土壤和水体中PCP-Na残留的紫外线光度分析

待测样经蒸馏、乙醚萃取、氢氧化钠反萃取后,常见干扰物质均可以除去,PCP-Na溶液在波长320nm处有最大的吸收峰,其它酚类物质在该波长处不干扰测定。本法操作简便、快速、准确、经济,稳定性好。本法测定PCP-Na的回收率,在水中为100.74％,在土壤中为91.45％。

石灰性紫色土上桤柏混交林土壤微生物活性

测定了石灰性紫色土上几种人工林土壤的微生物活性,比较了人工林与无林荒地(对照)土壤微生物活性的差异,结果表明:桤柏混交林(混交比1∶1)土壤的微生物总数分别比桤木纯林和柏木纯林高20%、53%,其中底层(15～20cm)土壤的微生物总数分别高30%、15%;芽孢杆菌全数及其与静止细胞数之比高于柏木纯林,但低于桤木纯林;3种林型的好气性自生固氮菌和好气性纤维分解菌数量无明显差异;3种人工林土壤的微生物活性显著高于无林荒地土壤。这说明在四川石灰性紫色土区营造人工林时,采用桤柏混植,比种植单一树种的纯林会收到更好的生态效益。

紫色土硅酸盐细菌的表型特征及溶磷解钾能力

对 40株分离自四川、重庆等地的代表性紫色土中的硅酸盐细菌和 1株参照菌株进行了 5 2个表型性状的数值分析 ,探讨了硅酸盐细菌液体振荡培养后 pH值、菌数变化与溶磷、解钾量之间的关系 .结果表明 :紫色土硅酸盐细菌绝大部分属于胶胨样芽孢杆菌 (Bacillusmucilaginosus) ,但在个体和群体生长特征、碳氮源利用、硝酸盐还原能力、耐盐性和溶磷解钾等生理生化特性方面表现出明显的多样性 .经聚类分析 ,供试菌株在 80 %相似水平分成 4群 ;群I菌株在 86 %相似水平分为 2个亚群 .不同的硅酸盐细菌菌株的溶磷、解钾特性差异较大 ,具有溶磷解钾双重特性的菌株约占供试菌株 (含参考菌株 )的 2 2 % ,只具溶磷特性的约占 2 9% ,其溶磷效果较显著 (有效磷增加最高达 40 .6 4% ) ,而解钾效果不明显 (有效钾增加最多的只有 7.9% ) .供试紫色土硅酸盐细菌的溶磷、解钾特性与菌株生长过程中产酸有关 ,其溶磷、解钾量与培养液中pH值的降低呈正相关 .图 5表 3参 2

省葛藤属根瘤菌的遗传多样性研究

用AFLP、REP-PCR、23SrDNAPCR-RFLP等方法对分离自四川的23株葛藤属的根瘤菌的遗传特性进行了研究。结果表明,供试的葛藤根瘤菌遗传特性存在明显差异。AFLP分析结果显示,23个菌株分为7个AFLP遗传群;在BOXAIR-PCR分析中,23株根瘤菌则被分为5个遗传群;对23SrDNAPCR-RFLP分析表明,葛藤根瘤菌分属于中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)2个属,聚类分析结果将其划分为5个遗传群。分离自四川省的葛藤根瘤菌存在较大的遗传多样性。

