鼠李糖乳杆菌效应蛋白HM0539增强小鼠对大肠杆菌O157:H7肠道感染的抵抗力

目的探究鼠李糖乳杆菌LGG的效应蛋白HM0539对大肠杆菌O157∶H7肠道感染的预防效果。方法采用黏附、侵袭实验评价HM0539处理后,大肠杆菌O157∶H7对HT-29细胞的黏附侵袭能力。通过免疫荧光、免疫印迹等方法进一步检测在使用HM0539治疗过程中对HT-29细胞中黏蛋白(MUC2)、紧密连接蛋白(ZO-1)表达的影响;通过动物实验,观察小鼠的生存率及体质量变化,检测攻毒小鼠的肠道病理及肠道屏障功能的改变。结果HM0539呈浓度依赖性地抑制大肠杆菌O157∶H7黏附和侵袭HT-29,且HM0539的预处理效果优于共同处理(P<0.05);免疫荧光和免疫印迹等结果显示,HM0539不仅可以明显降低大肠杆菌O157∶H7感染后MUC2的表达水平(P<0.05),还可显著抑制其对细胞间紧密连接蛋白的破坏(P<0.05)。动物实验结果证明HM0539可抑制攻毒小鼠的体质量下降(P<0.05)和空肠的损伤;HM0539可抑制大肠杆菌O157∶H7诱导的空肠杯状细胞的破坏(P<0.05);此外,HM0539可上调攻毒小鼠空肠中的MUC2、ZO-1蛋白的表达(P<0.05)。结论HM0539可抑制大肠杆菌O157∶H7黏附和侵袭HT-29细胞,而且增强了小鼠对大肠杆菌O157∶H7感染的抵抗力,其机制可能是通过抑制大肠杆菌O157∶H7破坏黏蛋白和细胞间紧密连接蛋白。

15种黄酮类化合物对烤鸡胸肉中杂环胺含量的影响

为研究15种黄酮类化合物对烤鸡胸肉中5种杂环胺含量的影响,将烤鸡胸肉经NaOH提取、乙酸乙酯萃取,通过Oasis MCX固相萃取小柱净化后,采用超高效液相色谱-串联质谱法对杂环胺含量进行分析,并采用主成分分析法研究黄酮类化合物对烤鸡胸肉中杂环胺形成影响的差异性。结果表明,15种黄酮类化合物中染料木素、表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和木犀草素对烤鸡胸肉中1-甲基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚和9H-吡啶并[3,4-b]吲哚抑制作用较好,抑制率达20%以上;EGCG、柚皮素、木犀草素和染料木素对2-氨基-1-甲基-6-苯基-咪唑并[4,5-b]吡啶抑制作用较好,抑制率达45%以上;染料木素、柚皮素和木犀草素对2-氨基-3,8-二甲基咪唑并[4,5-f]喹喔啉和2-氨基-3,4,8-三甲基-3H-咪唑并[4,5-f]喹喔啉抑制作用较好,抑制率达45%以上。主成分分析结果显示,EGCG、木犀草素和染料木素聚为一类,且对5种杂环胺均有较强的抑制作用。通过化学结构推测得出,黄酮母核中A环同时存在5-羟基和7-羟基,B环的4’-羟基对黄酮类化合物有效抑制烤鸡胸肉中杂环胺的形成具有重要作用,而C环中3-羟基的存在会降低其对杂环胺形成的抑制作用。综上,黄酮类化合物对杂环胺的形成具有影响,EGCG、木犀草素和染料木素的抑制作用最强,可为高温肉制品安全加工提供理论参考。

芫荽中黄酮类化合物的提取及其体外抗氧化活性研究

目的:确定芫荽中黄酮类化合物的最佳提取条件,比较芫荽不同部位的抗氧化活性。方法:采用正交实验确定芫荽中黄酮类化合物提取的最佳方案,以芦丁为对照品,用紫外分光光度计分别测定其根、茎、叶的黄酮类化合物含量,采用Fenton反应体系产生·OH与邻苯三酚自氧化产生O2-及对DPPH自由基消除作用,研究芫荽根、茎、叶提取液对三者的清除作用。结果:最佳提取条件为:乙醇浓度为70%、温度为90℃、提取时间为2.5h。芫荽根、茎、叶的黄酮类化合物含量分别为:13.00mg/m L、20.00mg/m L、102.00mg/m L。芫荽根、茎、叶提取液对·OH、O2-及DPPH自由基均有清除作用。结论:芫荽的根、茎、叶均具有较强的抗氧化活性,且芫荽根、茎、叶对·OH、O2-及DPPH自由基的消除能力均为:叶>根>茎,即根、茎、叶抗氧化活性的大小为:叶>根>茎。

