硒对T-2毒素引起培养软骨细胞超微结构与功能改变的拮抗作用

当培养液中存在0.01ppmT-2毒素时,可引起离体培养鸡胚软骨细胞胞外基质胶原微原纤维和质膜P面膜内蛋白颗粒明显减少,线粒体内膜细胞色素c氧化酶活力和H^+-ATP酶活力及其对OIigomycin敏感性明显下降。在0.01ppmT-2毒素存在下,加入1ppm Na_2SeO_3到培养液中,则胶原微原纤维和质膜膜内蛋白颗粒的减少不再呈现,细胞色素c氧化酶活力和H^+-ATP酶活力及其对Oligomycin敏感性的下降幅度明显减小。这些结果表明硒能够显著的拮抗T-2毒素引起的软骨细胞超微结构和功能的改变。从亚细胞水平和分子水平为阐明缺硒是大骨节病发病的重要条件和硒在预防大骨节病中的作用机理提供了依据。

镰刀菌T-2毒素对培养软骨细胞的影响

在含有不同浓度 T-2 毒素培养液中离体培养鸡胚软骨细胞,当 T-2 浓度达到0.01ppm 时,可引起软骨细胞胞外基质胶原微原纤维减少,线粒体细胞色素 c 氧化酶和 H^+-ATP 酶的比活力下降.表明此浓度 T-2 毒素引起了软骨细胞结构与功能的明显改变.文章报道的方法可为检验大骨节病致病因子是否直接作用于大骨节病易侵蚀的软骨细胞提供了一种有效的实验手段.

竹红菌乙素作猝灭剂研究F_o构象方法的建立

线粒体Ｆ１Ｆｏ复合体Ｆｏ部分ａ亚基的色氨酸荧光可被竹红菌乙素（ｈｙｐｏｃｒｅｌｉｎＢ，ＨＢ）猝灭．不同温度下测定ＳｔｅｒｎＶｏｌｍｅｒ图的结果显示，猝灭常数（Ｋｓｖ）随温度的增加而加大，时间衰变荧光的结果显示，荧光寿命随ＨＢ浓度的增加而减小，加入不同浓度的ＨＢ，Ｆ１Ｆｏ复合体的吸收峰没有位移．这些实验结果支持动态猝灭机理．ＨＢ还具有有效猝灭浓度低，不影响酶的活力；在脂相和水相的分布比率可高达１６５６０∶１；实验操作简便等优点．因此ＨＢ可作为理想的疏水相荧光猝灭剂，研究与膜结合的Ｆ１Ｆｏ复合体中镶嵌于膜脂内Ｆｏ的构象变化．

乙醇对F_1-ATP酶和H^+-ATP酶的抑制与其核苷酸结合位点状态的关系

本文利用动力学方法研究了乙醇对F_1-ATP酶和H^(+)-ATP酶复合体的抑制与其结合核苷酸位点状态的关系,结果表明天然情况下乙醇对F_1呈现反竞争性抑制类型,对H^(+)-ATP酶呈现非竞争性抑制类型,且乙醇对F_1和H^(+)-ATP酶的抑制与核苷酸结合位点的构象密切相关。游离状态下和膜结合状态下的F_1在部分结合的核苷酸被洗脱前后动力学行为的不同,反映了二种状态下的F_1具有不同的构象,且F_0和膜脂对F_1起着一定的调控作用。

桂枝汤对胃H，K－ATP酶活力的影响及对消炎痛引起胃H，K－ATP酶抑制作用的保护

中药桂枝汤在整体水平上能极其显著的激活胃Ｈ，Ｋ－ＡＴＰ酶的活力，而离体水平上对该酶呈现明显抑制效应。消炎痛在整体和离体水平上均对胃Ｈ，Ｋ－ＡＴＰ酶呈现抑制作用。桂枝汤在整体水平上对消炎痛引起胃Ｈ，Ｋ－ＡＴＰ酶的抑制作用有保护效应。这些结果提示桂枝汤可能通过机体整体调节实现其提高胃Ｈ，Ｋ－ＡＴＰ酶活力作用的，从而在Ｈ，Ｋ－ＡＴＰ酶水平上初步阐述了中药桂枝汤调整胃功能的可能作用机理。而且也为扩充桂枝汤的应用范围提供了可能性。

