艾司氯胺酮通过激活CREB/BDNF信号通路减轻抑郁症大鼠海马神经元损伤

目的探究艾司氯胺酮基于环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路对抑郁症大鼠海马神经元损伤的影响。方法72只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、帕罗西汀组(10 mg/kg腹腔注射)、艾司氯胺酮组(15 mg/kg腹腔注射)、k252a组(CREB抑制剂,20μl/kg脑内注射)、艾司氯胺酮+k252a组。通过旷场实验、糖水消耗试验对大鼠行为学进行观察;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠海马组织5-羟色胺(HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)表达水平;苏木素-伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色法观测大鼠海马神经元损伤情况;免疫组化法观察大鼠海马组织BDNF表达情况;Western印迹检测大鼠海马组织CREB、BDNF通路表达情况。结果与空白组相比,模型组神经元损伤加重,水平运动得分、垂直运动得分、糖水偏好率,海马组织匀浆5-HT、DA、NE水平,海马组织CREB、p-CREB、BDNF水平明显下降,停留不动时间明显增长(均P<0.05);与模型组相比,帕罗西汀组、艾司氯胺酮组神经元损伤减轻,水平运动得分、垂直运动得分、糖水偏好率,海马组织匀浆5-HT、DA、NE水平,海马组织CREB、p-CREB、BDNF水平明显升高,停留不动时间明显缩短(P<0.05),k252a组神经元损伤加重,水平运动得分、垂直运动得分、糖水偏好率,海马组织匀浆5-HT、DA、NE水平,海马组织CREB、p-CREB、BDNF水平明显降低,停留不动时间明显增长(P<0.05);与艾司氯胺酮组相比,艾司氯胺酮+k252a组神经元损伤加重,水平运动得分、垂直运动得分、糖水偏好率,海马组织匀浆5-HT、DA、NE水平,海马组织CREB、p-CREB、BDNF水平明显降低,停留不动时间明显增长(P<0.05)。结论艾司氯胺酮通过激活CREB/BDNF通路,降低抑郁症大鼠海马神经元损伤,改善大鼠抑郁症状。

miR-124通过抑制TLR4/NF-κB/CCL2对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-124 agomir)组、TLR4过表达质粒组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组,另取12只大鼠只分离颈动脉,作为假手术组。分组干预后,评测大鼠神经功能缺损情况,比较各组神经功能缺损评分;采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠CI情况,比较各组CI面积;采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,比较各组海马神经元凋亡率;采用试剂盒测量各组血清活性氧(ROS)及炎症因子环氧合酶(COX)-2、白细胞介素(IL)-17水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测各组脑组织miR-124表达;采用Western印迹实验检测各组脑组织凋亡及TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组分别比较,miR-124 agomir组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组各指标水平无显著变化(P>0.05)。结论miR-124可通过下调TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达,抑制炎症,减轻脑组织梗死及海马神经元凋亡,修复CI大鼠神经功能。

香豆素通过调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路减轻脑缺血-再灌注大鼠神经损伤

目的 探讨香豆素通过调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(Keap)1/核因子E2相关因子(Nrf)2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路减轻脑缺血-再灌注大鼠神经损伤。方法 大鼠随机分为假手术(Sham)组、脑缺血-再灌注损伤模型(CIRI)组,低(2.5 mg/kg)、中(5 mg/kg)、高剂量(10 mg/kg)香豆素组,Keap1/Nrf2/ARE信号通路抑制剂组(ML385)组及ML385+高剂量香豆素组,脑缺血2 h、再灌注24 h后采用Longa5分制法评估大鼠神经行为评分;2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测量大鼠脑梗死体积;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑皮质组织病理学变化;Western印迹检测大鼠脑皮质组织中Keap1/Nrf2/ARE信号通路相关因子[Keap1、Nrf2、血红素氧合酶(HO)-1、醌氧化还原酶(NQO)1]蛋白水平。结果 与Sham组比较,CIRI组神经行为评分、脑梗死体积,脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白增加,Keap1蛋白减少,差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞可见明显病理学改变。与CIRI组比较,低、中、高剂量香豆素组神经行为评分、脑梗死体积及脑皮质组织中Keap1蛋白减少,脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白增加,呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度显著减轻;ML385组神经行为评分、脑梗死体积增加,脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白减少,差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度加重。与高剂量香豆素组比较,ML385+高剂量香豆素组神经行为评分、脑梗死体积增加,脑皮质组织中胞核Nrf2/Nrf2及HO-1、NQO1蛋白减少,差异有统计学意义(P<0.05),且神经细胞损伤程度有所加重。结论 香豆素可减轻脑缺血-再灌注大鼠神经损伤,可能通过激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路而实现。

