基于p53/SLC7A11/GPX4信号轴探讨七叶内酯诱导小鼠乳腺癌4T1细胞铁死亡的作用机制

目的:探讨七叶内酯对小鼠乳腺癌4T1细胞铁死亡的影响及其作用机制。方法:对七叶内酯与p53、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)进行分子对接,并绘制Kaplan-Meier和time ROC曲线。将4T1细胞分为对照组、1/2 IC_(50)组、IC_(50)组、2 IC_(50)组、erastin组和卡培他滨组。采用CCK-8法观察4T1细胞活力情况,筛选药物干预浓度;电镜观察4T1细胞线粒体形态,评估线粒体损伤情况;试剂盒检测4T1细胞活性氧(ROS)、Fe2+、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和GPX4的水平;采用划痕和Transwell小室实验检测4T1细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测p53、SLC7A11、GPX4和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的表达水平。结果:与对照组相比,七叶内酯1/2 IC_(50)、IC_(50)和2 IC_(50)组细胞活力,GSH和GPX4表达水平,侵袭和迁移能力,以及SLC7A11和GPX4蛋白表达水平均降低,细胞线粒体变小,膜密度增高,嵴减少(P<0.05),Fe2+、ROS和MDA水平及p53和ACSL4蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:七叶内酯可促进4T1细胞铁死亡,其作用机制可能与p53/SLC7A11/GPX4信号通路相关。

潘敏求教授从“瘀、毒、虚”论治乳腺癌经验

潘敏求教授认为乳腺与肝、脾、肾及冲任二脉关系密切,"瘀"、"毒"、"虚"是乳腺癌的基本病机,"疏肝健脾、补肾益精、化瘀解毒"是治疗乳腺癌的主要治则,潘教授临床用药常扶正祛邪并用,中西结合综合治疗,在疏肝健脾的基础上,十分重视脾胃与肝肾之气,以自拟乳复方为基本方,随症加减,临床应用疗效满意。

肝复方联合榄香烯注射液介入治疗肝郁脾虚型中晚期原发性肝癌临床研究

目的观察肝复方联合榄香烯注射液经血管介入治疗肝郁脾虚型中晚期原发性肝癌的临床疗效及安全性。方法将60例肝郁脾虚型中晚期原发性肝癌患者随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组采用肝复方联合榄香烯注射液经血管介入治疗,对照组单行化疗栓塞治疗。4周为1个疗程,治疗2个疗程。观察比较两组治疗前后的中医临床症状、瘤体大小变化、生活质量及不良反应。结果治疗后两组瘤体疗效相当(P>0.05),但治疗组中医证候疗效、生活质量改善均优于对照组(P<0.05),且治疗组不良反应明显低于对照组(P<0.01)。结论肝复方联合榄香烯注射液介入治疗肝郁脾虚型中晚期原发性肝癌疗效确切,可改善患者临床症状、提高生活质量,安全可行,值得临床推广。

疏肝健脾解毒方对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响

目的研究中药疏肝健脾解毒方对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响。方法采用CCK8法检测药物干预12 h、24 h、48 h后对MCF-7细胞增殖的影响(分为空白对照组、阳性药物对照组及不同浓度中药组);采用流式细胞术检测药物干预36 h及48 h后对细胞晚期凋亡率的影响(分为空白对照组、中药组及阳性药物对照组)。结果中药组吸光度低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05),且随药物浓度增高,吸光度逐渐降低;12 h至24 h,随着作用时间延长,吸光度亦逐渐降低;24 h后较高浓度中药组吸光度与阳性对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,中药组细胞晚期凋亡率较高,差异有显著统计学意义(P<0.01),但中药组细胞凋亡率低于阳性对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论疏肝健脾解毒方对人乳腺癌细胞MCF-7增殖有一定的抑制作用,可能通过诱导细胞凋亡实现。

