盐酸曲美他嗪健康人中的药动学研究和生物等效性评价

目的:建立LC-MS方法测定盐酸曲美他嗪在健康人血浆中的浓度,并进行药物动力学研究和生物等效性评价。方法:18名男性健康受试者,随机分成2组,交叉口服受试制剂和参比制剂各20 mg,采用LC-MS法测定人血浆中曲美他嗪的浓度。结果:受试制剂与参比制剂的各主要药动学参数:t_(1/2)分别为(7.31±2.36)和(6.74±2.17)h,t_(max)分别为(2.1±0.9)和(1.8±0.6)h,C_(max)分别为(92.05±19.64)和(96.71±22.31)ng·ml^(-1),AUC_(0-24)分别为(691.24±171.82)和(706.31±189.60) ng·h·ml^(-1)。对两种制剂的参数C_(max)、AUC_(0-24)对数转换后先进行方差分析,再进行双单侧t检验。双单侧t检验结果表明上述两个参数生物等效,t_(max)经非参数法检验差异没有显著性意义(P>0.05),这表明两种制剂生物等效,相对生物利用度(101.5±26.7)%。结论:两种制剂具有生物等效。

卡泊芬净——一种新作用机制的抗真菌药

卡泊芬净是一种新作用机制的抗真菌药 ,通过非竞争性的抑制真菌细胞壁中的 β - (1 ,3) -D -葡聚糖合成酶 ,阻碍葡聚糖的合成 ,从而产生杀菌活性。主要介绍了卡泊芬净的作用机制、抗菌谱、药代动力学、药物的相互作用、给药方式和剂量、临床疗效以及不良反应。

比色法测定辣椒总碱凝胶剂中主药含量

目的 采用比色法测定辣椒总碱凝胶剂中辣椒总碱的含量。方法 将样品经NaOH(pH 12 5 )碱化后 ,加 0 9% 4 氨基安替比林溶液和 5 4 %铁氰化钾溶液 ,摇匀 ,在 2 5℃± 2℃的暗处放置 180min ,测定吸收度 ,测定波长为 4 70nm。结果 辣椒素在 70 32～ 2 11 0 μg·ml 1浓度范围内 ,r=0 9996 ,回收率为 98 94 % ,RSD为 1 4 %。结论 本法操作简便准确 ,可作为测定辣椒总碱制剂中辣椒总碱含量的方法。

单克隆抗体和Ig融合蛋白治疗银屑病的有效性和长期安全性

银屑病是一种慢性T细胞介导的炎性皮肤病,发病机理尚不完全清楚,目前所采用的化学药物的疗效也欠佳,本文综述了近年新研制的单克隆抗体、融合蛋白等生物制剂,它们由于疗效高,副作用少,有可能成为银屑病治疗的更好选择。

替硝唑片在健康人体的药代动力学和相对生物利用度

目的研究替硝唑片在健康人体的药代动力学和相对生物利用度。方法采用高效液相色谱法测定20名健康男性志愿者,随机交叉单剂量口服替硝唑片1g后血浆中的药物浓度,计算药代动力学参数和相对生物利用度,并进行生物等效性评价。结果受试和参比替硝唑片的t1/2分别为(13.98±1.55)h、(13.80±0.93)h,tmax分别为(2.1±1.0)h、(2.3±0.9)h,cmax分别为(18.60±2.27)mg·L-1、(18.47±3.14)mg·L-1,AUC0τ分别为(368.49±44.08)mg·L-1·h-1、(353.86±40.99)mg·L-1·h-1。受试制剂于参比制剂的人体相对生物利用度为104.9±13.4%。结论两种制剂的药代动力学参数相近,具有生物等效性。

人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体外模型中黑素小体转运的观察

目的:建立人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养的体外模型,并且在模型中观察黑素小体的转运。方法:分别培养人表皮黑素细胞和角质形成细胞,用二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记黑素细胞内黑素小体,然后将两种细胞共培养,并在倒置显微镜和共聚焦显微镜下观察共培养模型中黑素小体由黑素细胞向角质形成细胞的转运。结果:培养至第3天和第7天可在倒置显微镜下观察到黑素细胞与角质形成细胞共同存活,并通过树突发生联系,在共聚焦显微镜下可直接观察到黑素小体由黑素细胞向角质形成细胞的转运。结论:成功建立黑素细胞与角质形成细胞共培养的体外模型,并利用CFDA-SE标记,在共聚焦显微镜下直接观察到黑素向角质形成细胞的转运。