基于CRISPR-dCas9转录激活系统的毛果杨ANT转录因子功能分析

基于CRISPR-dCas9的基因转录激活表达能够避免基因异位表达带来的表型干扰,同时使基因有效地特异性表达。该研究利用新型CRISPR-Act3.0表达系统,在毛果杨(Populus trichocarpa)中对维管形成层特异表达转录因子ANT(AINTEGUMENTA)进行基因转录激活,创制遗传材料,并对基因的功能进行分析。首先对毛果杨PtrANTs转录因子进行同源分析,选取其中的PtrANT-4进行后续研究,对该基因进行克隆并利用荧光定量PCR分析其在各组织中的表达情况;其次在PtrANT-4启动子上设计3条gRNAs,构建CRISPR-dCas9转录激活表达载体,利用原生质体瞬时转化法检测该载体的表达;最后将该表达载体利用农杆菌介导法转化毛果杨,获得PtrANT-4转录激活遗传材料。结果表明:毛果杨中有4个PtrANTs转录因子,选取的PtrANT-4基因CDS序列全长为2 058 bp,编码685个氨基酸,在毛果杨侧生分生组织维管形成层特异表达。基于CRISPR-Act3.0表达系统成功构建的转录激活载体,在毛果杨木质部原生质体中转化后具有激活PtrANT-4表达的作用。获得的遗传转化植株中PtrANT-4基因仅在茎维管形成层中的表达量显著提高,说明PtrANT-4在茎维管形成层发育过程中可能起重要作用。该研究为PtrANT的功能研究奠定了一定研究基础,同时为维管形成层干细胞发育的机制研究提供了重要的遗传材料。

葛根素对缺氧诱导PC12细胞神经损伤及JNK/MAPK信号通路的影响

目的探讨葛根素对缺氧诱导的大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞PC12细胞神经损伤及c-Jun氨基末端激酶(JNK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法体外培养PC12细胞,50 ng/ml神经生长因子(NGF)诱导分化,对高分化的PC12细胞进行缺氧处理,再对缺氧诱导的PC12细胞进行不同浓度(0.1、1.0、10.0μmol/L)葛根素处理,将细胞分为对照组,缺氧组,0.1、1.0、10.0μmol/L葛根素组,葛根素+JNK通路激活剂茴香霉素(AC)组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测各组PC12细胞活性氧(ROS)水平;试剂盒检测各组细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;Western印迹检测各组凋亡蛋白JNK/MAPK信号通路相关蛋白表达情况。结果低分化PC12细胞多呈椭圆形,聚集成小团簇状;高分化PC12细胞长出类似神经元样突起,培养一段时间后,细胞体积增大突起增多增长,形成网络。与对照组比较,缺氧组PC12细胞活力、SOD水平显著降低,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著升高(P<0.05);与缺氧组比较,0.1、1.0、10.0μmol/L葛根素组PC12细胞活力、SOD水平显著升高,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与10.0μmol/L葛根素处理组比较,葛根素+AC组细胞活力、SOD水平显著降低,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著升高(P<0.05)。结论葛根素能够保护缺氧诱导的PC12细胞神经损伤,可能与抑制JNK/MAPK通路的激活有关。

