肿瘤相关巨噬细胞来源IL-6通过上调肿瘤细胞中LIF表达对口腔鳞状细胞癌Cal27细胞侵袭和迁移的促进作用

目的:探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)来源的白细胞介素6(IL-6)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)Cal27细胞中白血病抑制因子(LIF)表达及侵袭和迁移的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养人OSCC Cal27细胞和小鼠腹腔巨噬细胞(Raw264.7细胞)。Raw264.7细胞分为对照组和实验组,对照组细胞用普通培养基孵育,实验组细胞用Cal27细胞上清液孵育得到TAMs,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测2组细胞中IL-6 mRNA表达水平及IL-6水平。Cal27细胞分为对照组和实验组(5μg·L^(-1) Tocilizumab),对照组直接加入TAMs上清液,实验组提前用IL-6受体(IL-6R)抑制剂Tocilizumab干预后加入TAMs上清液,Transwell小室实验检测2组Cal27细胞迁移和侵袭能力,细胞划痕实验检测2组Cal27细胞划痕愈合率,RT-qPCR法和Western blotting法检测2组Cal27细胞中LIF mRNA及蛋白表达水平。结果:RT-qPCR法和ELISA法检测,与对照组Raw264.7细胞比较,实验组TAMs中IL-6 mRNA表达水平和IL-6水平明显升高(P<0.01)。Transwell小室实验,与对照组比较,实验组Cal27细胞迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组比较,实验组Cal27细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01)。RT-qPCR法和Western blotting法检测,与对照组比较,实验组Cal27细胞中LIF mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:TAMs来源的IL-6通过上调肿瘤细胞中LIF表达进而促进OSCC Cal27细胞的侵袭和迁移。

口腔鳞状细胞癌发病机制及药物干预的研究进展

口腔鳞状细胞癌(OSCC)是一种好发于颌面部皮肤及口腔黏膜的上皮恶性肿瘤,其发生是多种致病因素导致基因突变的结果,但发病机制尚未完全阐明。p16、p53、c-erbB-2、Bmi-1基因的突变与OSCC的发生和发展密切相关。传统中草药提取物汉黄芩素、姜黄素、甘草查尔酮及免疫抑制药物雷帕霉素对OSCC具有一定的抑制作用。本文对OSCC的发病机制及药物干预进行概述,为OSCC的研究和临床治疗提供一定的理论基础。

循环游离DNA在头颈鳞状细胞癌中的研究进展

近年来,循环游离DNA(cell free DNA,cfDNA)的液体活检已成为诊断癌症的辅助手段。由于该手段具有无创、快速等优点,它在头颈鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)诊断、治疗后监测及耐药性检测等方面的作用日益突出。本文对cfDNA的生物特性、提取与检测、在HNSCC中的临床应用,以及在HNSCC中发生、发展的作用进行综述,以期为相关科学研究和临床治疗提供思路。