疏肝健脾解毒方对乳腺癌癌前病变肝郁证模型大鼠血清性激素水平的影响

目的研究疏肝健脾解毒方对乳腺癌癌前病变肝郁证模型大鼠血清性激素水平的影响。方法采用二甲基苯蒽灌胃及夹尾法制备乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型,随机分为模型组、疏肝健脾解毒方组、三苯氧胺组、小金丸组,同时设空白对照组,分别干预4周后采用放射免疫法检测血清雌二醇、孕酮、泌乳素、黄体生成素和卵泡刺激素含量。结果模型组血清雌二醇、孕酮、泌乳素、黄体生成素和卵泡刺激素水平均较空白对照组高,差异均有显著统计学意义(P<0.01);各用药组血清性激素水平低于模型组,差异均有显著统计学意义(P<0.01);疏肝健脾解毒方组雌二醇及黄体生成素水平低于对照药三苯氧胺组及小金丸组,差异均有统计学意义(P<0.05);疏肝健脾解毒方组血清孕酮、卵泡刺激素、泌乳素水平高于三苯氧胺组,低于小金丸组,孕酮水平间差异有统计学意义(P<0.01),卵泡刺激素、泌乳素水平水平间差异无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝健脾解毒方可有效降低乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型血清性激素水平。

疏肝健脾解毒方对乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型乳腺组织血管生成的影响

目的研究中药疏肝健脾解毒方对乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型乳腺组织微血管密度(microvesseldensity,MVD)、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)及乳腺组织结构的影响,探讨其防治乳腺癌的作用机制。方法采用二甲基苯蒽灌胃及夹尾法制备乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型,随机分为模型组(蒸馏水)、中药组(疏肝健脾解毒方10.35g/kg)、三苯氧胺组(2.0mg/kg),另取10只为空白对照组,分别相应干预4周后,制备乳腺组织石蜡切片进行病理学观察,采用免疫组织化学方法及Western-blot法检测各组大鼠乳腺组织中MVD及VEGF表达情况。结果免疫组化结果显示,与模型组比较,中药组及三苯氧胺组乳腺组织非典型增生现象减少,乳腺组织MVD及VEGF水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),中药组MVD及VEGF水平稍低于三苯氧胺组,差异无统计学意义(P>0.05);Western-blot结果显示:与模型组比较,中药组及三苯氧胺组乳腺组织非典型增生现象减少,乳腺组织MVD及VEGF水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),中药组MVD及VEGF水平与三苯氧胺组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论中药疏肝健脾解毒方可在一定程度上降低乳腺癌癌前病变乳腺组织非典型增生倾向,其机制可能与降低VEGF水平、抑制新生血管生成有关。

肺复方配合化疗治疗老年中晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的:观察补气益肺类中药治疗老年中晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法:采用肺复方(白参、黄芪、枸杞、女贞子、川贝、麦冬、桔梗、黄芩、百合、莪术、田三七粉、白花蛇舌草等)治疗本病30例,并设对照组观察临床证候、生活质量及瘤体变化等。结果:治疗后治疗组临床证候、生活质量明显改善,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者在瘤体稳定方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本方法对本病有补气养阴,活血散结的功效,可缓解老年中晚期肺癌患者的主要临床症状,改善生活质量,稳定瘤体。