豨莶草总黄酮对癫痫大鼠海马神经元损伤及CREB/BDNF信号通路的影响

目的探究豨莶草总黄酮对癫痫大鼠海马神经元的保护作用及对环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分成5组:对照组、模型组及豨莶草总黄酮低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组均采用锂-毛果芸香碱诱导构建癫痫持续状态(SE)大鼠模型。造模成功后,豨莶草总黄酮低、中、高剂量组大鼠给予5、10、20 mg/kg的剂量连续4 w灌胃治疗。治疗结束后,根据Racine分级标准对各组大鼠行为学进行评估;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测海马组织中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察海马组织病理变化;TUNEL染色检测海马神经元细胞凋亡情况;Western印迹法检测海马组织中CREB、p-CREB、BDNF蛋白表达水平。结果对照组海马组织结构正常,模型组神经元损伤明显,豨莶草各剂量组神经元损伤减轻,以高剂量组最为明显。与对照组相比,模型组大鼠行为学评分、神经元凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA及BDNF蛋白表达水平显著升高(P<0.05),SOD、GSH-Px、p-CREB蛋白水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,豨莶草总黄酮各剂量组行为学评分、神经元凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH-Px、p-CREB和BDNF蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论豨莶草总黄酮可减轻SE大鼠的炎症反应和氧化应激,抑制神经元凋亡,可能与激活CREB/BDNF信号通路有关。

颅内大动脉狭窄或闭塞与自发性大脑凸面蛛网膜下腔出血的相关性

目的探讨颅内大动脉狭窄或闭塞导致自发性大脑凸面蛛网膜下腔出血(cSAH)的病理机制及影像学特征。方法回顾自2013-01-2015-06就诊于南阳市中心医院神经科的11例临床表现为cSAH的颅内大动脉狭窄或闭塞患者的病例资料,分析其人口学特征、临床表现、影像学特征,探讨其病理机制。结果共纳入11例患者,男8例,女3例,中位数年龄62岁。所有患者均有长期高血压病史,未进行规范降压治疗。临床症状:类似TIA者7例(63.6%),不同程度持续性神经功能缺损症状3例(27.3%),癫痫发作1例(9.1%),其中伴有轻中度头痛4例(36.4%)。影像结果:所有患者头CT均表现为出血局限于一个或几个脑沟内,DSA检查未发现动脉瘤,表现为单侧或双侧前循环大血管狭窄或闭塞,其中烟雾病2例,单侧大血管狭窄/闭塞9例,包括ICA闭塞1例,MCA闭塞7例及MCA重度狭窄1例。所有患者的DSA均可见丰富的侧支循环,软脑膜吻合支开放最常见。结论 (1)cSAH的临床表现具有多样性,缺乏特异性,以发作性症状最多见;(2)颅内大血管重度狭窄/闭塞是cSAH的重要病因之一,并以MCA为主,软脑膜吻合血管破裂是导致cSAH的发病原因;(3)血压的高位变异波动是导致软脑膜血管破裂的直接诱因。

X线机电视系统一例少见故障处理

我院一台F99—Ⅱ型500mAX线机与之配套的日本东芝E5761G—P1电视系统影像增强系统发生故障。 一、故障现象:未通X线前,监视器光栅正常,当通X线时,监视器不出图像。 二、故障分析: 1、X线机故障:无X线发生或电动遮光器完全关闭。 2、电视系统故障:影像增强管或小高压发器、摄像机及监视器部分故障所致。