MAPKs对丹皮酚下调黑素合成的介导作用

目的研究丹皮酚抑制黑素合成的相关的信号转导途径。方法以B16F10黑素瘤细胞系为对象,用不同的有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径干预物和丹皮酚共同处理细胞,采用多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,氢氧化钠裂解法检测黑素含量,RT-PCR和Western blot检测酪氨酸酶的mRNA以及蛋白表达;并以Western blot法检测丹皮酚对不同MAPK途径关键激酶磷酸化蛋白表达的调节作用。结果在不同的MAPK信号途径抑制剂中,JNK1/2/3特异性抑制剂(SP600125)能够有效地拮抗丹皮酚对黑素合成的抑制作用,而且丹皮酚能够诱导磷酸化JNK/SAPK表达。结论JNK/SAPK途径参与了介导丹皮酚对黑素合成的抑制作用。

基于微管靶点的抗肿瘤药物研究进展

微管是存在于所有真核细胞中构成细胞骨架的重要组成成分,其能与其他的蛋白组装成纺锤体、中心粒和神经管等结构。微管在细胞生长、维持形态、细胞信号传导,尤其在有丝分裂过程中起到重要的作用。微管是新药发现的重要靶点。作用于微管的抗肿瘤药物是一类最有效的应用于临床的药物,该类药物抑制微管聚合、破坏微管动态不平衡性、破坏纺锤体、阻滞细胞周期,引起肿瘤细胞死亡。本文综述了以微管为靶点的抗肿瘤药物及其作用机制,并对以微管为靶点的肿瘤治疗药物的应用前景进行展望。

高效液相色谱法测定消银霜中丙酸氯倍他索的含量

目的 :建立消银霜中丙酸氯倍他索含量测定的高效液相色谱法。方法 :色谱柱为LichrospherC18柱 (5 μm ,4 .6mm×2 5 0mm) ;流动相 :甲醇 水 (80∶2 0 ) ;流速 :1.0mL·min-1;检测波长 :2 39nm。结果 :丙酸氯倍他索浓度在 19.94～ 99.6 8mg·L-1范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系 (r =0 .9998) ,平均回收率为 99.90 % ,日内和日间RSD分别为 0 .8% (n =6 )和1.9% (n =5 )。结论 :高效液相色谱法测定消银霜中丙酸氯倍他索的含量测定方法操作简单 ,结果准确 ,重复性好。

组织工程表皮与单核白血病细胞共培养的致敏性检测模型

背景:大量研究表明体外构建的组织工程皮肤可用于化学物质的刺激性检测。目的:构建组织工程表皮和单核白血病细胞共培养体外模型,并用致敏物初步验证。方法:利用人源性角质形成细胞构建组织工程表皮,和单核白血病细胞进行共培养,干预24h后,ELISA法检测空白对照组,溶剂对照组,二硝基氟苯处理组和十二烷基硫酸钠处理组培养液中白细胞介素1β的质量浓度,流式细胞术检测各组中单核白血病细胞表面标记物CD86和CD54的平均荧光强度。结果与结论:角质形成细胞气液界面培养14d后,苏木精-伊红染色结果显示构建的组织工程表皮含有8～10层细胞结构,泛角蛋白免疫组化染色阳性。二硝基氟苯处理组培养液中白细胞介素1β质量浓度,单核白血病细胞表面标记物CD86和CD54的平均荧光强度均高于溶剂对照组(P<0.05)。实验成功构建了组织工程表皮和单核白血病细胞共培养的致敏物检测模型。

HPLC法测定维甲酸搽剂中维甲酸的含量

目的采用HPLC法测定维甲酸搽剂中维甲酸的含量。方法色谱柱为C18;流动相甲醇60mmol·L1醋酸二乙胺(90∶10∶005);检测波长343nm。结果线性范围为5～40μg·ml1,平均回收率为994%,RSD为016%。结论本法简便、快捷、灵敏,可用于该制剂的质量检验。

复方维甲酸粘附剂的研制

目的 利用某些高分子材料能与口腔粘液相互作用 ,产生生物粘附的特性 ,将维甲酸和曲安奈德制成复方粘附剂 ,用于治疗口腔粘膜扁平苔癣。方法 采用溶剂分散法将脂溶性药物均匀地分散在亲水性胶浆中。结果 该粘附剂药物分散均匀 ,制剂稳定 ,有较强的粘附性 ,能协同药物发挥治疗作用。结论 该制剂是较理想的口腔用药剂型。

