氯化镉对不同倍性泥鳅鳍细胞系的毒性效应

旨在研究不同浓度氯化镉对60~80代二倍体和三倍体泥鳅鳍细胞系(DIMF和TRMF)的毒性效应,比较不同倍性细胞系间的敏感性差异。采用MTT比色法测定半致死浓度,采用酶活力测定法、微核试验和实时定量PCR法测定了氯化镉对2种细胞系的细胞毒性和遗传毒性。结果表明:氯化镉处理下DIMF、TRMF细胞系半致死浓度分别为(24.0±0.7)、(27.3±1.3)μmol/L。2种细胞系的SOD、GSH-Px活性随着氯化镉浓度的增加,呈现先升高后降低的趋势,而GST活性则表现为逐渐降低。随着氯化镉浓度的增加微核率先升高后降低,DIMF、TRMF最大微核率分别为(7.33±0.33)‰、(8.33±0.67)‰。经氯化镉处理的细胞金属硫蛋白(MT)表达量显著增加,30μmol/L浓度组表达量最大,分别为对照组的55.6和57.6倍。研究表明,氯化镉对泥鳅二倍体和三倍体细胞系具有细胞毒性和遗传毒性,且二倍体细胞系较三倍体细胞系对氯化镉更为敏感。

重金属对鱼类细胞系遗传损伤和基因表达的影响

细胞培养是指将有机体内的某一组织取出,使其分散成单个细胞,在人工条件下细胞存活、生长和分裂的技术。鱼类细胞培养始于二十世纪六十年代,由Wolf等~[1]建立了世界上第一个鱼类细胞系——虹鳟（Oncorhynchus mykiss）性腺细胞系RTG-2,目前已报道的鱼类细胞系超过280株。

红鳍东方鲀鳍细胞系的建立及生长特性研究

为研究红鳍东方鲀Takifugu rubripes鳍细胞系对该鱼病毒病诊断和治疗的影响,采用组织块培养法启动红鳍东方鲀鳍组织细胞的原代培养,用胰蛋白酶消化法进行传代培养,目前红鳍东方鲀鳍细胞传至40代,为成纤维细胞样细胞,原代培养和早期传代培养使用的培养基为添加了20%胎牛血清的DMEM/F12高糖培养基,添加的生长因子分别为终浓度为10 ng/m L的人碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、终浓度为20 ng/m L的Ⅰ型胰岛素样生长因子和终浓度为20μg/m L的硫酸软骨素,30代以后使用含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基,将细胞于25℃、5%CO2恒温培养箱中培养。结果表明:生长曲线显示,细胞在0～2d内处于潜伏期,2～4 d时进入对数期,4～5 d时进入平台期,5 d后开始转入衰退期;红鳍东方鲀鳍细胞系的倍增时间为50. 24 h;细胞经超低温保存60 d,解冻复苏后测定其存活率为80%;经微卫星位点扩增,凝胶电泳后的条带证实细胞系来源于红鳍东方鲀。研究表明,红鳍东方鲀鳍细胞系的建立丰富了鱼类细胞系的种类,也为红鳍东方鲀病毒病的研究及疫苗制备等提供了数据资料。

铜、锌对泥鳅细胞DNA损伤及金属硫蛋白表达的影响

采用0、100、200、400、800μmol/L的硫酸铜和0、200、400、800、1600μmol/L的氯化锌分别处理泥鳅鳍细胞系,培养24 h后,用单细胞凝胶电泳检测其DNA损伤情况,同时对金属硫蛋白基因的表达进行研究。试验结果表明,随着两种重金属浓度的增加,泥鳅鳍细胞的DNA损伤程度呈现明显的剂量依赖性。当硫酸铜浓度≥200μmol/L、氯化锌浓度≥400μmol/L时,细胞的拖尾率、彗尾DNA比例、彗星尾长、彗星尾距和Olive尾矩均显著增大(P<0.05)。泥鳅细胞金属硫蛋白基因的表达量随着硫酸铜浓度的升高呈现出短暂稳定后显著下降的趋势,而随着氯化锌浓度的增大呈现出显著上升再显著下降的趋势,表明氯化锌浓度≤400μmol/L时可显著诱导泥鳅鳍细胞系金属硫蛋白的转录表达。综合来看,与锌相比,泥鳅鳍细胞对铜的解毒能力和耐受力更差。因此,铜污染对泥鳅细胞的遗传毒性更加明显。本研究将为探讨重金属对生物的毒性效应及生物学监测提供理论依据。

皱纹盘鲍精子的激活及超低温保存研究

用不同浓度的氨海水激活解剖获得的皱纹盘鲍精子并进行激活率和受精率的测定.以自然海水作基础溶液,以二甲基亚砜(DMSO)和甘油(Gly)做保护剂,在不同降温程序下,将解剖获得和经诱导自然排放的皱纹盘鲍精子置于液氮罐中保存24 h,解冻后检测精子的成活率.结果表明,加入自然海水后有64.27%的解剖精子被激活,但不能受精,经氨海水处理后的精子在0.02‰浓度条件下激活率和受精率最高,分别为85.60%、67.42%.自然排放和解剖获得的精子在14%DMSO、4℃平衡15 min,-20℃时平衡5min,-80℃时平衡5 min条件下精子存活率最高,分别为48.15%和64.01%.

常见有机磷农药对鱼类养殖危害的研究进展

近年来,随着有机磷农药(OP)的不断使用,其残留大量进入水体中,严重污染了水质,而农业生产上常用的马拉硫磷、敌百虫、草甘膦、久效磷、乐果和敌敌畏等几种有机磷农药对水产养殖的发展产生威胁,尤其是对鱼类养殖的危害很大。鱼类对水质的变化非常敏感,水中污染物达到或超过一定浓度时,就会引起鱼类中毒反应,造成鱼类行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变,甚至死亡。本文简单概括有机磷农药在鱼类方面的研究进展,为鱼类养殖过程中水质监测及合理使用渔药方面提供借鉴。

CuSO4对松江鲈肾细胞系的毒性效应

本文研究了不同浓度的CuSO_4对55-65代松江鲈肾细胞系的毒性效应。采用MTT法测得CuSO_424 h LC_(50)为154.34μmol/L。酶活力测定的结果显示:超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活性在CuSO_4浓度为0~300μmol/L时,随浓度的升高逐渐升高,在300μmol/L时达到最大值;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性在CuSO_4浓度为100μmol/L时达到最大值,随后随着CuSO_4浓度的降低逐渐降低。微核率随CuSO_4浓度增加而增加,最高达14.33‰,彗星实验发现在半致死浓度条件下松江鲈肾细胞拖尾率为54.00%、迁移长度18.41±2.94μm,与对照组差异显著(p<0.05)。认为CuSO_4会引起细胞氧化酶活性的改变以及细胞核DNA损伤。松江鲈肾细胞系可以作为Cu2+污染的监测指标。

文化自信建设研究

党的十九大报告指出,文化是国家、民族的灵魂;文化兴盛关乎民族的复兴,这深刻表明文化自信的建设对当代中国的社会发展有着至关重要的作用。本文从中华民族光辉灿烂的文明历史和辉煌的当代成就两个维度,论述了我们民族文化自信确立的渊源;从建设中国特色社会主义文化,统筹四个自信统一建设和对抗外来文化的侵袭三个方面提出对当前时代中华民族文化自信建设的意见;试图对文化自信的体系性建设做出有益探索,本文的主要创新之处在于把对抗外来文化的侵袭过程纳入文化自信的路径建设中。