宫颈癌患者肠道微生物的精准检测分析

目的:通过肠道菌群检测了解宫颈癌患者肠道菌群的构成及多样性等特征,以期从肠道菌群方面找出与宫颈癌发生和进展相关预警因子。方法:选取2022年1月至2023年7月在广西医科大学附属肿瘤医院经病理组织学证实且在取材时未接受任何治疗的正常和宫颈癌患者;通过肠道菌群检测分析相关因素与宫颈癌发生和进展之间的相关性。结果:收集30例健康妇女(正常对照组)和51例宫颈癌患者(宫颈癌组)的大便进行肠道菌群检测;α、β多样性分析显示本次抽样充分,两样本在多样性具有显著差异;与正常对照组比较,宫颈癌组肠道菌群中的菌群多样性明显减少(P<0.05);对主要病原菌种检测丰度比较发现,与正常对照组比较,宫颈癌组肠道菌群中主要病原菌种的检测丰度明显增加,主要有大肠埃希氏菌、脆弱拟杆菌、痢疾志贺氏菌(P<0.05),宫颈癌组肠道菌群中主要有害菌属的检测丰富明显增加,主要有链球菌属、梭杆菌属、克雷伯氏菌属、志贺氏菌属(P<0.05)。在分类学组成分析和组间差异分析中可发现厚壁菌门、变形菌门在宫颈癌组和正常对照组之间有显著差异(P<0.05);同时,肠道菌群中的益生菌主要是双歧杆菌属和乳杆菌属可见减少趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。此外,在对两组的肠道菌群中主要代谢产物和微量元素的比较发现,宫颈癌组肠道菌群中的氨基酸含量均有不同程度的升高、维生素中A、B1、B2、B6、B12、叶酸、维生素C、维生素E、维生素K的含量均显著升高(P<0.05)、微量元素中铁含量降低(P<0.05)、脂肪酸中乙酸含量降低、丁酸含量增多(P<0.05)、营养评估中的脂肪含量降低、碳水化合物含量升高(P<0.05)。结论:宫颈癌患者肠道菌群失调,各种营养素失衡,这些改变可能促进宫颈癌的发生。

数控精密立式磨床空间误差建模及溯源分析

数控精密立式磨床在加工时具有变形量少、圆度更好的优点,广泛应用于机床行业中套筒类、盘类、环类、小型工作台等零件的磨削加工领域。与国外相比,国内机床行业在高端磨床领域存在着生产效率低、加工精度差等问题。以某型号数控精密立式磨床为研究对象,首先通过研究各关键部件之间的运动关系,得出相应的几何误差参数,运用多体系统理论建立了部件之间的变换矩阵,进而得到磨床的精密加工约束方程,从而建立磨床的空间几何误差模型。依据该空间误差模型,建立误差灵敏度模型,得到影响加工精度的关键误差项。最后针对关键误差项进行误差修复,完成对数控立式磨床加工精度的优化,可在立式磨床设计阶段提供一定的设计理论基础。

雄安至北京大兴国际机场快线起步区地下段结构抗浮设防水位取值研究

抗浮设防水位直接影响到地下结构的安全与建设费用,在地下结构建设中至关重要,因此,科学合理地确定地下结构的抗浮设防水位具有巨大的社会意义和经济价值。本文以“雄安新区至北京大大兴国际机场快线地下工程段”为研究对象,系统分析了研究区水文地质条件以及地下水位年内年际动态变化规律,利用数值模拟法和类比预测法确定了地下结构抗浮设防水位标高建议值。结果表明,该场地区域浅层地下水水位埋深一般为5.0~20.0m,地下水水位标高一般为–10.0~1.0m。近五年场地浅层地下水水位标高一般为–5~–10 m,埋深一般为3.0~15.0 m,地下水位逐年升高,回升速率约1.0 m/a。地下结构抗浮设防水位标高取值建议取使用期抗浮设防水位采用数值模拟法预测结果。该成果服务了“雄安新区至北京大兴国际机场快线(R1线)”项目场地抗浮设计,为雄安新区重大工程建设项目的抗浮安全设计提供了示范。

