FQ-PCR技术在肺外结核中的诊断价值

目的探讨FQ-PCR技术对活动性骨关节结核和泌尿系结核的诊断价值。方法选择118例疑似结核病患者,其中关节炎患者52例,泌尿系感染患者66例,应用FQ-PCR技术分别检测患者关节腔积液和尿液中的TB-DNA,并与抗酸染色法的检出率比较。结果 52例关节炎患者中,确诊结核性关节炎患者36例,TB-DNA阳性22例,22例全部为确诊病例,阳性率61.1%。抗酸染色的阳性数为2,均为TB-DNA阳性者,阳性率5.6%;66例泌尿系统疾病患者中,确诊泌尿系结核患者52例,TB-DNA阳性32例,32例全部为确诊病例,阳性率为61.5%,抗酸染色的阳性数为4,均为TB-DNA阳性者,阳性率7.7%。结论应用FQ-PCR技术检测患者关节腔积液和尿液中的TB-DNA,具有高度敏感性和特异性,可作为结核性关节炎和泌尿系统结核早期诊断的一个可靠指标。

石蜡包埋组织实时荧光定量聚合酶链反应检测在结核病诊断中的价值

目的探讨石蜡包埋组织实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测结核分枝杆菌DNA在结核病诊断中的价值。方法275例组织标本行常规组织病理学检查、抗酸染色,并对石蜡包埋组织应用实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌DNA。结果275例FQ-PCR检测结核分枝杆菌DNA阳性211例(76.7%),病理诊断为结核183例(66.5%),抗酸染色阳性23例(8.4%)。病理诊断为结核者FQ-PCR阳性率为93.4%,抗酸染色阳性者FQ-PCR阳性率95.7%。结论实时荧光聚合酶链反应技术敏感性高、其与组织病理学相结合可以提高诊断率。

乌体林斯和胸腺肽对初治肺结核的疗效对比

目的观察和评价乌体林斯和胸腺肽对初治肺结核的辅助疗效及优劣对比。方法将150例初治肺结核患者随机分为A、B、C 3组,每组50例,A组为常规抗结核药物+胸腺肽;B组为常规抗结核药物+乌体林斯;C组为单纯抗结核药物。分别在治疗前、治疗后1个月末、2个月末X线摄胸片显示病变吸收情况、痰菌的阴转情况以及测定患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的变化。结果治疗1个月末3组病变吸收和痰涂片阴转率没有明显差别;治疗2个月末,A组和B组病变吸收率和痰涂片阴转率均明显高于C组;治疗后3组CD+3、CD+4升高,CD+8降低,CD+4/CD+8升高,NK细胞降低,且A、B两组程度均明显高于C组。结论乌体林斯和胸腺肽能明显改变肺结核患者的细胞免疫功能,加快病变的吸收及痰菌的阴转速度,两种免疫辅助药物疗效相当。

荧光定量PCR技术在骨关节结核中的诊断价值

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对活动性骨关节结核的诊断价值。方法选择关节炎患者52例,应用FQ-PCR技术检测患者尿液中TB-DNA的检出率,并与抗酸染色法的检出率比较。结果 52例关节炎疾病患者中,确诊结核性关节炎患者36例,TB-DNA阳性22例,全部确诊为结核性关节炎,阳性率61.11%,特异度100%,抗酸染色阳性2例,阳性率5.56%。结论应用FQ-PCR技术检测结核性关节炎患者关节腔积液中TB-DNA,具有高度敏感性和特异性,明显优于抗酸染色法,差异有统计学意义(P<0.01)。

浅谈护理服务理念的现状与未来

1 国内人文护理服务理念的现状 随着人们对健康需求的不断增长，希望得到更好的医疗服务以提高生命质量。然而，多年来由于护理过于技术化的倾向以及护理人员的缺乏，限制了其作为一种特殊服务业所应体现的人文关怀。因此，在实际工作中，护理工作未能充分体现“以人为本”。

