幽门螺杆菌调控胃上皮细胞基因表达的机制

目的:在基因转录调节水平上研究幽门螺杆菌生物活性物质调控胃上皮细胞基因表达的机制。方法:人胃上皮癌细胞株SGC-7901采用常规方法培养,幽门螺杆菌菌株NCTC11637采用马血清琼脂培养基培养,收获后用超声粉碎法提取生物活性物质,基因转录采用报告基因方法分析。结果:幽门螺杆菌提取物使SRE反式激活的基因转录增加(P<0.01),而对CRE反式激活的基因转录没有明显影响(P>0.01)。结论:幽门螺杆菌生物活性物质通过顺式转录调控元件SRE调控细胞基因表达。

血小板源性生长因子-BB对大鼠血管平滑肌细胞表皮调节素表达的影响

目的:研究表皮调节素(epiregulin)在血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)促进大鼠血管平滑肌CS-54细胞株增殖中的作用。方法:针对大鼠表皮调节素基因的mRNA序列合成siRNA,采用脂质体转染法将其转染CS-54细胞;用蛋白质印迹检测PDGF-BB及siRNA转染对CS-54细胞表皮调节素蛋白表达的影响;用MTT法分析干扰表皮调节素表达对PDGF促进CS-54细胞增殖效应的影响。结果:PDGF-BB促进细胞增殖,效应具有浓度和时间依赖性,在50 ng/ml PDGF-BB作用24 h时其效果最为明显;PDGF-BB可以刺激CS-54细胞表皮调节素蛋白的表达;表皮调节素siRNA转染细胞,可使表皮调节素蛋白表达水平明显降低,并明显阻断PDGF-BB对CS-54细胞增殖的促进作用(P<0.05)。结论:PDGF-BB刺激CS-54细胞增殖的作用是通过诱导CS-54细胞表达表皮调节素蛋白实现的。

血小板源性生长因子-BB和cGMP依赖性蛋白激酶Iα对大鼠血管平滑肌细胞形态和骨架的影响(英文)

原代大鼠主动脉平滑肌细胞采用植块法培养。用编码cGMP依赖性蛋白激酶Iα基因的重组腺病毒(pAd-cGMP dependent protein kinase Iα,pAd-PKGIα)感染原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞和常规培养的大鼠肺动脉血管平滑肌细胞株CS-54,并用血小板源性生长因子-BB(plateletderivedgrowth factor-BB,PDGF-BB)作用细胞,研究PKGIα和PDGF-BB对形态学和细胞骨架的影响。倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光观察细胞应激纤维结构。结果表明PDG-BB不仅可以使CS-54细胞和原代大鼠主动脉平滑肌细胞的形态发生明显的变化,也使得细胞原有的应激纤维的数量减少,分布紊乱;pAd-PKGIα感染并经8-APT-cGMP刺激后应激纤维又可以重新恢复。这些结果证明PDGF-BB对大鼠血管平滑肌细胞株CS-54和原代大鼠主动脉平滑肌细胞形态和细胞骨架结构有影响,这些影响可以因PKGIα的表达和活性的增加而逆转。