京津冀地区生态系统服务功能重要性及空间分布

【研究目的】京津冀高质量协同发展需要对重点生态功能区进行科学的识别、划分和加以保护,进一步提升生态系统质量和稳定性。【研究方法】基于“双评价”指南和《生态保护红线划定指南》,本文以京津冀为研究区,采用层次分析法从水源涵养、水土保持、生物多样性、防风固沙四个方面开展生态系统服务功能重要性评价,综合评价结果将生态系统服务功能重要性分为极重要、重要和一般重要3个等级,进一步分析京津冀生态系统服务功能重要性及其空间分布特征。【研究结果】结果表明:(1)研究区水源涵养、水土保持、生物多样性、防风固沙重要性评价面积从一般重要到极重要呈递减分布。其中水源涵养服务功能极重要区面积占比13.72%;水土保持功能极重要区面积占比15.20%。生物多样性维护功能极重要区面积占比25.33%;防风固沙功能极重要区面积占比11.32%。(2)研究区生态系统服务功能重要性基本呈现北高、南低的空间分布特征,面积从一般重要到极重要呈递减分布。生态系统服务功能极重要区面积为34617.76 km^(2),约总面积的16.03%。(3)生态系统服务功能极重要区内林地、草地和少部分的耕地占主要部分,面积占比分别为68.74%、16.74%和10.86%。表明极重要区内植被覆盖度较高,人类活动少。【结论】研究区生态系统服务功能重要性空间分布相对不均匀,整体以一般重要区为主;此外,森林、草地等植被为维持研究区生态系统的稳定及其服务功能发挥着重要作用。

雄安新区地下空间资源开发利用地质适宜性评价

雄安新区开发作为千年大计、国家大事,地下空间资源的开发利用可促进新区高质量建设与可持续发展。通过层次分析法,建立了雄安新区地下空间资源开发利用地质适宜性评价指标体系,对雄安新区浅层、次深层、深层地下空间地质适宜性进行了评价。研究结果表明,雄安新区地下空间资源开发利用的地质适宜性评价指标可划分为五大类10个指标,主要影响指标为含水砂层、地面沉降、液化砂土、水土腐蚀性等;按浅层、次深层和深层将评价结果划分为适宜区、一般区和敏感区,其中适宜区和一般区总面积约占新区面积的80%,说明雄安新区地下空间资源开发利用地质适宜性整体较好。该评价结果为雄安新区高质量建设及可持续发展提供了可靠的技术支撑。

教师标准化病人结合病例教学及循证医学在妇科肿瘤临床见习中的应用

目的:观察TSP结合CBL及循证医学教学法在妇产科技能教学中的有效性及可行性。方法:选取我校临床专业103名学生,分为试验组和对照组。试验组采用TSP结合CBL及循证医学教学法教学,对照组采用传统方法教学。对两组采用问卷调查和考试相结合的方法进行教学效果评价。结果:主观上,调查问卷显示,试验组在提高学习兴趣、提高沟通能力、提高理论知识的综合应用能力、锻炼临床思维、提高综合运用知识解决临床问题能力、提高自学能力和学习积极性、加深授课内容的记忆、提高动手能力和临床技能、掌握更深更广妇科肿瘤知识方面的成效均高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。客观上,试验组技能操作考试成绩高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义;试验组病例分析成绩稍高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TSP结合CBL及循证医学教学法在一定程度上能提高妇科肿瘤临床见习学生的理论知识及实践能力,但仍需加大样本量进行深入探讨。