人文护理在术前访视患者中的实施

人文护理即人性化护理，就是对患者施以人文关怀，提倡人性化的护理。人文关怀就是关注人、关心人，重视人的个性，满足人的需求，尊重人的权利。术前访视是手术室整体护理向纵深发展的标志，是手术室迈向科学化的具体实践。美国护士协会《手术室护士基本纲领》中规定，手术室护理实践基准的第一阶段是进行术前访视。国际手术室护士协会（AORN）也规定：术前访视是手术室护士的职能和职责之一。

不同热变温度对新生儿脐带血中超氧化物歧化酶提取的影响

超氧化物歧化酶（SOD）是一种针对O-2的抗氧化防御的主要酶,它能催化超氧阴离子转化为H2O2和O2,能消除新陈代谢生命活动过程中产生的有害物质。一个高效的SOD制备方法在应用研究中非常必要,目前,学者们已经研究出了多种检测提取SOD的方法,热变法提取SOD操作简单。本研究主要探讨的是热变法提取新生儿脐带血中SOD的最适温度。

SARS时期实验室人员的防护

在与SARS作斗争的过程中,我院采取有效的预防和隔离措施,创造了患者零死亡、医务人员零感染的佳绩.我们也积累了一些经验,现将我实验室人员的消毒隔离情况报告如下.

NKT细胞、NK细胞和T细胞亚群在活动性肺结核患者外周血的表达及意义

目的:探讨活动性肺结核病人外周血CD3+T、CD3+CD4+Th、CD3+CD8+Tc、CD3-CD16+56+NK、CD3+CD16+56+NKT、Th/Tc的表达变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术分析45例肺结核病人、16例肺部感染病人及30例健康人外周血CD3+Th、CD3+CD4+Th、CD3+CD8+Tc、CD3-CD16+56+NK、CD3+CD16+56+NKT、Th/Tc的表达和变化情况。结果:初、复治肺结核患者的外周血NKT比例明显高于健康人(P<0.05);Th低于健康人(P<0.05);Tc高于健康人(P<0.05);Th/Tc低于健康人(P<0.05)。初、复治肺结核患者之间T、Th、Tc、NK、NKT、Th/Tc未见明显差异。肺部感染、活动进展Ⅰ期、活动进展Ⅱ期病人NKT阳性细胞数高于健康人和吸收好转期病人且结果有统计学意义(P<0.05);活动进展Ⅱ期组高于肺部感染组且结果有统计学意义(P<0.05)。活动进展Ⅰ期、活动进展Ⅱ期病人Tc阳性细胞数高于健康人组且结果有统计学意义(P<0.05)。Th/Tc吸收好转期、肺部感染、活动进展期、活动进展Ⅱ期均低于健康人组且结果有统计学意义(P<0.05)。轻症、中症、重症患者,重症者Th升高、Tc下降、Th/Tc升高。结论:NKT细胞与肺结核的发展和转归有关。Tc细胞的升高是免疫系统对于结核杆菌的反应,与肺结核病变的发展、范围和程度紧密相关。重点监测外周血NKT细胞和Tc细胞对于掌握活动性肺结核发展和预后有特殊的意义。

NK细胞对非小细胞肺癌细胞NCI-H292的杀伤作用及对其β-catenin蛋白表达的影响

目的探讨自然杀伤(NK)细胞对肺癌细胞系NCI-H292的杀伤作用及对癌细胞中β-catenin蛋白表达的影响。方法无菌采集健康人外周血,培养NK细胞(NK组),取培养14 d后的NK细胞,调整细胞浓度为5×106/m L,按1∶5的比例接种到NCI-H292细胞(NK+NCI-H292组)培养板共培养24 h,单独培养NCI-H292细胞(NCIH292组)24 h。采用CCK-8法测算NK细胞对肺癌细胞系NCI-H292的杀伤活性,采用Western blotting法检测NCIH292细胞中β-catenin蛋白的表达。结果 NK细胞对NCI-H292细胞的杀伤率为96.720%±1.081%,与NK及NCI-H292组比较,NK+NCI-H292组β-catenin表达降低(P均<0.01)。结论 NK细胞对NCI-H292细胞具有杀伤力,同时能够抑制NCI-H292细胞中β-catenin蛋白的表达。