华西雨屏区不同恢复阶段湿性常绿阔叶林的土壤微生物多样性

采用时空互代的方法，探讨了崇州市鞍子河自然保护区和邛崃市天台山的常绿阔叶林自然恢复过程中土壤微生物数量、组成、区系和多样性变化，结果表明：（1）不同恢复时期土壤微生物数量存在显著性差异，在植被恢复5～40a期间，土壤细菌和放线菌的数量呈增加趋势，以恢复到40a植被土壤微生物总数、细菌和放线菌的数量较高，分别为1．06×10^6CFUg^-1干土、9．81×10^5CFUg^-1干土和6．8×10^4CFUg^-1干土；真菌以100a次生林较高，为9．01×10^4CFUg^-1干土；植被恢复中细菌占土壤微生物总数的79．06％～93．78％；真菌和放线菌数量分别占4．61％～11．24％和0．52％～15．38％；（2）不同恢复阶段土壤细菌和真菌数量大体上以夏季高，春、秋季较低；放线菌数量为春、秋季较夏季高；（3）植被恢复过程中，土壤微生物群落区系和优势种群组成不同，经鉴定有细菌10个属、真菌7个属、放线菌9个属，细菌以无色细菌属（Achromobater）、棒状杆菌属（Corynebacterium）、短杆菌属（Brevibacterium）和芽孢杆菌属（Bacillus）出现的几率较高；真菌主要是半知菌类和接合菌类，以木霉属（Trichoderma）、腐霉属（Pythium）、青霉属（Penicillium）和犁头霉属（Absidia）分布较为普遍；放线菌9个类群中8个属于链霉菌属（Streptomyces），仅有1个类群属于小单孢菌属（Micromonospora），以白孢类群（Albosporus）、金色类群（Aureus）和灰红紫类群（Griseorubroviolaceus）出现几率为较高；（4）细菌属的Shannon—Wiener指数、Simpson指数以恢复初期、30a生次生林和较原始植被为较高。在植被恢复5～50a期间，真菌和放线菌属的多样性呈波动性增加趋势，到50a达到最高；50a以后，呈下降趋势，表明植被恢复的30～50a土壤环境更适合真菌和放线菌的生长。

从豆科植物的根瘤中直接提取根瘤菌DNA的方法

豆科植物的新鲜根瘤经表面灭菌、破碎后直接加入 2 0 0 μL 4mol/L异硫氰酸胍 (GUTC)裂解液混匀 ,离心去掉根瘤残留物 ,再加入适量RNA酶 ,37℃温育 30min后 ,加入 2 0 μL硅藻土吸附液 ,室温处理 1 5min离心去掉上清 ,沉淀经GUTC裂解液二次处理 ,再分别用洗涤液、 70 %酒精洗涤。最后 ,硅藻土沉淀经真空干燥 ,加入 2 0 μL超纯水洗涤硅藻土沉淀 ,即可获得类菌体根瘤菌DNA。所获得的DNA可以用于AFLP、 1 6SrRNAPCR反应。

硅酸盐细菌的研究进展

硅酸盐细菌能释放由硅酸盐组成的岩石矿物中的磷、钾、硅等元素, 直接供给植物生长利用, 同时亦具有固氮能力。这为挖掘土壤潜在肥力、发展可持续农业提供了诱人的前景。硅酸盐细菌的特殊生理功能与适应能力必然由特殊的基因所操纵,因而有重要的理论研究价值和巨大的开发潜力。本文从形态学、解钾机理、解钾效果、解钾条件、分类地位和实际应用等6个方面对国内外近几十年来硅酸盐细菌的研究概况作一综述,

四川省雅江松茸菌的分离与系统发育

对外生菌根真菌-松茸的纯培养条件进行了探讨,并从采集自四川省雅江县的松茸子实体中获得了10株松茸菌的纯培养物;分别以NS1和NS6 ,NS1和NS8,ITS4和ITS5为引物,对分离获得的松茸菌进行了18S r DNA PCR- RFL P和ITS PCR-RFL P分析,结果显示,用Alu I,H ae III,H inf I和Msp I四种限制性内切酶,这些松茸菌株的18S r DNA、ITS片段的酶切图谱完全相同;代表菌E7的ITS序列分析结果表明,本研究分离的松茸菌与Tricholoma matsutake的菌株在系统发育上高度同源。

我国主要花生品种的AFLP分析

对32个来源于中国不同产地的花生品种进行了AFLP指纹图谱及相似性聚类分析.结果表明:所有供试花 生品种的遗传相似性为35％,在45％的相似性水平处分为3个群,表明我国的花生品种存在遗传多态性.AFLP指纹图 谱分析技术能很好地反映出花生品种之间存在的遗传差异.

石灰性紫色土施铁肥与接种根瘤菌对花生-根瘤菌共生固氮作用的影响

以缺铁的石灰性紫色土为供试土壤进行盆栽实验,选用三株慢生型花生根瘤菌Spr3 5、Spr3 7、Spr4 5及gusA和celB标记的菌株gusA3 5、gusA3 7、gusA4 5、celB3 5、celB3 7、celB4 5接种天府9号花生。通过标记根瘤菌形成的根瘤能与检测试剂产生颜色反应的特征,检测施铁肥及施不同浓度的铁肥对花生 根瘤菌有效性和竞争性的影响。结果发现:缺铁的石灰性紫色土上单施铁肥、单接种根瘤菌、接种根瘤菌配施铁肥均能促进花生与根瘤菌的共生固氮效应和竞争结瘤能力,但接种根瘤菌配施铁肥的效果最好,单接种根瘤菌的效果次之,单施铁肥的效果差。喷施0 .2 %硫酸亚铁溶液的效果比0 .3%的好。植株全氮含量和叶绿素含量都是指示共生固氮效应的重要指标,与花生产量间存在极显著的相关性,相关系数分别为0 .76 3和0 .795。gusA和celB两种标记方法检测的结果基本一致,两种标记根瘤菌的平均占瘤率分别为79.6 4 %、75 .6 2 %、74 .4 1%。供试菌株中Spr4 5的有效性和竞争性最强,Spr3 7次之,Spr3