雄安新区地下空间利用地质安全风险评价

地质环境是地下空间的承载体,明显制约地下空间开发利用。识别地下空间利用的地质安全风险及其主要影响要素可为地下空间合理规划、地下空间设施安全保障提供科学依据。以雄安新区为例,从空间、资源、环境、灾害4个层面,分析了不同类型地质安全风险隐患,遴选含水砂层厚度、土体承载力特征值、土体压缩模量、地面高程、地下水位埋深、地面沉降速率和砂土液化指数等定量指标,构建指标体系进行地质安全风险评价。针对现有评价方法在客观赋权方面存在的不足,在考虑数据相关性、离散性和相对性(冲突性)的基础上,引入基于指标相关性的指标权重确定法(criteria importance through intercriteria correlation,CRITIC),提出了CRITIC-Entropy组合确权法,使得赋权更为科学与合理。研究结果表明,雄安新区地下空间地质安全风险呈现出深部层位小于浅部层位的特征,且Ⅰ级和Ⅱ级风险区主要位于白洋淀及周边、南张镇东和大营镇东等区域,浅层(0~15 m)、次浅层(15~30 m)、次深层(30~50 m)、深层(50~100 m)地下空间Ⅰ级和Ⅱ级风险区累计面积占比分别为54.49%、42.51%、41.06%和42.18%。不同层位地下空间地质安全风险的主要影响要素有所差异,总体来说,土体压缩模量、土体承载力特征值、地面高程和地下水位埋深影响权重较高。同时,需要关注地面沉降、地下水位动态演变和不同施工方式引起的风险变化。成果可为雄安新区地下空间利用规划科学优化和防灾减灾提供地学依据,也可为其他地区相关研究提供借鉴。

piR-hsa-130912促进上皮性卵巢癌细胞增殖、侵袭与迁移及其作用机制

目的探讨piR-hsa-130912对上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)细胞增殖、侵袭及迁移的调控作用及其分子机制。方法通过对EOC组织进行BGISEQ UMI Small RNA测序以及RT-qPCR检测,鉴定出piR-hsa-130912。用LV-piR-hsa-130912-up、piR-hsa-130912-inhibitor及相应阴性对照慢病毒感染EOC细胞A2780和SKOV3以干扰piR-hsa-130912表达水平,采用CCK-8、平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Transwell侵袭、迁移实验及划痕实验检测细胞的侵袭及迁移能力,Western blot检测肿瘤转移相关蛋白zeb-1、E-cadherin以及vimentin的表达水平。结合RNA测序、GSEA分析、KEGG及GO分析初步探索piR-hsa-130912调控EOC细胞增殖、侵袭及迁移的作用机制。结果BGISEQ UMI Small RNA测序和RT-qPCR验证结果显示,piR-hsa-130912在EOC组织中高表达。与相应阴性对照组比较,过表达piR-hsa-130912可增强A2780和SKOV3细胞的增殖、侵袭及迁移能力(均P<0.05),促进A2780细胞中zeb-1及vimentin的蛋白表达(P=0.020,0.017)并抑制E-cadherin的表达(P<0.001);抑制piR-hsa-130912表达可导致A2780和SKOV3细胞的增殖、侵袭及迁移能力减弱(均P<0.05),促进SKOV3细胞中E-cadherin的表达(P=0.005)并抑制vimentin的表达(P=0.015)。piR-hsa-130912可能参与花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、MAPK等癌症相关信号通路以及受体酪氨酸激酶信号传导途径的调节。结论piR-hsa-130912可促进EOC细胞增殖、侵袭及迁移,其作用机制可能与脂质代谢、MAPK等癌症相关信号通路的调节相关。

