目的探讨内质网应激对慢性间歇低氧幼鼠脑损害的机制。方法取SPF级健康雄性SD幼鼠32只,随机分为4组:间歇低氧(IH)2、4周组(2IH,4IH组),对照2、4周组(2C,4C组),每组8只。采用八臂迷宫测试各组幼鼠工作记忆错误(WME)、参考记忆错误(RME)...目的探讨内质网应激对慢性间歇低氧幼鼠脑损害的机制。方法取SPF级健康雄性SD幼鼠32只,随机分为4组:间歇低氧(IH)2、4周组(2IH,4IH组),对照2、4周组(2C,4C组),每组8只。采用八臂迷宫测试各组幼鼠工作记忆错误(WME)、参考记忆错误(RME)、总错误数(TE),观察海马神经元凋亡变化,测定免疫球蛋白结合蛋白(Bi P)、转录激活因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)和磷酸化RNA激活蛋白激酶的内质网类似激酶(p-PERK)的表达水平。结果慢性间歇低氧导致幼鼠学习记忆能力下降,与2周组比较,4周组明显(WME:3.38±0.52 vs 2.12±0.84;RME:4.25±0.71 vs 3.00±0.93;TE:7.62±0.74 vs 5.12±0.64,P均<0.01);IH组海马神经元发生凋亡,4周组最明显(20.78%±2.63%vs 14.94%±1.59%,P<0.01)。IH组幼鼠海马Bi P、ATF4和CHOP mRNA表达均增加,4IH组ATF4、CHOP mRNA表达显著升高(ATF4:3.50±0.24vs 1.92±0.13,P<0.01;CHOP:3.09±0.22 vs 1.95±0.18,P<0.01)。2IH、4IH组p-PERK、CHOP蛋白表达上调,4IH组表达明显升高(p-PERK 3.72±0.21 vs 1.85±0.07,P<0.01;CHOP:4.29±0.27 vs 2.69±0.11,P<0.01)。结论慢性间歇低氧可上调记忆相关脑区Bi P、CHOP、ATF4 mRNA和p-PERK、CHOP蛋白的表达,表明内质网应激诱导慢性间歇低氧幼鼠认知相关的脑损害;PERK/ATF4/CHOP信号通路可能是内质网应激的分子机制。展开更多
目的：探讨慢性间歇性低氧对幼鼠脑区腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）通路的影响。方法：第一部分：将3～4周龄的SD幼鼠随机分为4组（n=8）：2周空气模拟对照（2AC）组、2周慢性间歇低氧（2IH）组、4周空气模...目的：探讨慢性间歇性低氧对幼鼠脑区腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）通路的影响。方法：第一部分：将3～4周龄的SD幼鼠随机分为4组（n=8）：2周空气模拟对照（2AC）组、2周慢性间歇低氧（2IH）组、4周空气模拟对照（4AC）组和4周慢性间歇低氧（4IH）组。第二部分：将3～4周龄的SD幼鼠随机分为2组（n=8）：4周慢性间歇性低氧组（4IH）和4周慢性间歇性低氧用药组（4IHI）。造模结束后行八臂迷宫测试,TUNEL法检测细胞凋亡,RT-qPCR法了解腺苷A2a受体的mRNA表达,Western blot法测定AMPK及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）的磷酸化水平。结果：与对照组相比,2IH组和4IH组的参考记忆错误（RME）、工作记忆错误（WME）和总错误（TE）次数明显增加,差异有统计学显著性（P〈0.01）;4IH与2IH组比较,各项错误次数亦明显增加（P〈0.01）。4IHI组比4IH组RME、WME和TE次数减少,差异有统计学显著性（P〈0.01）。与对照组相比,2IH组和4IH组海马和前额皮层区的神经元凋亡增多,以4IH组凋亡明显（P〈0.05）;4IHI组凋亡较4IH组减少（P〈0.05）。2IH组和4IH组海马和前额皮层区腺苷受体A2a的mRNA和AMPK磷酸化蛋白的水平升高,mTOR磷酸化蛋白的水平下降,4IH组较2IH组改变明显（P〈0.05）。4IHI组较4IH组海马和前额皮层区的AMPK磷酸化蛋白水平下降,mTOR磷酸化蛋白水平升高（P〈0.05）。结论：慢性间歇性低氧诱导神经元凋亡,从而引起幼鼠学习记忆障碍,呈时间依赖性。慢性间歇性低氧上调腺苷A2a受体,激活海马和前额皮层区AMPK,抑制mTOR的活性,诱导神经元凋亡,进而影响幼鼠学习记忆能力。展开更多
