Prominin1在C57BL/6小鼠视网膜色素上皮中的表达

目的探究Prominin1在不同发育时期小鼠视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)的表达。方法孕鼠和出生后的Prom1cre/ERT2+/Gt(ROSA)26SorCAG-Zs Green1+转基因小鼠,腹腔注射他莫昔芬,将视网膜组织冰冻切片后,采用激光共聚焦显微镜检测Prominin1在转基因小鼠RPE中的表达;利用荧光定量PCR和免疫荧光技术检测Prominin1在野生型小鼠不同发育时期RPE中的表达。结果对13.5 d(E13.5)、15.5 d(E15.5)和出生后1 d(P1)小鼠的研究结果显示:Prominin1可能在胎鼠的部分RPE表达,出生后小鼠不表达。定量PCR显示:Prominin1在胎鼠RPE(E10.5、E13.5、E15.5和E17.5)表达明显高于出生后(P1和P14)(P<0.01);在胚胎时期,Prominin1在E13.5和E15.5的RPE表达明显高于其他时期(P<0.05或P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,Prominin1在E10.5、E13.5、E15.5和E17.5的RPE表达,而在P1不表达。结论 Prominin1在胎鼠视网膜色素上皮中表达,在E13.5和E15.5的胎鼠中尤为明显。

组织器官透明化技术在三维成像研究中的应用

随着显微成像技术的发展和大数据采集处理系统的不断革新,生物组织成像分析由二维组织切片成像发展到组织器官的三维成像技术。但是,由于组织器官的不透明导致的光线散射,使成像的深度成为一大难题。近年来,组织器官透明化技术取得了很大的发展,该技术通过提高组织的透明度,大大加深了成像深度,从而使得对组织器官的三维成像分析在不需要进行组织切片的情况下得以实现。根据透明化试剂亲水性不同,可将其分为脂溶性透明化技术和水溶性透明化技术,前者减少了组织中的水分,使透明化更加彻底有效;而后者则利用水分子在蛋白分子周围形成的水化膜提高了荧光蛋白稳定性,更利于研究的进行。我们将按照分类对不同透明化技术作出介绍,并从透明化时间长短、荧光保留度等方面进行优劣比较。

伴微乳头结构肺腺癌侵袭机制及诊治现状研究进展

自1950年起，肺癌患者的病死率开始逐年增加，至今肺癌已经成为癌症中最主要的致死癌种。其中，非小细胞肺癌（nonsmall—cell lungcancer，NSCLC）约占85％，成为多个国家十分常见的癌症类型，而其中肺腺癌更是多见。为了能有效地增加患者生存率，提高患者生存质量，人们开始对肺腺癌的发生发展及侵袭的相关机制进行了深入的研究。

脉冲电场对AC16人心室肌细胞的影响

目的研究脉冲电场对AC16人心室肌细胞的影响。方法利用人心室肌AC16细胞系,使用ECM830电穿孔仪,设置脉宽1 ms、频率2 Hz/5 Hz、电场强度100~2 000 V/cm梯度脉冲电场对细胞进行电穿孔。再通过台盼蓝染色、CCK-8观察细胞活力,得到不同参数脉冲电场对AC16细胞活力的影响。并通过AnnexinV&PI法染色利用流式细胞术观察刺激后凋亡/坏死情况。结果在脉宽1 ms、2 Hz的基础脉冲参数作用后,观察到AC16细胞暴露在高场强的脉冲电场中细胞肿胀、破裂,发生不可逆性死亡。电压阈值大于1 000 V/cm时细胞死亡率明显增加(对照组:2%,1 000 V/cm组:36.8%),细胞活力明显降低(对照组的29.9%~46.4%)。且一定程度内增加脉冲次数与增加频率不改变引起死亡的电压阈值。Annexin V-FITC与PI共染色通过流式细胞术发现1 000及以上的电场强度显著增加了AnnexinV的荧光强度,证实1 ms的脉冲电场通过凋亡途径导致细胞死亡。结论 AC16细胞对脉冲电场诱导的凋亡具有稳定而明确的阈值,细胞死亡与脉冲次数和频率无关。