基于神经网络模型的富硒特色农作物产区预测——以河北省张北县为例

【研究目的】近年来,富硒产业迅速发展,但因土壤硒含量与农作物籽实硒含量并没有显著的正相关关系,依据土壤硒含量进行富硒农产品种植区划具有一定的不确定性。因此,如何通过建立农产品富硒模型预测富硒农产品产出区,进行合理规划是急需解决的科学问题。【研究方法】本文以河北省张北县农作物、土壤为研究对象,在测试土壤pH、有机碳、SiO_(2)、Al_(2)O_(3)、CaO、MgO、Fe_(2)O_(3)、K_(2)O、Na_(2)O、Se等指标和搜集1/25万多目标区域地球化学数据的基础上,研究了农作物吸收硒的影响因素,建立了基于神经网络的农作物硒含量预测模型,进行富硒特色农作物产出区的预测。【研究结果】张北县表层土壤中仅有2.31%的点位达到了富硒土壤标准,主要分布在三号乡北部地区。满足富硒标准的莜麦有6件,富硒率为16.67%,亚麻有7件,富硒率为21.86%。亚麻、莜麦对硒的富集能力与土壤中的有机碳、Al_(2)O_(3)、Fe_(2)O_(3)含量呈负相关关系,与pH值呈正相关关系。据此,通过机器学习构建了亚麻、莜麦籽实硒含量预测模型,结果较为可靠。富硒亚麻、莜麦的可能产区主要分布在张北、小二台、台路沟、油娄沟、郝家营等乡镇,产出区面积分别为2486 km^(2)和2406 km^(2)。【结论】通过农作物富硒预测模型圈定的富硒作物产区面积远大于富硒土壤面积,对张北县发展富硒农业具有十分重要的意义。

雄安新区起步区地下空间资源开发利用地质适宜性及资源量评价

【研究目的】雄安新区作为千年大计、国家大事,开发利用地下空间资源可有效缓解“环境污染、资源短缺、交通拥堵”等“大城市病”问题,促进新区高质量发展。【研究方法】本文以雄安新区起步区为研究对象,通过层次分析法,分析了影响研究区地下空间资源开发利用的地质因素,建立了地下空间资源开发利用地质环境适宜性评价指标体系,评价了地下空间开发利用地质适宜性,并估算了地下空间可利用资源量。【研究结果】研究结果表明,研究区地下空间开发利用地质适宜性评价指标可划分为4大类10个指标,主要影响指标为含水砂层、地面沉降、液化砂土、水土腐蚀性等;按浅层、次深层和深层将评价结果划分为适宜区、一般区和敏感区,适宜区和一般区总面积约占起步区面积80%以上,资源量整体较好。【结论】该评价结果为起步区地下空间资源开发利用提供了参考,为起步区高质量建设及可持续发展提供了可靠的技术支撑;同时,地下空间资源开发利用具有不可逆性,易受地质环境因素影响,其开发利用必须因地制宜、合理规划、科学布局。

基于层次分析法的城镇建设适宜性评价——以京津冀为例

【研究目的】京津冀是工业化、城镇化高度聚集的世界级城市群。长期以来,京津冀地区人地关系矛盾突出,国土空间开发格局与资源环境空间布局匹配程度相对较低,需要科学全面的评价城镇建设适宜性和识别未来适宜城镇建设的潜力空间,以期为城镇开发边界划定、城镇用地集约节约高效利用提供科学依据和决策支持。【研究方法】本文基于“双评价”指南建立京津冀地区城镇建设适宜性评价指标体系,利用层次分析-加权平均综合指数法对该地区的城镇建设适宜性进行了评价。在此基础上,结合土地“三调”数据,按照优先生态保护、稳定耕地数量的原则,依次从城镇建设适宜区中扣除生态保护极重要区,自然保护地,现状湿地、城镇和基础设施建设用地、特殊用地等,识别未来适宜城镇建设的潜力空间。【研究结果】京津冀城镇建设适宜区面积123027.2 km^(2),占全区陆地面积的56.98%,一般适宜区面积45773.43 km^(2),占21.20%,不适宜区面积4850.16 km^(2),占2.25%,城镇建设适宜区潜力规模为4676.30 km^(2),河北张家口市和承德市城镇建设用地建设潜力较大,其次为保定市、唐山市和秦皇岛市。【结论】北京东部、天津西部、保定东南部、沧州南部-衡水东、邯郸东部地下水严重超采且存在地面沉降问题,建议结合地下水禁(限)采,有条件时适度优化调整土地利用方式。活动断裂带通过地段可能直接影响城市、交通等重大工程规划建设及运行安全,建议加强活动断裂带调查评价,采取避让活动断层或提高相应抗震设防等级等措施。