养阴清解法则辨证治疗中晚期原发性非小细胞肺癌的临床和实验研究

目的主要观察养阴清解法则治疗肺癌的临床疗效。方法采用单盲随机对照方法,对符合纳入标准的原发性非小细胞肺癌80例,分为治疗组(养阴清解法则组成的"肺复方组")与对照组(化瘀清解法则组成的"化瘀方组")各40例进行对照研究,1个月为1个疗程,连续治疗2个疗程,观察并随访记录两组临床症状,瘤体疗效、疾病进展时间,中位生存期,生存率及生活质量、体质量等变化情况,并进行抑瘤作用和提高免疫功能作用的动物实验研究。结果临床研究瘤体有效率(CR+PR)治疗组15.00%,明显高于对照组7.50%(P<0.05),瘤体稳定率(CR+PR+SD)治疗组87.50%,明显高于对照组67.50%(P<0.05)。疾病进展时间(TTP)治疗组6.6个月,对照组5.4个月。中位生存期(MST)治疗组13.6个月,对照组11.4个月;1、2年生存率治疗组分别为77.50%、55.00%,高于对照组60.00%、40.00%(P<0.05);临床症状总有效率,治疗组87.50%高于对照组67.00%,(P<0.05);同时生活质量改善、体质量改善,治疗组均优于对照组(P<0.05)。实验研究:养阴清解法则对Lius肺癌的抑瘤率为34.8%,对S180实体瘤抑瘤率30.5%,均优于化瘀清解法则(分别为20.7%、17.7%)(P<0.05)。养阴清解法则对EAC(艾氏腹水瘤)和H22(肝癌)的抑制作用优于化瘀清解法则(P<0.05)。对免疫功能影响:养阴清解法则对小鼠IL-2(白细胞介素-2)活性、迟发型超敏反应、网状内皮系统吞噬功能和血清溶血素形成均有明显作用,其作用强度均高于化瘀清解法则(P<0.05)。结论养阴清解法则(该法则组成的"肺复方")具有益气养阴、清热解毒之功,作为基本法则治疗肺癌,十分切合肺癌的病因病机,其改善肺癌患者临床症状,提高生活质量,抑制、稳定瘤体,提高机体免疫功能,延缓疾病进展及延长生存期的作用均得到临床和实验的证实,提示养阴清解法则及该法则组成的肺复方是治疗肺癌的有效治则和方药。

老年性肺癌与非老年性肺癌的临床疗效分析

目的：对比分析老年性肺癌与非老年性肺癌的临床治疗效果。方法：收集2003-2006年我院收治住院确诊的肺癌患者63例。其中老年组32例，非老年组31例。化疗加肺复方治疗6周后用统计学方法对其进行疗效及生活质量评价分析。结果：瘤体疗效老年组部分缓解率、稳定率分别为15．63％，68．75％；非老年组分别为19．35％，62．50％，两组比较，差异无统计学意义。证候疗效老年组总有效率为68．75％，非老年组总有效率为77．42％，差异无统计学意义（P〉0．05）。两组自身前后对照，症状积分差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论：肺复方有健脾益气、化瘀软坚、解毒抗癌的功效，肺复方加化疗治疗肺癌能够明显改善患者的临床症状。

养阴清解法则与化瘀清解法则对照治疗非小细胞肺癌的临床研究

目的:主要对照观察养阴清解法则与化瘀清解法则治疗肺癌的临床疗效。方法采用单盲随机对照方法,对符合纳入标准的原发性非小细胞肺癌80例,分为治疗组(养阴清解法则组成的'肺复方组')与对照组(化瘀清解法则组成的'化瘀方组')各40例进行对照研究,1个月为1疗程,连续治疗2疗程,观察并随访记录两组临床症状,瘤体疗效、疾病进展时间,中位生存期,生存率及生活质量、体重等变化情况。结果临床研究瘤体有效率(CR+PR)治疗组15.00%,明显高于对照组7.50%(P<0.05),瘤体稳定率(CR+PR+SD)治疗组87.50%,明显高于对照组67.50%(P<0.05)。疾病进展时间(TTP)治疗组6.6月,对照组5.4月。中位生存期(MST)治疗组13.6月,对照组11.4月;1年、2年生存率治疗组分别为77.50%、55.00%,高于对照组60.00%、40.00%,(P<0.05);临床症状总有效率,治疗组87.50%高于对照组67.00%,(P<0.05);同时生活质量改善、体重改善,治疗组均优于对照组(P<0.05)。结论养阴清解法则(该法则组成的'肺复方')具有益气养阴、清热解毒之功,作为基本法则治疗肺癌,十分切合肺癌的病因病机,具有改善肺癌患者临床症状,提高生活质量,抑制、稳定瘤体,提高机体免疫功能,延缓疾病进展,延长生存期的作用均优于化瘀清解法则。提示养阴清解法则及该法则组成的肺复方是治疗肺癌的有效治则和方药。