糠秕马拉色菌皮肤感染模型的构建

目的：构建糠秕马拉色菌的体外组织工程皮肤感染模型。方法：利用成纤维细胞及牛胶原混合液构建组织工程真皮,采用气液界面培养方法在组织工程真皮表面培养角质形成细胞和黑素细胞;糠秕马拉色菌悬液感染组织工程皮肤,在不同时间点,利用HE染色及PAS染色观察组织工程结构的改变及糠秕马拉色菌侵入深度的变化。结果：构建的组织工程皮肤结构紧密,分化层数达8~10层。随着糠秕马拉色菌感染时间的延长,组织工程皮肤的基本结构不被该菌破坏,芽生孢子密度随着时间延长而增加,对于组织工程皮肤的侵袭仅限于表皮浅层。结论：糠秕马拉色菌的组织工程皮肤感染模型可较好的代表糠秕马拉色菌在体感染情况,是马拉色菌相关疾病较好的体外研究工具。

单次口服非那雄胺片对血清胆红素水平的影响

目的 研究非那雄胺在中国健康志愿者使用中的安全性,为临床合理用药提供参考。方法 通过2项单次口服5mg非那雄胺受试制剂和参比制剂的随机、双交叉、2周期的生物等效性研究,共103名中国健康男性志愿者完成了空腹和高脂餐后试验,监测并记录实验室检查参数、生命体征和不良事件。结果 2项试验中,非那雄胺均耐受良好,没有发生严重不良反应。实验室检查异常的不良事件中,血清胆红素水平升高出现的频次最多,最长在10 d内恢复至正常。结论 非那雄胺是一种有效的、选择性的UGT1A4竞争性抑制剂,在血清胆红素的代谢中起关键作用。非那雄胺可能导致血清胆红素升高,建议临床用药时应注意与非那雄胺相关的血清胆红素升高风险。

利伐沙班片引起白细胞减少4例

利伐沙班为临床上常用的抗凝药物,查阅文献,其不良反应未见有白细胞减少。本院开展的一项利伐沙班片在中国成年健康受试者中的一项生物等效性研究中,出现4例不同程度的白细胞减少(空腹受试者A,女性,29岁。餐后受试者B,男,22岁;C,女,29岁;D,女,23岁),并且在停药后白细胞水平恢复正常。故在临床使用利伐沙班时,加强对白细胞的监测。

采用在体分时取样法研究2种咪喹莫特乳膏的裸鼠皮肤药动学行为

目的:采用裸鼠在体分时取样法比较国产和进口2种咪喹莫特乳膏的皮肤药动学行为。方法:分别在裸鼠相同面积的皮肤上涂抹2种乳膏各约0.03g(n=32)后,于0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h取皮制备匀浆,采用高效液相色谱法测定皮肤中的药物浓度,比较2种制剂的药动学参数并计算偏差以对该方法进行评价。结果:国产和进口乳膏的咪喹莫特cmax分别为(82.80±8.13)、(76.46±13.08)μg·g-1,tmax分别为(6.0±0.0)、(5.0±1.2)h,t1/2分别为(25.28±4.27)、(23.30±7.42)h,AUC0～24h分别为(992.27±226.55)、(1037.02±175.93)μg·h·g-1,二者比较均无统计学差异(P>0.05)。2种制剂cmax、tmax、AUC0～24h的RSD分别为9.8%、17.1%,0、24.0%,22.8%、17.0%。结论:2种乳膏的裸鼠皮肤药动学行为无显著性差异;主要药动学参数的RSD偏差较小,表明在体给药分时取样法能较好地反映药物在裸鼠体内的经皮代谢过程,适用于临床前外用药物的皮肤药动学筛选与评价研究。

