HPLC法测定肿节风提取物中反丁烯二酸的方法及优化

目的:探索及优化HPLC法测定肿节风提取物中反丁烯二酸的方法。方法:采用单因素试验分别对HPLC法测定肿节风提取物中反丁烯二酸的流动相比例、流动相PH值、流速、柱温进行优化,每个因素设定4个水平,以找出每个因素的最适宜水平。结果:在乙腈-磷酸V:V=15:85、磷酸PH=3、流速为1ml/min,柱温28℃条件下,对对照品与供试品进行色谱分离结果较满意。结论经单因素实验优化实验条件可以用于测定肿节风中反丁烯二酸含量。

肿节风复方含药血清对肝癌HepG2细胞增殖、端粒酶及凋亡的影响

目的:观察肿节风复方含药血清对人肝癌细胞HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法:实验设阴性对照组(NS)、5-氟尿嘧啶(5-FU)组(0.025 g·kg-1)和肿节风复方低、中、高剂量组(2.5,5,10 g·kg-1),灌服于大鼠后,提取含药血清。取上述含药血清分别作用于HepG2细胞24,48,72 h;MTT法测定细胞增殖抑制率;ELISA法测定端粒酶活性;荧光显微法及流式细胞术(Annexin V-FITC/PI法)检测肿节风复方含药血清对HepG2细胞凋亡的影响。结果:与对照组比较,肿节风复方含药血清低、中、高剂量组均能抑制HepG2细胞的增殖(高剂量组抑制率最高达42.5%),呈现与时间-剂量依赖趋势;肿节风中、高剂量组能有效抑制HepG2细胞端粒酶活性,与对照组比较P<0.05;肿节风复方含药血清具有诱导HepG2细胞凋亡的作用,与对照组比较P<0.05,其中中剂量组作用24,48,72 h细胞凋亡率分别为(14.2±0.9)%,(30.6±1.0)%,(61.6±1.5)%。结论:肿节风复方含药血清能抑制HepG2细胞增殖、端粒酶活性,诱导HepG2细胞凋亡。