超大分子F_1-ATP酶空间晶体生长预实验

ATP合成酶 (质子ATP酶 )是氧化磷酸化过程中催化ATP合成的关键酶。具有催化活性的F1 -ATP酶部分高分辨率三维结构的解析 ,对阐明氧化磷酸化的机理具有重要意义。作为三维结构研究的基础 ,获得高质量的蛋白晶体是必需的。为提高空间实验的成功率 ,在实验过程中 ,分别采用悬滴和坐滴气相扩散法进行F1 -ATP酶晶体生长。针对预定的空间蛋白质结晶实验的条件要求。本实验对原有的F1 提取、纯化及结晶条件的优化进行改进尝试 ,找到了可在 5d内长出单晶的条件 ,并达到较好的实验重复性。

乙醇能消除二环己基碳二亚胺对H^+-ATPase复合体的抑制效应

本文发现线粒体H^+-ATPase复合体先用0.5μg/ml的DCCD(二环己基碳二亚胺预保温处理,再经12.5%(V/V)乙醇进一步保温处理,则乙醇可完全消除DCCD引起的H^+-ATPase的抑制效应。若H^+-ATPase用DCCD和乙醇同时预保温处理,则DCCD同样消失其抑制作用。用相同浓度的甲醇代替乙醇,则仅可部分的消除DCCD的抑制作用。用相同浓度的DMSO(二甲基亚砜)代替乙醇,则不能消除DCCD的抑制作用。同样浓度的乙醇保温处理经预先用2μg/ml的寡霉素(Oligomycin)处理的H^+-ATPase,并不对寡霉素的抑制作用发生任何影响。表明此浓度的乙醇并未对H^+-ATPase产生解偶联效应。动力学研究表明乙醇对H^+-ATPase水解活力呈现非竞争抑制行为,推测乙醇可能导致H^+-ATPase中的F_1构象的改变,因而影响酶的活性。DPH标记的荧光偏振度,N-[1-P]M标记的荧光强度和内源荧光强度的测定结果显示,乙醇消除DCCD抑制作用的机理,是由于乙醇和DCCD所引起的构象间的相互作用的结果。

用ST-EPR研究胆酸对F_1-F_0在F_1-F_0复合体中慢运动的影响

本文比较了经胆酸处理和对照样品的马未酰亚胺自旋标记的F_1-F_0酶复合体的ST-EPR波谱, 二者波谱呈现明显不同的形态.经胆酸处理的复台体中F_h-F_0酶蛋白的波谱参数L”/L’,C’/C,H”/H较对照样品明显增大.选用参数L”/L’计算其相关时间τ_c,得出对照的F_1-F_0酶蛋白的τ_e为5.5×10^(-5)秒而经胆酸处理的F_1-F_0酶蛋白的τ_e为1×10^(-4)秒.表明胆酸处理的样品中酶蛋白运动大大减慢.因此推测胆酸可能通过增加F_1-F_0酶蛋白在膜脂中的旋转运动相关时间,减慢其运动速率,来抑制Mg^2+对F_1-F_0酶水解活力的激活作用的.

SeO_3^（2－）及SeO_3^（2－）和半胱氨酸或还原型谷胱甘肽联用对牛脑V

Ｓｅ_３^（２－）对牛脑Ｖ型质子转运ＡＴＰ酶复合体活力呈现明显的抑制作用。这种抑制作用具有对剂量和预保温时间的依赖关系，且不被稀释效应所恢复，但过量的ＤＴＴ可去除这种抑制作用。半胱氨酸对这种抑制作用呈双功能效应。低浓度时促进抑制作用，高浓度时部分恢复抑制作用。还原型谷胱甘肽与半胱氨酸有类似效应。但促进抑制作用没有半胱氨酸强，而恢复抑制作用却较半胱氨酸强。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影图谱表明，ＳｅＯ_３^（２－）和半脱氨酸优先结合在７０ｋＤ亚基上。并且验证了ＡＴＰ酶复合体的－ＳＨ基和ＳｅＯ_３^（２－）及半胱氨酸的－ＳＨ基以－Ｓ－Ｓｅ－Ｓ－键相连接。根据上述结果，讨论了７０ｋＤ亚基的－ＳＨ基及其相关的结构域涉及到ＡＴＰ酶的活性中心，７０ｋＤ亚基可能是ＡＴＰ酶复合体的水解活性亚基。