不同处方工艺的复方醋酸地塞米松乳膏的裸鼠皮肤药动学行为比较

目的 利用裸鼠在体皮肤给药,比较3种不同处方工艺的醋酸地塞米松乳膏皮肤药动学行为,同时探讨裸鼠在体皮肤药动学方法的应用前景。方法 选择裸鼠背部皮肤在体涂复方醋酸地塞米松乳膏约0.025 g后,于0、0.25、0.75、1.75、3、5、8、12、24 h后去除残余药物,取皮,称重,甲醇匀浆沉淀蛋白,采用高效液相色谱-电喷雾离子质谱联用法（LC-ESI-MS）测定裸鼠皮肤中的醋酸地塞米松浓度,计算药动学参数,同时对三种乳膏裸鼠经皮吸收的行为进行评价。结果 该测定方法没有内源性物质干扰,醋酸地塞米松皮肤匀浆液浓度在0.052 4-5.24μg·mL^-1内,线性关系良好。3种浓度的回收率分别是95.97%、89.95%、91.72%,精密度的RSD均〈15%,样品的稳定性良好。经测定,处方中含二甲基亚砜（DMSO）能增加醋酸地塞米松的皮肤药动学参数AUC值,而乳膏粒度大、有结晶则减少醋酸地塞米松的皮肤药动学参数AUC值。结论 LC-ESIMS分析方法快速、灵敏、准确,回收率高,重现性好,检测限低,可成功的用于测定醋酸地塞米松在裸鼠皮肤中的浓度,较好地反映醋酸地塞米松在裸鼠皮肤中的经皮吸收行为,裸鼠在体给药分时取样法可用于临床前外用药物的皮肤药动学筛选与评价。

丹皮酚在体外对人黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素生成的影响

目的探讨丹皮酚对人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成的影响。方法培养人表皮黑素细胞及人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法测定细胞活力,采用酶学方法测定酪氨酸酶活性,475 nm比色法测定黑素含量。结果50,100和200μmol／L丹皮酚对于黑素细胞及共培养细胞酪氨酸酶活性及黑素生成均有较强的剂量相关性抑制作用,100及200μmol／L丹皮酚与对照组相比差异有统计学意义(P<0．01)。结论丹皮酚对于共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成有较强的剂量相关性抑制作用。

用HaCaT细胞和正常人黑素细胞构建组织工程皮肤

目的探索用人永生化表皮细胞（HaCaT）和黑素细胞复合鼠尾胶原凝胶支架构建组织工程皮肤的可行性。方法HaCaT细胞和黑素细胞与鼠尾胶原复合,经历液下和气液面共13 d的培养,苏木素-伊红（HE）染色观察不同培养阶段组织学形态变化,S-100免疫组化染色观察黑素细胞分布情况。结果随培养时间的延长,组织工程皮肤的细胞层数逐渐增加,结束时可达12-15层;同时,细胞层内发生黑素化,颜色逐渐加深,组织学结构可见黑素颗粒分布广泛,S-100免疫组化染色显示黑素细胞均匀分布于基底层。结论在鼠尾胶原凝胶支架表面用HaCaT细胞和黑素细胞可构建出组织工程皮肤,为探索基于组织工程皮肤的化合物光毒性检测奠定基础。

维A酸衍生物ECPIRM对维A酸核受体的影响及小鼠皮肤刺激反应

目的探讨维A酸衍生物ECPIRM对维A酸核受体的影响，评估ECPIRM对小鼠皮肤的红斑、脱屑等刺激反应。方法10μmol／LECPIRM和全反式维A酸（ATRA）作用于SCL-1细胞24h，用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测维A酸受体（RARa、RARD、RAR＇,／和RXRa）的蛋白和mRNA表达变化。用实时荧光定量PCR检测维A酸受体RAR激活通路的靶基因细胞色素P450家族成员26A1和他扎罗汀诱导基因1（TIG1）的mRNA表达变化。BALB／c小鼠剃毛后外涂ECPIRM凝胶，以等摩尔浓度的全反式维A酸乳膏为对照，观察小鼠皮肤刺激反应。结果ATRA作用后，RARa、RARD、RAR＂／的蛋白和mRNA表达明显增高，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。CYP26A1和TIGl的mRNA表达分别增加到25．49倍和3．88倍，差异有统计学意义（P〈0．01）。但ECPIRM作用后并不增加核受体RAR仪、RAR8、RAR＇y及RXRa的蛋白表达；RARa、RARp、RARγ的mRNA表达变化差异无统计学意义（P〉0．05）；RAR靶基因CYP26A1和TIGl的mRNA表达变化差异无统计学意义（P〉0．05）。BALB/c小鼠外用全反式维A酸乳膏后2d出现明显的红斑、脱屑反应，用药5d达高峰。而连续外用0．075％ECPIRM凝胶21d，小鼠一直未出现红斑、脱屑反应。结论ECPIRM不激活经典的维A酸受体通路，未出现ATRA样皮肤刺激反应。