用AFLP技术检测慢生型花生根瘤菌竞争结瘤的研究

以 5株慢生型花生根瘤菌和天府 3号花生为材料 ,用 AFLP技术研究了慢生型花生根瘤菌 Spr2 - 9、Spr3- 3、Spr3- 5、Spr4- 5和 Spr7- 1的遗传特性和竞争结瘤能力。结果显示 ,供试条件下 ,传代次数对菌株的遗传性状无明显影响 ,2 8℃培养条件下 ,花生根瘤菌连续传 96代 ,其 AFLP指纹未发生明显变化 ;37℃培养 ,仅 Spr3- 3和 Spr3- 5能够存活并正常生长 ,其 AFLP指纹也未发生明显改变 ,然而其它菌株不能生长。将供试慢生型花生根瘤菌分别接种天府 3号花生 ,光照培养 30 d后 ,随机各取 4个根瘤 ,从根瘤中提取类菌体 DNA进行 AFLP分析 ,各根瘤类菌体 DNA的 AFLP指纹图谱与该菌株纯培养物 AFLP指纹相同。将 5个菌株混合接种天府 3号花生 ,不同菌株的占瘤率存在差异 ,Spr3- 3和 Spr3- 5的竞争结瘤能力最强 ,两菌株的占瘤率之和为 85.4% ;Spr4- 5的占瘤率为 1 2 .2 % ;Spr7- 1为 2 .4% ;而 Spr2 - 9的竞争结瘤能力最差。本试验结果说明 ,AFLP技术用于根瘤菌生态和竞争结瘤能力研究 ,具有下列优点 :简易、快速、准确 ;直接取豆科植物的根瘤提取 DNA,进行原位研究 ;在不改变菌株遗传特性 ,即不使用突变株的前提下 。

用发光酶基因(luxAB)标记法研究慢生花生根瘤菌的竞争结瘤能力

lux AB基因标记是一种新型基因标记技术 ,在很多研究领域都有着良好的应用前景。研究通过三亲本杂交将 lux AB基因成功地向慢生型花生根瘤菌进行了转移 ,并获得了一株带 Lux AB基因标记的菌株Cspr7- 1。对 Cspr7- 1进行性状、标记基因的遗传稳定性检测 ,结果表明 ,Lux AB基因不仅能有效表达 ,而且性状稳定。在无氮水培条件下进行标记菌株与土著根瘤菌的竞争结瘤试验。结果证实 ,Cspr7- 1在植物根系上的占瘤率平均达到 61 .3% ,比土著根瘤菌的竞争结瘤能力强 ,而且 Cspr7- 1在主根上的侵染能力远较侧根上的强 ,平均高出 2 2 .3%～ 39.6%。

用AFLP分析珍稀食用菌—松茸遗传特性的初步研究

采用 3对AFLP引物组合 ,研究了从四川省雅江县黄背高山栎林下采集的 10株松茸菌根菌基因组的遗传特性。结果表明 ,AFLP图谱能较好地反映测试菌株的遗传特性 ,10株供试菌间具有高度的遗传相似性 ;10株供试菌株全部在 90 %相似性处聚在一起 ;在 92 %相似性水平上被分为 3个群。AFLP扩增引物Eco + 1/Mse + 1、Eco +2 /Mse + 2及Eco + 3 /Mse + 3的最佳用量分别为 1pmol/ 5pmol、0 .6pmol/ 10pmol和 0 .1pmol/ 8pmol。

