不同时机给药对原发性痛经模型小鼠雌激素受体、缩宫素受体的影响

目的观察不同时机给药对原发性痛经模型小鼠雌激素受体(ER-α)和缩宫素受体(OTR)的影响。方法将km小鼠按体重分层随机分为:JQF动情周期给药组、JQF第4天给药组(JQF剂量均为0.218 g/kg)、元胡止痛片组(0.1 g/kg)、模型组和正常组。除正常组外每日皮下注射苯甲酸雌二醇0.2 mg/只,连续6 d。采用Western blot和Real-time PCR分别检测1周期给药和3周期连续给药对ER-α和OTR蛋白与m RNA表达的影响。结果与模型组比较,JQF动情周期给药组与第4天给药组ER-α和OTR蛋白、m RNA的表达均呈现显著下调(P<0.01)。动情周期给药组和第4天给药组组间比较无差异,3周期连续给药实验结果与1周期一致。结论不同时机给药对原发性痛经模型小鼠ER-α和OTR蛋白、m RNA表达有相同的抑制作用。

经前三剂止痛方活性部位治疗原发性痛经的作用机制研究

目的:探讨经前三剂止痛方(JQF)活性部位治疗原发性痛经(primary dysmenorrheal,PD)的作用机制。方法:建立大鼠痛经模型,采用酶免法对照观察了痛经大鼠子宫前列腺素含量(PGF2α、PGE2)的变化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测OTR、ER-α的变化。结果:与模型组比较,JQF-A-N-30的PGF2α含量显著下降(P<0.01),JQF-A-E的PGF2α含量亦下降(P<0.05),JQF-A-N-30、JQF-A-E的PGE2含量均上升(P<0.05),PGF2α/PGE2减小(P<0.01);JQF-A-N-30、JQF-A-E的OTR、ER-α基因表达较模型组均降低(P<0.05)。结论:JQF的活性部位可以使子宫平滑肌的收缩得到抑制,从而使子宫平滑肌的紧张度降低,并能够有效的降低雌鼠痛经模型子宫组织中PGF2α的水平;通过JQF活性部位的干预,可减轻雌激素和缩宫素的刺激,从而使子宫OTR低表达,减少子宫对OT的敏感性,缓解痛经。

从免疫应激实验研究经前三剂止痛方与扶正祛邪相关性

目的:观察经前三剂止痛方(JQF)对小鼠免疫功能和应激反应的调节作用,通过现代医学的概念来初步研究方剂中所包含的扶正祛邪的中医内涵。方法:KM小鼠,雌雄各半,分为正常对照组、模型对照组、JQF高剂量组(1.9167 g·kg-1体重)、JQF低剂量组(0.9583 g·kg-1体重)和绞股蓝组(0.0237 g·kg-1体重),观察JQF对免疫功能低下小鼠的影响;将小鼠分为正常对照组、JQF高剂量组(1.9167 g·kg-1体重)、JQF低剂量组(0.9583 g·kg-1体重)和十全大补丸组(0.0156 g·kg-1体重)进行JQF抗应激实验:耐缺氧实验、耐疲劳实验、耐寒冷实验,分别计算小鼠在严重缺氧环境下的存活时间,在极度寒冷条件下的死亡百分率及小鼠因疲劳致死的负重游泳时间。结果:经前三剂止痛方对于免疫功能低下的小鼠以及在严重缺氧、寒冷、疲劳条件下小鼠的应激反应均有良好的修复作用。结论:本研究通过小鼠的免疫、应激实验显示,在扶正祛邪治则指导下拟定的活血养血方剂——经前三剂止痛方具有提高小鼠免疫功能和调节应激反应作用,对探讨祖国医学扶正祛邪治则客观化具有指导意义。

超临界CO_2提取经前方挥发油及其化学成分药理分析

目的对超临界提取法提取的经前方(JF)中挥发油成分进行分析,并研究主要挥发油成分对大鼠痛经模型的药理学作用。方法实验用气-质联用法(GC-MS)来分析超临界提取的经前方挥发油中所含的各个有效成分。同时分别检测挥发油成分对缩宫素所造成的小鼠痛经扭体模型、镇痛模型的不同治疗效果。结果检出40个色谱峰并且鉴定出35个化合物。对于注射缩宫素引起的小鼠扭体实验以及镇痛模型中高剂量组疗效较好。结论该工艺可以较好的提取经前方中挥发油的主要药效成分。并且挥发油提取物对于痛经、镇痛模型有较好的药理疗效。

基于细胞萃取及分子对接的淫羊藿中雌激素样作用成分分析

目的:利用T47D细胞/液质联用及分子对接筛选淫羊藿中具有雌激素样作用的成分。方法:采用溶有淫羊藿提取物的培养基培养T47D细胞,具有雌激素样作用的成分选择性地与T47D细胞结合,培养一定时间后,清洗并破碎细胞,释放出与其结合的成分,最后利用液质联用技术进行分析鉴定。对于鉴定出的可与细胞结合的成分,采用分子对接的方法研究其与雌激素受体的相互作用。结果:初步检测出淫羊藿中可与T47D细胞结合的7个成分,分别为淫羊藿苷,朝藿定B,宝藿苷-Ⅱ,淫羊藿次苷-I,宝藿苷-I,朝藿苷甲,脱水淫羊藿素,其中宝藿苷-Ⅱ,脱水淫羊藿素可与雌激素受体发生相互作用。结论:宝藿苷-Ⅱ,脱水淫羊藿素可与T47D细胞结合,且均可与2种雌激素受体发生作用,提示两者可能具有雌激素样作用。

基于靶细胞萃取的延胡索药效成分的筛选和含量测定

目的建立靶细胞萃取延胡索Corydalis Rhizoma中的药效成分并采用HPLC法进行定量分析的方法。方法选用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为靶细胞,萃取延胡索中的药效成分。在细胞对数生长期加入延胡索冻干粉,孵育2 h收集细胞并用液氮裂解,得到萃取药物后的细胞样品。采用UPLC/Q-TOF-MS对其进行检测,分析萃取进入细胞内的物质,即延胡索中进入细胞进一步发挥药效的有效成分。最后,用HPLC法对进入细胞中的有效成分进行定量分析。结果 HUVEC萃取到5个药效成分,分别为延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素、盐酸小檗碱、去氢延胡索甲素。同时建立5个成分的含量测定方法。结论靶细胞萃取的分析方法可以通过化合物与细胞之间的相互作用,反映出药物中发挥药效的活性物质,在中药复杂体系的研究中起到重要的作用。

《傅青主女科》痛经方证用药规律探讨

《傅青主女科》中共有5篇为痛经方,分别有5条5证5方描写痛经,在痛经病因、病机、治法和药物配伍、炮制等方面上有独到的见解。文章重点在于对《傅青主女科》中痛经病症的病症发生原因、疾病病机规律;痛经病治法规律;痛经方方剂配伍规律3个方面进行探讨,归纳其辨证特色及用药规律。《傅青主女科》在痛经的病因、病机治法、方剂配伍等方面的临床价值和历史贡献值得后人仔细探究挖掘,故应归纳其用药规律,继承古训、创新今朝。