国医大师潘敏求治乳腺癌经验方

潘敏求,第四届国医大师,湖南省中医药研究院附属医院主任医师、教授。现精选潘敏求教授治疗乳腺癌的经验方,以飨读者。乳腺癌属中医学“乳岩”“乳石痈”等范畴。潘敏求认为中医药治疗应尽早规范介人。基于“瘀、毒、虚”这一乳腺癌的基本病机,潘敏求制订“疏肝健脾、补肾益精、化瘀解毒”为乳腺癌的基本治则。

疏肝健脾解毒方对乳腺癌癌前病变防治作用机制研究

目的通过动物实验研究疏肝健脾解毒方对乳腺癌癌前病变的作用机制。方法取SD大鼠,分为6组(每组10只):空白组、乳腺癌癌前病变模型组、他莫昔芬组和疏肝健脾解毒方低、中、高剂量组。采用二甲基苯蒽造模法对乳腺癌癌前病变大鼠模型造模。采用HE染色观察各组乳腺组织病理变化,流式细胞仪检测CD4^(+)、CD8^(+)含量;ELISA检测IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、E2、P含量。Western blotting检测ER、PI3K、p-Akt及mTOR的蛋白表达。结果HE染色显示大鼠乳腺组织发生改变,提示造模成功。与空白组比较,模型组外周血中CD4^(+)含量降低,CD8^(+)含量升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,疏肝健脾解毒方低、中、高剂量组和他莫昔芬组CD4^(+)含量增加,CD8^(+)含量下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。与空白组比较,模型组IL-2、IL-4、IL-10浓度显著降低(P<0.01),IL-12、IL-6显著升高(P<0.01);与模型组比较,疏肝健脾解毒方低、中、高剂量组和他莫昔芬组IL-2、IL-4、IL-10浓度均显著升高(P<0.01),IL-12、IL-6显著下降(P<0.05或P<0.01)。与空白组比较,模型组E2和P含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,疏肝健脾解毒方低、中、高剂量组和他莫昔芬组E2和P含量均显著降低(P<0.01)。Western blotting检测结果表明,与空白组比较,模型组ER、PI3K、p-Akt及mTOR的表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,疏肝健脾解毒方低、中、高剂量组和他莫昔芬组ER、PI3K、p-Akt及mTOR的表达均显著下降(P<0.01)。结论疏肝健脾解毒方可能是通过使ER的表达下降,从而抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的表达,同时影响机体免疫应答来逆转大鼠乳腺癌变进程。

疏肝健脾解毒方对乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型乳腺组织性激素受体和脏器系数的影响

目的研究中药疏肝健脾解毒方对乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型乳腺组织中性激素受体和子宫、卵巢系数的影响,探讨其防治乳腺癌的作用机制。方法采用二甲基苯蒽灌胃及夹尾法制备乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型,随机分为模型组、中药组、三苯氧胺组,分别用药4周后分别采用免疫组织化学方法及Western blot法检测大鼠乳腺组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达情况,并剪取各大鼠子宫及卵巢,称取重量,计各组子宫及卵巢系数。结果免疫组化结果:与空白对照组比较,模型组ER、PR水平均较高,而大鼠体重降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而三苯氧胺组及中药组较低,差异均有统计学意义(P<0.05);三苯氧胺组及中药组ER、PR水平低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);中药组ER水平稍低于三苯氧胺组,PR水平稍高于三苯氧胺组,但差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测结果:与空白对照组比较,模型组ER、PR水平较高,差异均有统计学意义(P<0.05);三苯氧胺组及中药组ER、PR水平低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);中药组ER水平稍高于三苯氧胺组,PR水平稍低于三苯氧胺组,但差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,模型组子宫、卵巢系数均较高,而大鼠体重降低,差异有统计学意义(P<0.05);三苯氧胺组及中药组子宫、卵巢系数低于模型组,大鼠体重高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);中药组大鼠体重稍高于三苯氧胺组,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝健脾解毒方可有效降低乳腺癌癌前病变肝郁证大鼠模型乳腺组织ER、PR水平,提高模型大鼠体重,降低其子宫系数及卵巢系数。

