烟草烟雾暴露小鼠中CD4^+ Foxp3^+调节性T细胞亚型与Th1/Th17变化的实验研究

目的:探讨烟草烟雾暴露后小鼠CD4^+Foxp3^+调节性T细胞(Treg细胞)亚型及Th1、Th17细胞比例的变化及其意义。方法:将20只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组和烟熏组,烟熏组小鼠烟草烟雾暴露24周建立肺气肿模型。采用苏木精—伊红(HE)染色法观察小鼠肺组织形态学改变。流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏和肺组织中Treg细胞亚型及Th1、Th17的比例变化。结果:烟熏组肺泡平均内衬间隔(MLI)为(53.3±8.9)μm,明显高于对照组的(28.0±1.2)μm(P<0.01)。与对照组比较,烟熏组外周血、脾脏和肺组织中Th1、Th17细胞比例均升高(P<0.05),记忆型Treg细胞(CD4Foxp3^+CD44^+CD62^+)、效应型Treg细胞(CD4Foxp3^+CD44^+CD62-)比例升高,幼稚型Treg细胞(CD4Foxp3^+CD44^-CD62^+)比例下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:烟草烟雾暴露肺气肿小鼠体内Treg细胞亚型参与了气道炎症免疫调节,可能有助于减少Th1、Th17细胞的表达并减轻肺部炎症反应。

香烟烟雾暴露小鼠中CD4^+Foxp3^+调节性T细胞中组蛋白去乙酰化酶的表达及意义

目的:探讨香烟烟雾暴露小鼠CD4+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)中组蛋白去乙酰化酶(HDAC)的表达及意义。方法:将40只健康的雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、HDAC阻滞剂曲古菌素A(TSA)组、烟熏组、烟熏+TSA组。烟熏组香烟烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型,苏木精—伊红(HE)染色观察小鼠肺组织形态学改变。免疫磁珠分选纯度大于90%的Treg细胞,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测Treg细胞中HDAC2、HDAC5、HDAC7、HDAC9等mRNA表达水平。流式细胞术检测Treg细胞中表达细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)的比率、Treg增殖能力及其对效应Teff细胞增殖抑制作用。结果:烟熏组的平均内衬间隔(MLI)为(53.1±8.7)μm,明显高于对照组的(28.2±1.2)μm(P<0.05),成功建立肺气肿模型。与对照组比较,TSA组和烟熏组Treg细胞HDAC2、HDAC5、HDAC7、HDAC9 mRNA相对表达量降低,Treg细胞中CTLA-4表达率及其分裂指数升高,Teff细胞分裂指数下降(P<0.05);加入TSA进行体外干预后,与烟熏组比较,烟熏+TSA组Treg细胞CTLA-4表达率升高,Treg细胞增殖能力及对效应Teff细胞的增殖抑制作用均增强(P<0.05)。结论:在香烟烟雾诱导的肺气肿小鼠中,CD4+Foxp3+Treg细胞HDAC表达下降,HDAC可能参与吸烟所致的Treg细胞免疫功能失衡。