基于NRG/ErbB通路探讨三七总皂苷对偏头痛大鼠的作用机制

目的:基于神经调节蛋白(NRG)/表皮生长因子受体(ErbB)信号通路探讨三七总皂苷(TSPN)对偏头痛大鼠的保护机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、TSPN(10 mg/kg)组和TSPN(10 mg/kg)+NRG/ErbB信号通路抑制剂AG825(50μg/kg)组(TSPN+抑制剂组),每组12只。给药1周后,模型组、TSPN组和TSPN+抑制剂组大鼠用2 mL硝酸甘油溶液(剂量为10 mg/kg)皮下注射建立偏头痛模型,对照组相同部位注射等体积的生理盐水。各组进行行为学评分;苏木精-伊红(HE)染色检测脑组织神经元形态;酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平,以及脑组织中5-羟色胺(5-HT)、β-内啡肽(β-EP)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量;Western blot法检测脑组织中NRG1、ErbB2、ErbB3、ErbB4、caspase-3和cleaved caspase-3蛋白水平。结果:模型组神经元空泡状明显,细胞萎缩、坏死严重,出现局部坏死、血管阻塞现象;TSPN组神经元得到一定修复,仅存在部分空泡现象;TSPN+抑制剂组细胞空泡现象明显,出现部分血管阻塞现象。与对照组相比,模型组在0~30 min、60~90 min和120~150 min中行为学评分,血清中NO、IL-6和IL-1β水平,脑组织中CGRP含量,以及脑组织中cleaved caspase-3/caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05),脑组织中5-HT和β-EP含量及NRG1、ErbB2、ErbB3和ErbB4蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,TSPN组上述指标有所缓解,耳红出现时间延长(P<0.05),耳红消失时间缩短(P<0.05);与TSPN组相比,NRG/ErbB信号通路抑制剂AG825逆转TSPN对上述指标的缓解。结论:TSPN可能通过激活NRG/ErbB信号通路实现对偏头痛的缓解。

100例急性脑血管病继发癫痫的临床特点

目的探讨急性脑血管病继发癫痫的临床特点。方法回顾性分析我院收治的100例急性脑血管病继发癫痫患者的临床资料,总结急性脑血管病继发癫痫患者的临床特点和预后情况。结果在100例患者中,脑出血继发癫痫患者所占比重高于脑梗死患者;早发性癫痫患者所占比重高于迟发性患者;合并偏瘫患者所占比重高于无偏瘫患者;强直痉挛性发作患者所占比重高于单纯性发作患者;脑电图异常患者所占比重高于脑电图正常患者。所有患者经过系统治疗并给予对症治疗措施后,住院期间无1例出现癫痫再发的情况;在半年随访时发现,有2例患者出现癫痫复发,复发率为2.0%。结论在急性脑血管病继发癫痫的患者中,脑出血继发癫痫的风险高于脑梗死,早发性癫痫的发生率更高且此类患者多合并偏瘫,癫痫发作主要以强直痉挛性发作为主,大部分伴随脑电图异常;在经过积极系统治疗后,癫痫能够得到有效控制且复发率较低。

基于无线蓝牙控制的水果采摘机构设计

本文设计一种经济性,适于果林作业的无线水果采摘机械装置。可伸缩式剪切采摘机构解决了人们采摘高处果实难的问题,同时改善了农民采摘果实的工作方法,提升了采摘效率。

血管内机械取栓联合动静脉溶栓治疗急性脑梗死疗效观察

目的探讨血管内机械取栓联合动静脉溶栓与单纯动静脉溶栓治疗急性脑梗死的临床疗效及预后。方法回顾性分析2017年5月至2018年12月该院收治的217例急性脑梗死患者临床资料,将实施血管内机械取栓联合动静脉溶栓治疗的113例患者设为观察组,实施动静脉联合溶栓治疗的104例患者设为对照组。比较两组患者治疗前后美国卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,牛津残障量表(OHS)预后情况和治疗期间并发症。结果治疗前,NIHSS评分组间比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组治疗后24 h、7 d、30 d时NIHSS评分均低于对照组(P<0.05)。观察组OHS量表评价致残率为25.66%,明显低于对照组的61.54%,组间差异有统计学意义(χ^2=7.194,P=0.011)。观察组治疗期间并发症发生率为7.96%,明显低于对照组22.12%,组间差异有统计学意义(χ^2=6.385,P=0.017)。结论血管内机械取栓联合动脉溶栓可有效降低急性脑梗死患者神经功能缺损程度、致残率及并发症发生率。