基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的研究

目的探讨基因芯片技术在检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性的应用。方法收集21例临床诊断结核病患者体液标本经培养得到的分离菌液,进行基因芯片检测,包括利福平的rpoB基因位点和异烟肼的KatG和inhA基因位点,从而判断其耐药性。结果 21例样本中,利福平rpoB基因有10例突变,总突变率为47.6%,其中9例为531位点的(C-T)突变,1例526位点的(C-G)突变。与药敏试验的符合率为81.0%。异烟肼基因突变有6例,总突变率为28.6%,其中4例为KatG 315(G-C)突变,2例为inhA-15(C-T)突变。与药敏试验的符合率为90.5%。利福平的11例耐药株中,基因芯片检测8例为突变型,突变率为72.7%,在利福平的10例敏感株中,基因芯片检测2例为突变型,突变率为20.0%。在异烟肼的6例耐药株中,基因芯片检测5例为突变型,突变率为83.3%,在异烟肼的15例敏感株中,基因芯片检测1例为突变型,突变率为6.7%。结论基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性具有较高的特异性和敏感性,快速准确,可以应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。

异基因半相合CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌临床分析

目的探讨异基因半相合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cell,CIK)治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法 25例晚期非小细胞肺癌患者接受CIK细胞治疗。采用患者子女的外周血(异基因半相合)分离单个核细胞置于CD3 Mc Ab和Retro-Nectin包被细胞培养瓶后,悬浮细胞用干扰素-γ、白介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)、IL-2细胞因子诱导CIK细胞。14天后锥虫蓝染色检测活性,流式细胞仪检测CIK细胞表面标志物。患者回输CIK细胞后,检测患者外周血的细胞表型变化。参照WHO的实体瘤疗效评价标准评估疗效。结果 CIK细胞培养到第14天时为10.7×109个,锥虫蓝染色检测活性为(98.2±1.0)%。流式细胞仪检测到CD56+CD16+CD3+细胞较培养前显著增加[(30.2±1.5)%vs(6.0±2.0)%,P<0.05]。患者回输后外周血CIK细胞第10天、第20天较回输前显著增加(P<0.05)。CIK细胞回输后临床评估CR 10例,PR 8例,NC 5例,PD 2例,总有效率(CR+PR)为72.0%,中位缓解期为10.1月,中位生存期为12.0月,1年生存率为64.0%(16/25)。患者无骨髓抑制、脱发、静脉炎和消化道反应。结论异基因半相合CIK细胞治疗晚期非小细胞肺癌能延长患者生存期,提高生存质量,不良反应轻。

乌体林斯和胸腺肽两种免疫调节剂辅助治疗初治涂阳肺结核的近期疗效观察

目的观察和评价乌体林斯和胸腺肽对初治涂阳肺结核的辅助治疗作用。方法将150例初治肺结核患者随机分为3组,每组50例,第一组为常规抗结核药物+胸腺肽,第二组为常规抗结核药物+乌体林斯,第三组为单纯抗结核药物。分别在治疗前、治疗后1、2个月末X线胸片显示病变吸收情况、痰菌的阴转情况以及测定患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的变化。结果治疗1个月末3组病变吸收和痰涂片阴转率没有明显差异;治疗2个月末,胸腺肽组和乌体林斯组病变吸收率和痰涂片阴转率均明显高于对照组;治疗后3组CD3、CD4升高,CD8降低,CD4/CD8升高,NK细胞降低,且胸腺肽、乌体林斯2组程度均明显高于对照组。结论乌体林斯和胸腺肽能明显改变肺结核患者的细胞免疫功能,加快病变的吸收及痰菌的阴转速度,两种免疫辅助药物疗效相当。