文摘目的探讨内质网应激对慢性间歇低氧幼鼠脑损害的机制。方法取SPF级健康雄性SD幼鼠32只,随机分为4组:间歇低氧(IH)2、4周组(2IH,4IH组),对照2、4周组(2C,4C组),每组8只。采用八臂迷宫测试各组幼鼠工作记忆错误(WME)、参考记忆错误(RME)、总错误数(TE),观察海马神经元凋亡变化,测定免疫球蛋白结合蛋白(Bi P)、转录激活因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)和磷酸化RNA激活蛋白激酶的内质网类似激酶(p-PERK)的表达水平。结果慢性间歇低氧导致幼鼠学习记忆能力下降,与2周组比较,4周组明显(WME:3.38±0.52 vs 2.12±0.84;RME:4.25±0.71 vs 3.00±0.93;TE:7.62±0.74 vs 5.12±0.64,P均<0.01);IH组海马神经元发生凋亡,4周组最明显(20.78%±2.63%vs 14.94%±1.59%,P<0.01)。IH组幼鼠海马Bi P、ATF4和CHOP mRNA表达均增加,4IH组ATF4、CHOP mRNA表达显著升高(ATF4:3.50±0.24vs 1.92±0.13,P<0.01;CHOP:3.09±0.22 vs 1.95±0.18,P<0.01)。2IH、4IH组p-PERK、CHOP蛋白表达上调,4IH组表达明显升高(p-PERK 3.72±0.21 vs 1.85±0.07,P<0.01;CHOP:4.29±0.27 vs 2.69±0.11,P<0.01)。结论慢性间歇低氧可上调记忆相关脑区Bi P、CHOP、ATF4 mRNA和p-PERK、CHOP蛋白的表达,表明内质网应激诱导慢性间歇低氧幼鼠认知相关的脑损害;PERK/ATF4/CHOP信号通路可能是内质网应激的分子机制。
文摘目的：探讨慢性间歇性低氧对幼鼠脑区腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）通路的影响。方法：第一部分：将3～4周龄的SD幼鼠随机分为4组（n=8）：2周空气模拟对照（2AC）组、2周慢性间歇低氧（2IH）组、4周空气模拟对照（4AC）组和4周慢性间歇低氧（4IH）组。第二部分：将3～4周龄的SD幼鼠随机分为2组（n=8）：4周慢性间歇性低氧组（4IH）和4周慢性间歇性低氧用药组（4IHI）。造模结束后行八臂迷宫测试,TUNEL法检测细胞凋亡,RT-qPCR法了解腺苷A2a受体的mRNA表达,Western blot法测定AMPK及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）的磷酸化水平。结果：与对照组相比,2IH组和4IH组的参考记忆错误（RME）、工作记忆错误（WME）和总错误（TE）次数明显增加,差异有统计学显著性（P〈0.01）;4IH与2IH组比较,各项错误次数亦明显增加（P〈0.01）。4IHI组比4IH组RME、WME和TE次数减少,差异有统计学显著性（P〈0.01）。与对照组相比,2IH组和4IH组海马和前额皮层区的神经元凋亡增多,以4IH组凋亡明显（P〈0.05）;4IHI组凋亡较4IH组减少（P〈0.05）。2IH组和4IH组海马和前额皮层区腺苷受体A2a的mRNA和AMPK磷酸化蛋白的水平升高,mTOR磷酸化蛋白的水平下降,4IH组较2IH组改变明显（P〈0.05）。4IHI组较4IH组海马和前额皮层区的AMPK磷酸化蛋白水平下降,mTOR磷酸化蛋白水平升高（P〈0.05）。结论：慢性间歇性低氧诱导神经元凋亡,从而引起幼鼠学习记忆障碍,呈时间依赖性。慢性间歇性低氧上调腺苷A2a受体,激活海马和前额皮层区AMPK,抑制mTOR的活性,诱导神经元凋亡,进而影响幼鼠学习记忆能力。