振动超微粉碎对毛竹笋干物化特性的影响

为研究毛竹笋粉碎后作为食品辅料的可行性,该研究以毛竹笋干为原料,通过高频振动超微粉碎处理,研究振动超微粉碎技术对毛竹笋干物理化学特性的影响,为竹笋超微粉的应用提供理论参考。结果表明:毛竹笋干粗粉经振动研磨30、60 min后可获得平均粒径约为18.67和10.35μm的超微粉,所得超微粉色泽更均匀,更白亮;2种超微粉的休止角和滑角均变大,松装密度由0.372 g/mL减小到0.273和0.255 g/mL,振实密度无显著变化,压缩度增大近1倍;2种超微粉的持水力、持油力有不同程度减小,溶胀度减小,但溶胀速度大幅增加,平均粒径10.35μm的超微粉粉在15 min时溶胀度可达3.63 mL/g,而平均粒径为298μm的竹笋粗粉仅0.97 mL/g。

基于粒子群优化KFCM的风电齿轮箱故障诊断

针对基于有监督学习的方法无法识别未知类别故障,提出了一种基于粒子群优化模糊核聚类(kernel fuzzy c-means clustering,简称KFCM)的风电机组齿轮箱故障诊断方法。首先,建立以训练样本分类错误率为目标的聚类模型,利用KFCM对训练样本进行分类;然后,以初始聚类中心和核函数参数作为优化变量,利用粒子群优化算法求解聚类模型,获得最优分类结果下每个类的类心;最后,根据新样本与各类心之间的核空间样本相似度判断新样本属于已知故障或者未知故障。以某风电机组齿轮箱为例,对提出方法的有效性进行试验验证。结果表明,与传统基于有监督学习的神经网络方法相比,该方法能有效诊断已知和未知类别的故障。

发酵法制备竹笋下脚料膳食纤维的研究

通过利用根霉菌发酵过程中消耗糖类和蛋白质的作用,从竹笋下脚料中制备纯度高、品质佳的膳食纤维。正交试验结果表明,原料粉20目,液料比1∶15(g/mL),34℃下发酵32 h可获得品质较好的竹笋膳食纤维,得率达到54.53%,总膳食纤维含量54.2%。与传统化学法相比,微生物发酵法具有原料损失少、得率和可溶性膳食纤维含量高的优点,制备的膳食纤维持油力相近,持水力和溶胀度显著提高。品质测定结果表明,发酵法制备的膳食纤维食用性和功能活性较高,并且保持了竹笋本身特有的风味。根霉发酵条件温和,工艺简单,易于放大,是一种高效制备毛竹笋下脚料膳食纤维的方法。

结合C-均值聚类的自适应共振神经网络在风电机组齿轮箱故障诊断中的应用

提出了一种结合C-均值聚类的自适应共振(Adaptive Resonance Theory 2,ART2)神经网络无监督学习分类方法,用于风电机组齿轮箱设备群的故障诊断.利用某风电场齿轮箱运行数据,采用ART2神经网络对样本数据进行初步分类,再采用C-均值聚类算法对神经网络分类结果进行修正,得到最终诊断结果,并与ART2神经网络分类结果进行了比较.结果表明:所提出的方法解决了原始神经网络算法存在"硬竞争"导致分类精度下降的问题,准确度高于传统的ART2神经网络,可以准确识别出故障齿轮箱.