疏肝健脾益肾方减轻乳腺癌术后内分泌治疗不良反应40例总结

目的:观察疏肝健脾益肾方减轻乳腺癌术后内分泌治疗不良反应的临床疗效。方法:将80例乳腺癌术后并类围绝经期综合征患者随机分为治疗组与对照组各40例。对照组应用内分泌药加楂麦汤治疗,治疗组应用内分泌药加疏肝健脾解毒方治疗,疗程均为3个月。比较2组治疗前后Kupperman症状评分及卡氏评分,评定临床疗效。结果:总有效率治疗组为85.0%,对照组为7.50%,组间比较,差异有统计学意义(P<0.01);治疗后治疗组Kupperman症状评分及卡氏评分均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:疏肝健脾益肾方对减轻乳腺癌术后内分泌治疗不良反应有较好疗效。

疏肝健脾解毒方治疗乳腺增生症40例疗效观察

目的:观察疏肝健脾解毒方治疗乳腺增生症的临床疗效。方法:将80例乳腺增生症患者随机分为治疗组与对照组各40例。治疗组采用疏肝健脾解毒方治疗,对照组采用三苯氧胺治疗。结果:总有效率治疗组为80.0%,对照组为75.0%,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05);不良反应发生率治疗组为7.5%,对照组为35.0%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:疏肝健脾解毒方能有效治疗乳腺增生,且无明显毒副反应。

疏肝健脾解毒方含药血清对MDA-MB-231乳腺癌细胞凋亡及Bax、Bcl-2的影响

目的:研究疏肝健脾解毒方含药血清对MDA-MB-231三阴性乳腺癌(TNBC)细胞凋亡及相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达的影响。方法:给大鼠灌胃疏肝健脾解毒方制备含药血清,设置空白对照组、含药血清低剂量组、含药血清中剂量组、含药血清高剂量组及阳性对照组,以流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot测定Bcl-12、Bax蛋白表达量。结果:各给药组凋亡率及Bax、Bcl-12蛋白表达水平与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);含药血清低、中、高剂量组Bax、Bcl-2蛋白表达水平与阳性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:疏肝健脾解毒方对MDA-MB-231 TNBC细胞具有凋亡诱导作用,其机制可能与干预Bax、Bcl-2蛋白表达有关。

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨疏肝健脾解毒方含药血清对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:通过体外细胞实验研究疏肝健脾解毒方对三阴乳腺癌治疗的有效性和可能机制。方法:实验设置正常血清组、吡柔比星组和低、中、高剂量疏肝健脾解毒方含药血清组。将20只SD大鼠随机分成4组,按照体表面积换算分别予以16.8,8.2,4.05 g·kg^(-1)的疏肝健脾解毒方药液和等体积的生理盐水灌胃制备血清。取血清配置各组药液后,分别处理MDAMB-231细胞。利用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8),细胞划痕法和细胞侵袭实验(transwell)法检测其增殖、迁移和侵袭能力,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MDA-MB-231细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达水平。结果:与正常血清组比较,3种不同剂量的含药血清组和吡柔比星组均能抑制细胞的增殖(P<0.01),且中、高剂量含药血清组与吡柔比星组间差异无统计学意义。与正常血清组比较,3种不同剂量的含药血清组和吡柔比星组均能显著减缓划痕的愈合(P<0.01),但含药血清组较吡柔比星组弱(P<0.05,P<0.01)。与正常血清组比较,3种不同剂量的含药血清组和吡柔比星组均能减少侵入transwell小室下室的细胞数(P<0.01),且中、高剂量含药血清组与吡柔比星组间差异无统计学意义。Western blot结果显示,与正常血清组比较,经3种不同剂量的含药血清组和吡柔比星组处理48 h后,细胞中的PI3K,Akt和mTOR蛋白表达均降低(P<0.01)。结论:疏肝健脾解毒汤含药血清能抑制三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与下调PI3K/Akt/mTOR信号通路中的蛋白表达有关。