牛脑V型质子转运ATP酶复合体依赖于温度的活性变化

在ＫＣｌ介质中牛脑Ｖ－型质子转运ＡＴＰ酶复合体活力温度的Ａｒｒｈｅｎｉｕｓ图在３３℃附近呈现明显的折点，同样做其Ｎ－［１－芘］马来酰亚胺（Ｎ－［１－Ｐ］Ｍ）的荧光－温度的Ａｒｒｈｅｎｉｕｓ图，发现其折点温度也为３３℃，当加入１００μｍｏｌ／ＬＮＥＭ（Ｎ－ｅｔｈｙｌｍａｌｅｉｍｉｄｅ），ＡＴＰ酶复合体活力部分被抑制后的Ａｒｒｈｅｎｉｕｓ图折点下降为２７℃，加入０．７５－０．８５ｍｏｌ／Ｌ尿素则活力的Ａｒｒｈｅｎｉｕｓ图的折点变为３０℃。加入６％（Ｖ／Ｖ）的乙醇后，活力的Ａｒｒｈｅｎｉｕｓ图的折点上升为３８℃。加入ＮＥＭ，尿素和乙醇的内源荧光和Ｎ－［１－Ｐ］Ｍ标记的荧光测定，表明它们确实引起了牛脑Ｖ－型质子转运复合体构象的改变，这表明引起构象变化配基的加入，可改变牛脑Ｖ－型质子转运ＡＴＰ酶复合体的Ａｒｒｈｅｎｉｕｓ图折点温度，也说明牛脑Ｖ－型质子转运ＡＴＰ酶复合体Ａｒｒｈｅｎｉｕｓ图折点与酶复合体的构象直接相关。

镁离子对阿霉素线粒体毒性的防护作用

利用ＥＳＲ技术研究了阿霉素与心肌线粒体的相互作用及Ｍｇ２＋的防护作用。结果表明：在线粒体及亚线粒体体系，Ｍｇ２＋可有效地抑制阿霉素半醌自由基产生，在一定浓度范围内抑制效果依赖于Ｍｇ２＋的浓度。另外，Ｍｇ２＋显著抑制阿霉素诱导产生的线粒体脂质过氧化。在亚线粒体体系，我们观察到阿霉素半醌自由基的固定化信号，并发现Ｍｇ２＋能明显延缓固定化信号出现。

低硒与心肌线粒体膜的功能与超微结构关系的研究

动物实验结果表明半合成低硒饲料不足以引起心肌线粒体超微结构与内膜氧化磷酸化功能的明显变化;喂以克山病病区粮能引起心肌线粒体超微结构与能量转换功能明显的异常,但与克山病患者心肌线粒体损伤的程度比较尚有一定距离,病区粮补 Se 能明显减轻线粒体一系列的异常,这说明了克山病的形成低 Se 只是一个重要条件,尚有其它综合因素的参与,同时也在细胞分子水平上进一步肯定了 Se 对克山病的预防作用。

Mg^（2＋）对阿霉素引起心肌线粒体F_1F_0变化的保护

抗肿瘤药物阿霉素（ＡＤＭ）对心肌线粒体Ｆ１＿Ｆ＿０复合体呈现抑制而对Ｆ＿１－ＡＴＰａｓｅ无抑制，这表明ＡＤＭ可能是通过膜脂起作用的，适当浓度Ｍｇ￣（２＋）能降低ＡＤＭ对复合体的抑制。经￣（３１）Ｐ－ＮＭＲ和标记荧光探针ＮＢＤ－ＰＥ，ＤＰＨ，ＭＣ－５４０以及内源荧光等的测定，结果表明ＡＤＭ可能首先通过诱导Ｆ＿１Ｆ＿０膜脂形成非双层脂结构，继而影响了膜脂的堆积程度和流动性，进而引起Ｆ＿１Ｆ＿０复合体酶蛋白构象的改变，最终导致酶活力的降低。Ｍｇ￣（２＋）则可能由于与ＡＤＭ竞争与心磷脂的结合。

克山病病区粮低Se对大白鼠心肌线粒体Ca转运影响的研究

以低Ｓｅ克山病病区粮喂养大白鼠为动物模型，在细胞及亚细胞水平上进行了低Ｓｅ与Ｃａ转运关系的研究，同时测定了线粒体的能量转换功能。结果显示，低Ｓｅ病区粮组动物心肌线粒体Ｃａ转运呈现明显异常，但线粒体能量转换功能尚未发生明显改变。提示线粒体Ｃａ转运功能损伤先于线粒体能量转换功能损伤之前发生。心肌线粒体Ｃａ转运功能可作为更灵敏的指标用于克山病发病机理的研究。上述结果进一步表明克山病是一种“心肌线粒体病”。