基于沥青荧光强度的再生沥青融合效果评价

为了评价在不同再生工艺下新旧沥青的融合效果,该文分别针对热拌和温拌再生沥青混合料,采取分层剥离法获得不同层次的再生沥青样品,并通过样品的荧光强度对再生沥青的融合效果进行定量评价。研究结果显示:用灰度均值作为技术指标可以准确评价再生沥青中新旧沥青的融合效果,该方法操作简单,易于实现,可根据融合效果选择适合的再生工艺和温拌剂品种,具有一定的理论和实际应用价值。

对木瓜酵素中抗氧化物质活性的研究

目的:本文通过研究木瓜酵素的抗氧化活性,从而为木瓜酵素综合性开发提供一定的理论基础和技术依据。方法:研究运用邻苯三酚自氧化法、水杨酸法、DPPH分析法分别研究木瓜酵素对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基的清除能力,并与同等条件下抗坏血酸抗氧化作用比较。结果:(1)在对超氧阴离子自由基清除率达50%时,木瓜酵素所需浓度为16.85mg/m L。

芫荽抑菌成分提取工艺优化研究

目的:研究芫荽茎、叶中抑菌成分的提取方法及其成分的抑菌效果。方法:通过单因素实验确定提取时间、提取温度和提取溶剂料液比,并作为观察芫荽茎、叶抑菌成分提取的影响因素,建立正交试验确定茎、叶各自的最佳提取条件。结果:芫荽茎部分抑菌成分提取的最佳条件为:提取温度25℃、提取时间120min、提取溶剂料液比12∶1,在该条件下,金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为36mm,大肠杆菌的抑菌圈直径为37mm,黑曲霉抑菌圈直径为30mm,酿酒酵母抑菌圈直径为23mm;芫荽叶部分抑菌成分提取的最佳条件为:提取温度25℃、提取时间150min、提取溶剂料液比12∶1,在该条件下,金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为32mm,大肠杆菌的抑菌圈直径为32mm,黑曲霉抑菌圈直径为25mm,酿酒酵母抑菌圈直径为20mm。结论:芫荽茎提取液抑菌效果较叶提取液抑菌效果明显。

紫薯提取物中花色苷的含量测定及抗氧化活性研究

目的:建立一种紫薯花色苷的提取和检测方法并研究紫薯花色苷的抗氧化活性,从而为紫薯花色苷的推广和应用提供数据支撑。方法:采用加热回流法进行提取,经AB-8型大孔树脂纯化后使用多功能酶标仪检测紫薯花色苷的含量,运用DPPH自由基、超氧阴离子的清除力测试及关于ABTS+·的还原力分析研究紫薯花色苷的抗氧化性能。结果:紫薯花色苷的最佳提取工艺为:料液比1∶15,提取温度70℃,提取时间2h,提取次数3次;纯化条件为:70%乙醇作为洗脱剂,洗脱流速为2.0mL/min,洗脱体积为4倍柱体积;抗氧化分析结果表明:在一定范围内,随着样品浓度增加对活性氧簇的清除能力逐渐增强,对DPPH自由基、ABTS自由基和超氧阴离子的清除率分别可达87.11%、88.96%、63.24%。结论:在此工艺条件下紫薯花色苷的有效含量达到62.68%,并且具有不错的抗氧化活性。

中性粒细胞胞外诱捕网(NET)相关的宿主免疫调控与新生儿败血症和脑膜炎治疗的研究进展

新生儿感染是导致新生儿死亡的主要原因之一,且大多数由败血症和脑膜炎引起。中性粒细胞胞外诱捕网(NET)是一种由中性粒细胞介导的胞外杀菌方式,依靠其独特的网状结构捕获病原体。NET对包括细菌、病毒、真菌和寄生虫在内的多种病原体均具有抑制和杀灭作用,是新生儿先天免疫功能的重要组成部分。很多研究将NET解释为导致败血症病程加重的原因之一,但也有几项研究证明NET在新生儿败血症和脑膜炎(NSM)进程中可发挥抗感染作用。阐明NET在新生儿败血症中的作用,可为合理应用NET这把双刃剑提供更多的证据支持。

α7nAChR基因敲除HIV-1gp120转基因小鼠模型的构建

目的通过构建双基因编辑小鼠模型(α7R-/-/gp120+),为探索α7乙酰胆碱受体(α7 nAChR)介导gp120中枢神经毒性的作用和机制提供研究基础。方法α7 nAChR基因敲除小鼠(α7R-/-)与HIV-1 gp120转基因小鼠(gp120+)杂交(F0),从产生的F1小鼠中,选取基因型为α7R+/-/gp120+的小鼠进一步交配,得到F2小鼠。PCR法鉴定和筛选F3小鼠基因型,免疫组化分析双转基因动物模型蛋白表达;体外实验使用gp120蛋白和α7 nAChR抑制剂处理小胶质细胞,ELISA检测各组IL-1β与TNF-α表达情况。结果F3小鼠的PCR结果符合预期,其中有2只双基因编辑成功的小鼠。免疫组化结果显示双基因编辑小鼠(α7R-/-/gp120+)的脑组织缺乏α7 nAChR的同时高表达gp120蛋白。体外实验结果表明Gp120可促进小胶质细胞分泌IL-1β与TNF-α,而抑制α7nAChR后IL-1β与TNF-α表达明显降低(P<0.001)。结论α7R-/-/gp120+双基因修饰小鼠成功构建,且具有稳定遗传的特点,可为后续探索α7 nAChR介导gp120中枢神经毒性的作用和机制提供重要的动物模型。

