荧光染色法检测重组乙型肝炎疫苗中残留DNA含量

目的采用荧光染色法检测重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）纯化工艺中间产品、原液及半成品中残留DNA含量。方法采用《中国药典》三部（2010版）附录ⅨB荧光染色法检测重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）纯化工艺主要中间产品[丁基琼脂糖层析收集液（以下简称BA富集液）]、原液及半成品中残留DNA含量，对该方法的准确度、精密性进行验证，并用建立的方法检测10批BA富集液、原液及半成品中残留DNA含量。结果该方法线性范围1．25～80ng／ml，r^2≥0．999，最低检测限为1．25ng／ml；DNA标准品在BA富集液、疫苗原液及半成品中的平均回收率分别为105．8％、101．4％和108．5％，准确度较好；不同时间点重复测定同一批样品的变异系数（CV）在1．6％-6．56％之间，不同试验间重复测定同一批样品的CV在1．4％-3．6％之间，试验内和试验间精密性较好；10批BA富集液中DNA浓度均较高，经过纯化后，原液中DNA含量明显降低，半成品中除个别批号外，均基本达到低于10ng／剂的要求。结论荧光染色法可用于重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）纯化工艺中间产品、原液及半成品中残留DNA含量的常规监测，具有简便、快速、自动化程度高等特点，测定前样品无需进行处理。