急性有机磷农药中毒致上消化道出血相关临床因素分析

目的探讨与急性有机磷农药中毒(AOPP)所致上消化道出血的相关临床因素,寻找防治上消化道出血的有效措施。方法选择2005年1月～2010年10月阳新县人民医院急诊科收治的重度AOPP患者49例,根据临床症状分为上消化道出血组(A组,26例)和非上消化道出血组(B组,23例),观察上消化道出血发生的时间、次数、原因,两组血糖、急性生理学及慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ评分)、血清胆碱酯酶及预后的差异。结果 AOPP致上消化道出血的原因依次为毒物损伤胃黏膜、洗胃损伤、应激性溃疡。A组APACHEⅡ评分明显高于B组,血清胆碱酯酶明显低于B组,APACHEⅡ评分与上消化道出血呈正相关,血清胆碱酶与上消化道出血呈负相关。结论 APACHEⅡ评分及血清胆碱酯酶都可用于反映AOPP时上消化道出血发生情况。

一种基于单片机的多功能智能水杯设计

本文介绍了一种基于AT89C51单片机的智能水杯。该设计通过温度检测模块对杯中水温的检测,经过单片机的内部程序的运算执行与调温模块的共同处理,实现了对杯中液体温度的智能调节;通过限位检测装置对杯中水位的测定,经过单片机内部运算和注水装置的协同作用,实现了自动蓄水功能;通过感应充电装置,实现智能水杯启动后,手环式电源为智能水杯无线供电。经过反复论证和分析,验证了本设计的合理性。

枸杞多糖调节PPARγ/MAPK/NF-κB信号通路对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

目的探讨枸杞多糖(LBP)调节过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子(NF)-κB信号通路对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响。方法SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)组、LBP-低(L)、中(M)、高(H)+MCAO/R组。MCAO/R手术前14 d,LBP-L、M、H+MCAO/R组分别口服超纯水溶解LBP 100、200、300 mg/kg,1次/d,连续14 d,而Sham组和MCAO/R组给予等量超纯水。第14天给药后30 min,进行MCAO/R手术。评估MCAO/R损伤后24 h脑组织神经功能、脑梗死体积、脑组织病理学、脑损伤和炎症相关指标及PPARγ/MAPK/NF-κB信号通路蛋白表达。结果与MCAO/R组比较,LBP预处理神经功能评分、脑梗死体积、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和中枢神经特异蛋白(S100β)水平、脑组织中伊文思蓝(EB)含量及炎症细胞因子水平明显降低(均P<0.05);此外,LBP预处理抑制CD44、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达并促进神经元核蛋白(NeuN)表达,上调PPARγ蛋白表达,下调磷酸化核因子抑制蛋白(p-IκBα)、p-p65、p-p38、p-c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p-细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达,提高B细胞淋巴瘤(Bcl)-2/Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LBP预处理可通过增加PPARγ水平调节MAPK/NF-κB通路,减少神经元凋亡,在脑梗死大鼠中发挥神经保护作用。

前馈控制理念下的系统化护理应用在抗血小板药物治疗脑梗死患者期间的效果

目的:探析前馈控制理念下的系统化护理在脑梗死抗血小板药物治疗期间的应用效果。方法:回顾性分析2022年11月—2023年8月在本院接受抗血小板药物治疗的102例脑梗死患者资料,将其中51例接受系统化护理干预患者纳入对照组,51例接受前馈控制理念下的系统化护理干预患者纳入观察组。比较两组心理状态[焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)]、治疗依从性、肢体运动功能[简式Fugl-Meyer评估量表(FMA)]、日常生活活动能力[Barthel Index指数量表(BI)]。结果:干预结束时,观察组SDS、SAS评分低于对照组,治疗依从性及上肢、下肢运动功能评分、BI评分评分高于对照组(P<0.05)。结论:在脑梗死抗血小板药物治疗期间实施前馈控制理念下的系统化护理,更利于改善患者心理状态,提高患者治疗依从性,促使肢体运动功能恢复,进一步提高患者日常生活活动能力。