用AFLP技术研究花生根瘤菌的遗传多样性

采用ＡＦＬＰ分子标记技术，对分离自中国、津巴布韦、以色列的１３３ 株慢生花生根瘤菌（ Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｓｐ．ａｒａｃｈｉｓ）和１３ 个代表菌株（ Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ ． Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｅｌｋａｎｉｉ）的ＤＮＡ 扩增长度多态性进行了分析，并根据各供试菌株的遗传相似性进行了数值聚类。结果表明慢生花生根瘤菌群体内存在很高的遗传多样性，每个菌株的ＡＦＬＰ 带谱均与其它菌株完全不同。ＡＦＬＰ技术简便、快速、重现性极高，能表现高信息量的ＤＮＡ 长度多态性。

钼与花生根瘤菌的复配及在酸性紫色土上的接种效果

通过供试菌株Spr4-5、Spr2-9耐钼酸钠、钼酸铵试验表明,根瘤菌耐Mo能力强,耐钼酸铵能力比钼酸钠强,不同菌株耐钼能力不同。在研制的“高效根瘤菌+Mo”的复合菌肥中,用钼酸铵生产的复合菌肥比用钼酸钠的活菌数高,高活菌数持续的时间长;复合菌肥的pH一般随含钼量的增加和贮存时间的延长而升高,但复合钼酸铵菌肥pH增幅较小,复合钼酸钠菌肥pH增幅较大。在贮存的180d内,复合钼酸铵的菌肥活菌数和pH均符合《根瘤菌肥料》质量标准;钼酸钠对菌肥的活菌数和pH影响大,钼酸钠不宜作为钼肥添加到根瘤菌剂中。盆栽试验表明,不同菌株共生固氮的有效性与钼酸铵浓度相关。钼酸铵浓度为0.2%时,供试菌株Spr 4-5共生固氮效果最好,比CK增产73.4%,比传统菌肥增产13.7%,占瘤率为59.7%;钼酸铵浓度为0.3%时,Spr 2-9共生固氮效果最好,比CK增产49%,比传统菌肥增产21.4%,占瘤率为70.3%;其增产效果均达极显著水平。

我国奶牛养殖发展中存在的环境污染问题及控制措施

随着奶牛养殖业的不断扩大和集约化的程度不断提高,奶牛养殖对环境的污染问题也越来越受到人们的关注,如何处理好奶牛养殖发展与环境的关系已成为当今奶牛养殖中急需解决的问题。本文就我国近年来奶牛养殖对环境的污染形成原因、危害及其控制利用措施进行了讨论。

celB基因标记法研究酸性土花生接种及施钼效果

以缺钼酸性紫色土为供试土壤做盆栽试验,选用celB标记的三株慢生型花生根瘤菌celB3-5、celB3-7、celB4-5接种天府9号花生。通过标记根瘤菌形成的根瘤能与检测试剂产生颜色反应的特征,检测施钼及施不同浓度的钼对花生-根瘤菌有效性和竞争性的影响。结果表明,缺钼酸性紫色土上单施钼、单接种、接种配合施钼均能促进花生与根瘤菌的共生固氮效应和竞争结瘤能力,但接种配合施钼的效果最好,单接种的效果次之,单施钼的效果差。单施钼时,0.4%的钼酸铵拌种效果好,接种根瘤菌时,0.2%的效果好。供试菌株中celB4-5的有效性和竞争性最强,celB3-7次之,celB3-5差。

四川凉山州9种野生蘑菇的重金属含量

报道了采集于四川凉山州9种野生蘑菇及相关土壤的重金属Cd、Ph、Zn、Hg和As的含量．结果表明，供试土壤均未检出Hg，3个采集地除会理林家山土壤样品有Cd的检出，另外两个样地土壤未检出Cd．土壤中Ph、Zn和As在干土中的含量分别为52．8064～274．7310mg／kg、18．7475～164．5858mg／kg和3．9709～10．7499mg／kg．野生蘑菇对Cd和Hg具有很强的积累能力，在土壤中没有Cd和Hg检出的情况下，蘑菇中均测出了Cd和Hg，Cd含量高达28．3836mg／kg出现在梭孢环柄菇（Lepita ventriosospora），Hg含量最高为0．8607mg／kg出现在大白菇（Russula delica）．在土壤受Ph污染的情况下，大白菇子实体积累Ph的能力最强，含量为115．9290mg／kg．本次蘑菇样品Zn的含量不高．蘑菇对As的积累与土壤中As含量高低有关，最高含量为喇叭陀螺菌（Gomphus floccosus），为4．0035mg／kg．表明蘑菇对重金属的积累具有种特异性，与环境土壤重金属含量有关．基于蘑菇对重金属的强积累能力，可考虑作为净化重金属污染环境的特种生物．