功能性芫荽酱的加工工艺

以芫荽为主要原料制成营养丰富,风味独特的酱品。本文通过用感官评定法、多因素正交试验法找出使其色泽、口感、质地和气味最优的制酱方案。

织密“三道防线”筑牢春季校园安全屏障

2月6日起,广东省江门市中小学正式返校开学。根据省、市新冠感染疫情防控办工作部署,江门市卫生健康局高度重视、迅速行动、主动作为,先后印发《关于进一步做好冬春季校园疫情防控指导工作的通知》《关于进一步明确兼职卫生健康副校长校园疫情防控工作职责的通知》,对相关工作提出明确要求,切实把加强新冠病毒感染“乙类乙管”后校园防疫和健康监测管理工作作为重要任务来抓,织密“三道防线”,切实保障师生身体健康和生命安全,确保校园平稳、有序、安全。

广东本地及移民学龄儿童饮食结构和肠道菌群差异分析

【目的】探究广东本地及移民学龄儿童的饮食结构及肠道菌群分布的差异。【方法】以广东深圳为采样点,随机抽样选取48名广东本地儿童和34名移民儿童,进行膳食问卷调查和晨便采集。采用Mann-Whitney U test分析本地及移民儿童饮食因子摄入频率的差异,并使用Illumina Miseq高通量测序技术对儿童的肠道菌群进行测序分析。【结果】82例儿童的膳食模式大多以米饭为主食,搭配蔬菜、优质肉类以及水果。但本地儿童在复合碳水化合物、蔬菜、海产品方面有更高的摄入量(P<0.05),而移民儿童在水果、低脂牛奶、酸奶产品方面有更高的摄入量(P<0.05)。α多样性结果显示,移民组的Chao1指数(P<0.001)和Ace指数(P<0.001)均显著高于本地组。在菌属水平,本地儿童肠道普氏菌属(P=0.027)和副拟杆菌属(P=0.040)丰度显著高于移民组。LEfSe分析同样显示菌群的组间差异主要由本地组的普氏菌科、普氏菌属等造成。RDA结果提示,蔬菜和低脂牛奶的摄入水平显著影响本地儿童肠道菌群的分布,初步提示本地儿童的饮食习惯可能影响肠道普氏菌属和副拟杆菌属的丰度。【结论】本研究揭示了本地与移民儿童的饮食结构及肠道菌群分布存在明显差异,而且蔬菜和低脂牛奶摄入水平与本地儿童肠道菌群分布呈显著相关关系,这为通过改变饮食从而调控肠道菌群提供了新的理论依据。

应用GSEA和WGCNA方法分析细菌性败血症宿主关键差异基因及意义

【目的】采用生物信息学方法分析公共数据库来源的细菌性败血症患者全血转录组学表达谱,探讨细菌败血症相关的宿主关键差异基因及意义。【方法】基于GEO数据库中GSE80496和GSE72829全血转录组基因数据集,采用GEO2R、基因集富集分析(GSEA)联用加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选细菌性败血症患者相比健康人群显著改变的差异基因,通过R软件对交集基因进行GO功能分析和KEGG富集分析。同时,通过String 11.0和Cytoscape分析枢纽基因,验证枢纽基因在数据集GSE72809(Health组52例,Definedsepsis组52例)全血标本中的表达情况,并探讨婴儿性别、月(胎)龄、出生体重、是否接触抗生素等因素与靶基因表达谱间的关系。【结果】分析GSE80496和GSE72829数据集分别筛选得到932个基因和319个基因,联合WGCNA枢纽模块交集得到与细菌性败血症发病相关的10个枢纽基因(MMP9、ITGAM、CSTD、GAPDH、PGLYRP1、FOLR3、OSCAR、TLR5、IL1RN和TIMP1);GSEA分析获得关键通路(氨基酸糖类-核糖代谢、PPAR信号通路、聚糖生物合成通路、自噬调控通路、补体、凝血因子级联反应、尼古丁和烟酰胺代谢、不饱和脂肪酸生物合成和阿尔兹海默症通路)及生物学过程(类固醇激素分泌、腺苷酸环化酶的激活、细胞外基质降解和金属离子运输)。【结论】本项研究通过GEO2R、GSEA联用WGCNA分析,筛选出与细菌性败血症发病相关的2个枢纽模块、10个枢纽基因以及一些关键信号通路和生物学过程,可为后续深入研究细菌性败血症致病机制奠定理论依据。