柿果萼ABA生物合成关键酶基因NCED的克隆及ABA对柿离体幼果乙烯的调节

柿子通常被归类为呼吸跃变型果实.然而,与典型的跃变型果实不同,它表现出独特的跃变特性,即越早期采下的果实,乙烯产生量越大.为了弄清柿离体幼果的乙烯生成及诱导机制,从果萼中克隆了1个编码ABA生物合成关键酶基因(DK-NCED1)的cDNA片段,并分析其在离体幼果中的表达及其产物ABA对乙烯生成的影响.结果显示,幼果采后置于室温下,萼片首先失水,其DK-NCED1基因于采后第1天开始表达,并伴随着ABA的快速积累,ABA在采后第2天达到峰值,然后下降.果萼中DK-ACS2和DK-ACO1基因从采后第2天开始表达,乙烯随即诱导产生,并于第3天达到峰值.果实中也存在上述变化模式,但各项指标均比果萼晚1d,且果肉硬度从采后第4天急速下降,并于第6天完全软化.外源ABA或NDGA(一种NCED酶抑制剂)对离体幼果DK-NCED1基因的表达无影响,但却促进或抑制了果实中乙烯合成酶基因DK-ACS2及氧化酶基因DK-ACO1的表达及其乙烯的生成,促进或延迟了幼果的软化.结果表明,柿幼果采后,失水胁迫诱导了果萼中DK-NCED1基因的表达,并诱导ABA的快速积累;ABA达到一定值后触发乙烯生物合成酶基因DK-ACS2和氧化酶基因DK-ACO1基因的表达,乙烯随即生成并扩散至果肉,作为二级信号刺激果肉中乙烯的合成,并引发乙烯的跃变,使果实软化.

低灌注强度比值对急性前循环大血管闭塞性卒中患者血管内取栓治疗预后的预测价值研究

目的探讨低灌注强度比值(HIR)对急性前循环大血管闭塞性卒中(LVOS)患者血管内取栓治疗(EVT)预后的预测价值。方法回顾性选取2021年1月至2022年6月南阳市中心医院收治的接受EVT且影像学检查显示血管再通的急性前循环LVOS患者106例为研究对象。收集患者的临床资料,对其进行非增强CT、CT血管造影术、CT灌注成像检查,计算核心梗死区体积(V_(IC))、低灌注区体积(V_(Tmax>6 s))、严重低灌注区体积(V_(Tmax>10 s))、缺血半暗带区体积(V_(Mismatch))、HIR。术后随访90 d时采用改良Rankin量表(mRS)评价患者预后情况。采用多因素Logistic回归分析探讨急性前循环LVOS患者EVT预后的影响因素;采用ROC曲线分析年龄、入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、发病至穿刺时间、HIR及其联合对急性前循环LVOS患者EVT预后不良的预测价值。结果随访结果显示,患者预后良好63例(预后良好组),预后不良43例(预后不良组)。两组年龄、有冠心病病史者占比、入院时NIHSS评分、CT平扫Alberta卒中项目早期CT评分(ASPECTS)、V_(IC)、V_(Tmax>10 s)、HIR比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄〔OR=1.056,95%CI(1.006,1.108)〕、入院时NIHSS评分〔OR=1.101,95%CI(1.013,1.197)〕、发病至穿刺时间〔OR=1.003,95%CI(1.001,1.006)〕、HIR〔OR=492.435,95%CI(29.371,8256.315)〕是急性前循环LVOS患者EVT预后的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,年龄、入院时NIHSS评分、HIR及三者联合预测急性前循环LVOS患者EVT预后不良的AUC分别为0.612〔95%CI(0.504,0.721)〕、0.703〔95%CI(0.601,0.805)〕、0.754〔95%CI(0.655,0.853)〕、0.803〔95%CI(0.719,0.886)〕。三者联合与HIR预测急性前循环LVOS患者EVT预后不良的AUC比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论年龄增长、入院时NIHSS评分升高、发病至穿刺时间延长、HIR升高是急性前循环LVOS患者EVT预后不良的危险因素,且HIR对急性前循环LVOS患者EVT预后不良具有中等预测价值。