无机磷和叠氮钠对线粒体F_1-ATPase构象的不同影响

用εＡＤＰ作荧光探针，用荧光猝灭的方法证明无机磷（Ｐｉ）能影响Ｆ１－ＡＴＰａｓｅ的构象从而使酶结合ＡＤＰ的能力降低．用ａｕｒｏｖｅｒｔｉｎＢ作荧光探针研究了Ｐｉ和叠氮钠对Ｆ１－ＡＴＰａｓｅ构象的影响，发现Ｐｉ能影响洗去催化位点核苷酸的Ｆ１的构象，而叠氮钠对其没有影响，但却能影响结合有ＡＤＰ的Ｆ１的构象．因此Ｐｉ和叠氮钠对酶构象的影响是不同的，二者可能有不同的作用位点．

H^＋—ATPase单位点水解过程中Fo构象的变化

利用Ｈ＋－ＡＴＰ酶复合体（也称ＡＴＰ合成酶）中的Ｆｏ的色氨酸荧光，观察了复合体中Ｆ１结合ＡＴＰ或ＡＤＰ（酶蛋白与底物分子比为１：１）时，Ｆｏ的荧光猝灭常数的变化（用竹红菌乙作为膜区蛋白荧光的猝灭剂）结果表明Ｆ１结合ＡＴＰ或ＡＤＰ时Ｆｏ可得到不同的猝灭常数（Ｋｓｖ），也就是Ｆｏ会产生不同的构象变化。加入二价金属离子起动ＡＴＰ水解反应结束后：ＡＴＰ＋Ｈ２Ｏ→ＡＤＰ＋Ｐｉ，这时可以在Ｆｏ观察到与ＡＤＰ加Ｍｇ２＋时相同猝灭常数Ｋｓｖ；用荧光强度随时间进程变化的实验可观察到Ｆ１水解过程中导致Ｆｏ构象变化的动力学过程。这些结果说明了Ｈ＋－ＡＴＰ酶复合体ＡＴＰ合成的过程中Ｆ１与Ｆｏ之间存在着构象之间的通信与传递。

消炎痛对猪胃H^+/K^+-ATP酶质子转运功能的抑制

作为猪胃H^+/K^+-ATPase的非竞争性抑制剂,消炎痛明显抑制H^+/K^+-ATPase泡囊的质子转运功能,造成质子泄漏。在0.15 mg/ml蛋白浓度下,4%的消炎痛结合于H^+/K^+-A- TPase泡囊上。它能渗入膜脂相并显著降低膜的流动性,并使H^+/K^+-ATPase内源荧光受到淬灭。从实验结果看来,消炎痛对猪胃H^+/K^+-ATPase质子转运功能的抑制来自对酶蛋白和膜结构影响两个方面,而非仅抑制酶蛋白本身的功能。

影响蓄电池寿命的主要因素

通信领域中蓄电池的选用和维护是确保通信设备运行稳定的重要方面。本文论述了通信用阀控式密封铅蓄电池组的寿命与原理和结构的关系,并着重对影响电池寿命的重要因素进行分析,提出延长蓄电池寿命的重要措施,确保通信电源系统的可靠性。

光纤在通信领域发展趋势的研究

光纤通信的诞生与发展是电信史上的一次重要革命。近几年来，随着技术的进步，电信管理体制的改革以及电信市场的逐步全面开放，光纤通信的发展又一次呈现了蓬勃发展的新局面，本文旨在对光纤通信领域的主要发展热点作一简述与展望。

消炎痛对猪胃H~＋／K~＋－ATP_（ase）抑制的动力学

消炎痛作为一种可引起胃粘膜急性病变的药物，用分离提纯的猪胃Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ证明，它可以显著的抑制此酶的活力，０．１ｍｇ／ｍＬ时即可抑制酶活力２７％，０．５ｍｇ／ｍＬ时可抑制全部活力，其Ｋ（０．５）为０．１８ｍｇ／ｍＬ。消炎痛对Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ的抑制随３０℃时预保温时间的延长而加剧，１０ｍｉｎ预保温可抑制总活力的５０％。消炎痛并不影响Ｈ＋／Ｋ＋－ＴＡＰａｓｅ的转换温度（３９℃）以及最适ｐＨ（约ｐＨ７．５），但酸性条件下消炎痛对Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ抑制比碱性条件下强烈。在我们的实验条件下，消炎痛对Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ的抑制与Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ量成正比，它不影响酶的Ｋｍ值（０．１１ｍｍｏｌ／Ｌ），而是显著降低Ｖｍａｘ，因而它是此酶的可逆性非竞争性抑制剂，其Ｋｉ为０．３２ｍｍｏｌ／Ｌ。