卵巢上皮性癌手术加铂类药物联合化疗疗效的相关临床病理因素分析

目的:探讨影响卵巢上皮性癌手术加铂类药物联合化疗疗效的相关临床病理因素。方法:回顾性分析534例初治行手术加铂类药物联合化疗的卵巢上皮性癌患者,并随访预后。用Logrank test检验及Cox模型作临床病理相关因素分析。结果:1手术病理分期Ⅰ、Ⅱ期患者的中位总生存期(OS)及中位无进展生存期(PFS)高于Ⅲ、Ⅳ期,Ⅲ期患者的中位OS及中位PFS高于Ⅳ期(P<0.05)。2组织学分级高分化癌患者中位OS及中位PFS均高于中、低分化患者(P<0.01)。3达理想肿瘤细胞减灭患者中位OS及中位PFS显著高于肿瘤细胞减灭不理想患者(P<0.01)。4不管是否达到理想减瘤,大网膜切除者中位OS及中位PFS高于大网膜未切除者(P<0.05)。5达到理想减瘤患者中,腹膜后淋巴结未转移者中位OS及中位PFS高于淋巴结转移者(P<0.01),肠管受累未切除者中位OS及中位PFS高于肠管切除者(P<0.05),横膈未受累患者的中位OS及中位PFS高于横膈受累者(P<0.05)。6化疗方案TC及TP有相似的疗效,但两组化疗方案的中位OS及中位PFS均高于PC化疗组,化疗疗程<6次组其中位OS及中位PFS低于化疗疗程≥6次组,差异均有统计学意义(P<0.05)。7经Cox模型多因素分析,手术病理分期、组织学分级、肿瘤细胞减瘤理想程度、大网膜切除是影响手术疗效的独立因素(P<0.01)。结论:影响卵巢上皮性癌患者手术加铂类药物联合化疗预后决定于组织学分级、手术病理分期、大网膜切除、肿瘤细胞减瘤理想程度。在大的诊治原则下,根据患者的具体病情尽量做到个体化治疗。

风电机组齿轮箱故障分类方法研究

风电机组齿轮箱的运行工况复杂多变,很难获取大量的所有已知故障的样本数据,为了能够实现在无已知样本数据条件下的故障分类,提出了一种基于ART2神经网络和C-均值聚类算法的风电机组齿轮箱故障分类方法。首先利用ART2无监督神经网络实现样本数据的初步分类,再利用C-均值聚类算法对分类结果进行修正,克服了由于原始神经网络算法存在"硬竞争"导致分类精度下降的问题。分析结果表明提出的方法具有更高的分类准确度,能够对健康和不同故障类型的风电机组齿轮箱进行准确分类识别。

蔗渣/LiCl/DMAc溶液体系及其纤维素接枝聚丙烯酰胺的制备

为了发展利用植物生物质资源,采用将蔗渣溶于LiCl/DMAc体系并利用溶解于其中的物质与丙烯酰胺进行均相接枝反应以制备蔗渣接枝聚丙烯酰胺。结果表明蔗渣在160℃活化1h,烘干后与100g/L的LiCl/DMAc体系以固液比1∶50混合,然后在160℃加热4h的条件下可以取得81.3%的溶解率。溶液中不但含有纤维素,而且含有半纤维素和木质素。该溶液在30℃、N2环境且丙烯酰胺分两次投料的条件下进行共聚的接枝率达到62.86%。进一步的实验表明蔗渣接枝物的主要成分是纤维素-g-聚丙烯酰胺。这为植物生物质的高值化利用提供了新的途径。

