组相比 ,治疗组病人的免疫指标上升。结论 抗人膀胱癌佐剂疫苗有增强免疫力的作用 ,有望成为膀胱癌治疗的一种新的有效手段。

膀胱癌浸润转移与纤维蛋白含量表达相关性研究

目的 :探讨膀胱癌浸润、转移机理。方法 :应用琼脂糖单向扩散法和免疫酶染色技术 (ABC法 )检测膀胱癌病人血清及膀胱癌组织中纤维结合蛋白 (FN)的含量及分布。结果 :膀胱癌病人血清中 FN含量明显低于正常对照组 ,统计学处理差异非常显著 (P<0 .0 1 ) ,膀胱癌组织中 FN表达于细胞基质中 ,少部分表达于细胞膜表面 ,且转移癌与非转移癌阳性表达差异显著。结论 :FN含量与膀胱癌浸润。

血管内皮生长因子165b对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响

目的:探讨血管内皮生长因子165b(VEGF165b)对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响,并初步研究其作用机制。方法:HepG_2细胞分为空白组(仅加转染试剂)、对照组(转染阴性对照PcDNA3.0表达载体)和PcDNA-VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体PcDNA-VEGF165b)。MTT法检测各组HepG_2细胞生存率,RT-PCR法和Western blotting法检测HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165 mRNA和蛋白表达水平,Transwell小室法检测HepG_2细胞迁移能力。结果:与空白组比较,对照组HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。与空白组比较,PcDNA-VEGF165b组细胞中VEGF165bmRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),VEGF165 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。空白组和对照组细胞生存率比较差异无统计学意义(P>0.05);与空白组和对照组比较,PcDNAVEGF165b组细胞生存率有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验,空白组和对照组细胞迁移率比较差异无统计学意义(P<0.05);与空白组和对照组比较,PcDNA-VEGF165b组HepG_2细胞迁移率明显降低(P<0.05)。结论:VEGF 165b能抑制VEGF165基因和蛋白的表达,VEGF165b对肝癌细胞增殖无明显影响,但可降低肝癌细胞的迁移能力。