姜黄素对肿瘤相关巨噬细胞分泌细胞因子基因表达的影响

目的:研究姜黄素对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞(Cal27细胞)上清液诱导的肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)分泌细胞因子基因表达的影响,阐明姜黄素抗OSCC的作用机制。方法:将Raw264.7细胞随机分为对照组及不同浓度(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00和40.00μmol·L^-1)姜黄素组,各组细胞加入Cal27细胞上清液共同孵育48 h,CCK-8法检测细胞活性。将Raw264.7细胞随机分为对照组及不同浓度(5、10和20μmol·L^-1)姜黄素组,各组细胞加入Cal27细胞上清液共同孵育36和48 h后,采用Real-time PCR法检测各组细胞中白细胞介素12(IL-12)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)mRNA表达水平;Cal27细胞上清液孵育Raw264.7细胞48 h后,姜黄素组加入不同浓度(5、10和20μmol·L^-1)姜黄素干预48 h,采用Real-time PCR法检测各组细胞中IL-12、iNOS、TNF-α、IL-10和精氨酸酶1(Arg-1)mRNA表达水平。结果:与对照组比较,40μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞活性明显降低(P<0.01)。不同浓度姜黄素与Cal27细胞上清液共同孵育Raw264.7细胞36 h,与对照组比较,20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平明显升高(P<0.01),10和20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS和TNF-αmRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),20μmol·L^-1组Raw264.7细胞中IL-10 mRNA表达水平降低(P<0.01);不同浓度姜黄素与Cal27细胞上清液共同孵育Raw264.7细胞48 h,与对照组比较,5和20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平明显升高(P<0.01),5和20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS、TNF-α和IL-10 mRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。Cal27细胞上清液孵育Raw264.7细胞48 h后,采用不同浓度姜黄素进行干预,与对照组比较,10和20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-12 mRNA表达水平升高(P<0.01),不同浓度姜黄素组Raw264.7细胞中iNOS、TNF-α和Arg-1 mRNA表达水平降低(P<0.05或P<0.01),20μmol·L^-1姜黄素组Raw264.7细胞中IL-10 mRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:姜黄素可以在诱导TAMs的不同阶段调节TAMs分泌细胞因子IL-12、iNOS、TNF-α、IL-10和Arg-1 mRNA表达水平。

靶向沉默热休克蛋白27对口腔鳞状细胞癌CAL27细胞侵袭和迁移的作用及其机制

目的:探讨热休克蛋白27(HSP27)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)CAL27细胞侵袭和迁移的影响,并阐明其作用机制。方法:CAL27细胞分为对照组[转染阴性对照小干扰RNA(NC-siRNA)]和实验组[转染HSP27小干扰RNA(HSP27-siRNA)],实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测2组CAL27细胞siRNA干扰效率,细胞划痕实验检测2组CAL27细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测2组CAL27细胞侵袭和迁移细胞数,RT-qPCR和Western blotting法检测2组CAL27细胞中上皮-间质转化(EMT)标记物N-钙黏蛋白(N-cadherin)mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组比较,实验组CLA27细胞中HSP27 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组比较,实验组CAL27细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01)。Transwell小室实验,与对照组比较,实验组CAL27细胞中迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。与对照组比较,实验组CAL27细胞中N-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:靶向沉默HSP27可以导致OSCC CAL27细胞迁移和侵袭能力降低,可能与抑制EMT有关。

双硫仑对肿瘤相关巨噬细胞分泌细胞因子基因表达的影响

目的研究双硫仑(DSF)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)肿瘤细胞上清液诱导肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)分泌的细胞因子基因表达的影响。方法将RAW264.7细胞随机分为对照组和研究组,研究使用两种诱导方法,第一种诱导方式为对照组用CAL27肿瘤细胞上清诱导RAW264.7细胞48 h,研究组在CAL27肿瘤细胞上清液诱导RAW264.7细胞的同时加入DSF/葡萄糖酸铜(DSF/Cu)2μmol/L干预48 h;第二种诱导方式为对照组用CAL27肿瘤细胞上清诱导RAW264.7细胞48 h后,继续诱导48 h,研究组CAL27肿瘤细胞上清诱导RAW264.7细胞48 h后,用DSF/Cu 2μmol/L干预48 h。检测两种诱导方式下,一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、精氨酸酶1(Arg-1)、IL-10的基因表达情况。结果诱导过程中加入DSF/Cu,研究组iNOS mRNA水平高于对照组,Arg-1 mRNA水平低于对照组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。两组IL-12、TNF-α、IL-10 mRNA水平,差异无统计学意义(P>0.05)。诱导48 h后加入DSF/Cu,研究组iNOS mRNA、IL-12 mRNA、TNF-αmRNA、IL-10 mRNA水平高于对照组,Arg-1 mRNA水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论DSF可调节TAMs分泌细胞因子的基因表达,有助于进一步阐明DSF抗OSCC的作用机制,可能为将来口腔肿瘤的诊治提供实验依据和治疗策略。