沉默二氢叶酸还原酶基因对卵巢癌细胞体外生物学行为的影响

背景与目的:二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)在卵巢上皮癌铂类耐药细胞中高表达。该研究旨在探讨DHFR基因沉默对卵巢癌细胞体外生物学行为的影响,为卵巢癌铂类耐药的治疗奠定基础。方法:设计DHFR基因靶向的发夹状si RNA,筛选出最佳si RNA沉默片段,构建携带有目的基因的慢病毒载体细胞即转染组(DHFR-p GCSIL-SKOV3细胞)及阴性对照组细胞(p GCSIL-SKOV3细胞)。采用流式细胞仪检测3组细胞在不同的顺铂质量浓度(2.5、5.0、10.0和20.0μg/m L)下不同时间段(24、48及72 h)的凋亡情况以及IC_50顺铂质量浓度(4.4μg/m L)的周期变化;采用高效液相色谱法检测不同顺铂质量浓度(2.5、5.0和7.5μg/m L)不同时间段(24和48 h)药物作用后3组细胞内的顺铂浓度。采用透射电镜观察IC_50顺铂质量浓度(4.4μg/m L)3种细胞的超微结构变化。结果:将退火后的双链寡核苷酸片段连接到p GCSIL/GFP载体,测序结果正确。转染SKOV3细胞后,蛋白[质]印迹法(Western blot)鉴定干扰效果。在给药24、48和72 h后,DHFR-p GCSIL-SKOV3、p GCSIL-SKOV3及SKOV3三组细胞的凋亡率随着顺铂质量浓度(2.5、5.0、10.0和20.0μg/m L)的上升而升高,DHFR-p GCSIL-SKOV3细胞给药48和72 h后的凋亡率明显高于p GCSIL-SKOV3及SKOV3细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。3组细胞在IC_50顺铂质量浓度(4.4μg/m L)给药24和48 h后,转染组G_0/G_1期细胞比例较阴性及空白对照组明显增多,G_2/M、S期则反之;而给药72 h后,3组细胞以G_2/M及S期为主,转染组低于阴性及空白对照组。采用高效液相法检测细胞内顺铂质量浓度时,转染组在2.5和5.0μg/m L顺铂质量浓度给药24和48 h后,其细胞内顺铂浓度均明显高于对照组。转染组在7.5μg/m L顺铂质量浓度给药24 h后,其细胞内顺铂浓度均明显低于对照组细胞,在48 h后却又高于对照组,差异有统计学意义(P=0.034,P=0.014)。未给药时,转染组细胞的微丝明显多于对照组,线粒体亦改变明显。IC_50(4.4μg/m L)给药24和48 h后3组细胞均未见微丝;而给药72 h后微丝明显增多,且排列紊乱。结论:成功构建携带DHFR基因的p GCSIL干扰慢病毒载体的卵巢癌细胞。通过对DHFR下调后耐药性能研究得知,DHFR的下调与经过铂类药物作用的体外卵巢癌细胞的药物耐药性有一定的联系,卵巢癌细胞中下调DHFR基因可以考虑作为多药耐药的逆转机制。

卵巢癌组织中二氢叶酸还原酶基因的表达及其临床意义

目的:探讨卵巢癌组织中二氢叶酸还原酶基因(dinhydrofolate reductase,DHFR)的表达及其临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR法检测80例卵巢癌组织、50例良性卵巢组织及30例正常卵巢组织中的DHFR mRNA表达情况,分析其与卵巢癌临床病理及多药耐药的相关性。结果:1)DHFR mRNA在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中表达量分别为0.584±0.234、0.895±0.783和0.197±0.412,经比较差异有统计学意义(P<0.001,P=0.027,p<0.001)。2)卵巢癌组织中DHFR mRNA表达量与患者临床分期及病理分级差异无统计学意义(P>0.05),但在上皮性癌中浆液性癌组织中DHFRmRNA表达量则明显高于黏液性和内膜样癌,经比较差异有统计学意义(P<0.001)。3)卵巢癌组织中DHFR mRNA表达量与患者的腹水量、淋巴结转移和远处器官转移无明显相关(P>0.05),但大网膜转移者肿瘤组织中DHFR mRNA表达量则低于无转移者(P=0.044)。4)在卵巢癌患者中治疗后缓解者组织中DHFR mRNA表达量低于肿瘤进展者(P<0.001);而铂类药物敏感型患者肿瘤组织中DHFR mRNA表达量0.130±0.103也低于铂类药物耐药者0.341±0.701(P=0.011)。5)DHFRmRNA表达量判断卵巢肿瘤性质的ROC曲线Youden指数最大值所对应的数值为0.331,DHFR mRNA表达量>0331的患者中位生存时间为16.4个月,而≤0.331的患者中位生存时间为44.5个月,差异有统计学意义(P<0.001),且Cox模型多因素分析亦显示DHFR mRNA表达量为影响预后的独立因素(P=0.018)。结论:DHFR mRNA在正常和良性卵巢组织中表达量高于卵巢癌组织,提示DHFR参与正常组织细胞生理代谢,而在卵巢癌中DHFRmRNA在铂类耐药组织中表达较高,在铂类敏感组织表达低,提示DHFR与卵巢癌多药耐药相关。