人胎盘间充质干细胞对小鼠肺纤维化的影响及机制

目的观察人胎盘间充质干细胞对小鼠肺纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法采用组织块贴壁法分离并体外培养人胎盘间充质干细胞。将30只C57BL/6小鼠随机均分为观察组、对照组,均给予气管内注入博来霉素8.5 mg/kg建立肺纤维化模型。造模成功后,观察组尾静脉输注体外培养的人胎盘间充质干细胞0.3 m L(细胞数为1.0×106个),对照组注射等量生理盐水,1次/d,连续注射3天;处死小鼠,取肺组织,检测肺组织羟脯氨酸含量,采用Western blotting法检测肺组织血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素1(ET-1)和血管生成素2(Ang-2)蛋白。结果观察组肺组织羟脯氨酸含量为(5.76±0.13)μg/m L,对照组为(8.13±0.87)μg/m L,两组比较P<0.01。观察组肺组织VEGF的相对表达量为52.7±4.7、ET-1为68.1±5.4、Ang-2为59.6±2.8,均较对照组(100)降低(P均<0.05)。结论人胎盘间充质干细胞可抑制小鼠肺组织纤维化形成;降低肺组织VEGF、ET-1和Ang-2表达可能是其作用机制。

呼吸衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群的相关研究

目的分析呼吸衰竭患者外周血T淋巴细胞亚群的特点、影响因素、临床意义及其治疗前后测定值的变化。方法采用免疫组织化学染色的方法测定100例呼吸衰竭患者CD3+、CD4+和CD8+细胞的阳性细胞百分率、CD4+/CD8+比值以及患者治疗前后外周血中T细胞亚群水平,并与正常对照组进行比较分析。结果呼吸衰竭患者外周血CD3+、CD4+明显减少,而CD8+明显增加,CD4+/CD8+比值明显下降,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。呼吸衰竭治疗后CD3+、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值较前升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论呼吸衰竭患者存在细胞免疫功能紊乱,检测患者外周血T淋巴细胞亚群表达对评估患者的细胞免疫功能及疾病的诊断具有重要的临床意义。

防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。

结核感染T细胞检测在骨关节结核中的诊断价值

目的评价结核感染T细胞检测(tuberculous infection of T cells spot test,T-SPOT.TB)在疑似骨关节结核病中的诊断价值。方法选取80例确诊为骨关节结核患者和44例排除结核患者。分别进行抗酸染色、结核菌培养、实时荧光定量PCR检测及T-SPOT.TB,比较并分析检测结果。结果 T-SPOT.TB的敏感度、特异度和准确度分别为82.5%、75.0%、79.8%。T-SPOT.TB的阳性检出率显著高于抗酸染色、结核分枝杆菌培养(P<0.05),而在不同疾病部位(脊柱、四肢关节)及不同病程分组间阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TSPOT.TB可以作为骨关节结核病的重要辅助诊断方法。

耐多药脊柱结核的临床应对措施

目的探讨脊柱结核耐药规律、耐药菌株对脊柱结核疗效影响及临床应对措施。方法对2007—2009年临床送结核菌培养的204例确诊为脊柱结核患者进行回顾性分析,总结结核菌的耐药规律、了解耐药菌株对临床疗效的影响,探讨耐药菌株脊柱结核的治疗方法。结果 204份标本中,培养出人型结核分枝杆菌102例,牛型结核分枝杆菌8例,总计培养阳性110例,阳性率53.9%。阳性结果中,耐药菌株26例,耐药发生率占培养阳性的23.6%。耐药菌株中符合耐多药标准的13例,占耐药菌株的50.0%。204例患者中发生术后早期骨病灶未愈4例,新发病灶3例,总计7例,其中6例为耐药结核菌感染,6例行2次手术治疗痊愈,1例行3次手术治疗后痊愈。本组193例随访1年,随访病例骨病灶全部愈合。结论结核菌培养及药物敏感性测定在脊柱结核诊断与治疗中有重要意义。耐多药结核菌株对脊柱结核疗效有明显影响。对耐药结核菌株感染要依据药物敏感测定报告制定个体化治疗方案。对耐药脊柱结核早期病灶未愈和新发病灶及时配合合理手术有助于骨病灶愈合。