三种示踪技术标记人脂肪组织来源干细胞的对照研究

目的比较3种不同的荧光示踪技术标记人脂肪组织来源干细胞(ASCs)的效率,以寻找脂肪组织来源干细胞最佳的标记示踪方法。方法吸脂术获取人脂肪组织,胶原酶消化法后体外贴壁法培养,获得的长梭形细胞经鉴定为脂肪组织来源干细胞。分别使用5μl DiI,10μg/ml的脱氧尿苷BrdU及50 MOI的携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒进行标记,荧光显微镜观察不同时间点及不同代数的脂肪干细胞的标记效率及形态变化。结果成功分离获得ASCs,经鉴定其表达间充质干细胞表面标志,并能被成功实现成脂、成骨及成软骨的诱导分化。DiI标记ASCs 48 h后,荧光显微镜下观察可见100%细胞浆呈现红色荧光,胞核未染,保持了良好的正常形态。但细胞传代后荧光衰减迅速。10μg/ml BrdU标记ASCs 48 h后,90%的胞核呈绿色荧光,传代后胞核荧光逐渐衰减。携带GFP重组腺病毒转染ASCs 24 h后胞浆内即可见绿色荧光,5 d后90%以上的细胞呈现绿色荧光。反复传代后未见明显的荧光衰减。结论 DiI,BrdU及携带GFP的重组腺病毒均能有效的标记人脂肪组织来源干细胞。DiI示踪技术为细胞膜标记,BrdU为细胞核标记,两项技术均操作简单,但传代后衰减迅速,适合于短期标记示踪。携带GFP的腺病毒标记方法较为复杂,但反复传代后仍不衰减,适合于长期的标记示踪观察。

过氧化物酶染色、糖原染色与嗜异性抗体、EB-VCA-IgM抗体联合检测用于异型淋巴细胞诊断和鉴别诊断的探索

目的为幼稚型异型淋巴细胞和不典型单核型异型淋巴细胞的识别提供比较客观的鉴别方法，提高传染性单核细胞增多症的诊断率。方法糖原染色和过氧化物酶染色．结果幼稚型异型淋巴细胞糖原染色阳性，单核型异型淋巴细胞过氧化物酶染色阴性。结论异型淋巴细胞形态多样，糖原染色和过氧化物酶染色有助于识别幼稚型异型淋巴细胞和不典型单核型异型淋巴细胞。

巨幼细胞性贫血细胞形态学诊断分析

巨幼细胞性贫血是由于缺乏叶酸和维生素B12而引起的贫血，二者缺乏时可导致DNA合成障碍，出现了核发育迟缓、染色质结构异常，使细胞大而幼稚畸形。细胞学表现可涉及粒系细胞和巨核细胞，并且粒细胞寿命短、转换快，因此，叶酸和维生素B12不足更易表现为巨幼变。

44例特发性血小板减少性紫癜形态学特征分析

目的探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者巨核细胞的形态学改变及其对临床的诊断意义。方法观察44例ITP患者巨核细胞的数量,并对细胞胞浆量、颗粒、退化变性进行定量分析比较。结果ITP组的原、幼骨髓巨核细胞(MK)及颗粒型MK数明显高于对照组,产板型MK明显低于对照组(P<0.05);而裸核型MK数量的改变和对照组相比差别无统计学意义(P<0.05)。结论ITP组患者细胞浆量积分、退行性变积分均高于对照组,而颗粒量积分低于对照组,显示ITP时MK形成同时伴有胞浆量明显增加、颗粒减少及退化细胞增加的改变。

骨髓增生异常综合征形态学特点分析

目的 对MDS的骨髓象进行系统观察,为MDS的形态学诊断寻找有力的诊断依据.方法 用骨髓涂片经瑞氏染色后,进行骨髓细胞学形态分析.结果 粒、红、巨三系均有不同程度的病态造血表现,粒系主要以内外浆、颗粒粗大核浆发育不平为主,中性粒细胞分叶过多,红系主要以双核、多核为主,核浆发育不平及巨幼样改变为主,巨核系主要以多圆核为主.结论 MDS至少有两系以上的病态造血改变.

宫颈微偏腺癌八例病理形态学特征分析

目的探讨子宫颈微偏腺癌的临床特征、病理组织学形态、组织化学和免疫表性型特征、诊断及鉴别诊断。方法复习8例宫颈微偏腺癌的相关临床资料,并对其进行组织学观察及免疫组化染色、粘液组化。结果微偏腺癌患者白带增多呈水样,子宫颈肥大呈桶状,切面见子宫颈纤维肌层增厚,质地硬,有多个不规则微小腔囊形成。腺体大多呈不规则的囊状扩张、扭曲,有鸡爪样触角形成.肿瘤组织易侵犯脉管和神经组织。AB(pH2.5)/PAS染色证实,腺体腔内为混合性粘液,唾液酸粘液,硫酸粘液较少,中性粘液较多。CEA(8/8)阳性、vimentin、SMA浸润性腺体周围纤维母细胞/肌纤维母细胞(7/8)阳性。结论微偏腺癌是一种较罕见的、细胞学异型性极轻微、易被诊断为良性而生物学行为为恶性的宫颈腺瘤。AB/PAS阳性、CEA阳性及腺体周围反应性纤维母细胞/肌纤维母细胞增生为特征。

四例宫颈小细胞癌临床病理分析

目的探讨宫颈小细胞癌(SCCC)的临床病理特征、免疫组化特点。方法采用光镜、免疫组化对4例SCCC进行观察并复习相关文献。结果4例患者均表现为不同程度的不规则阴道出血。组织学显示肿瘤细胞小而圆、胞质少、核染色质深染、核仁不明显、分裂象活跃,可见坏死,肿瘤细胞呈片状浸润。其中2例合并鳞癌或腺癌。免疫组化示4例均表达至少2种神经内分泌标志(NSE、CHC-A、Syn)。3例患者2年内均死于肿瘤转移。结论宫颈小细胞癌是一种少见的高度恶性肿瘤,具有独特的病理形态特征。免疫组化对诊断SCCC有一定帮助。SCCC侵袭性强,早期即发生转移,预后极差。

子宫颈原发T细胞型淋巴瘤一例报告

患者53岁，因“阴道不规则流血3年，下腹坠痛伴阴道流水样分泌物半年”入院。患者曾患慢性宫颈炎3年，近2 mo阴道流血，逐渐加重，曾抗炎、服中药治疗，疗效不佳。宫颈涂片检查，诊断为重度不典型增生。妇科检查：宫颈弥漫性增大、糜烂IV度、质脆、接触性出血，阴道被增大的宫颈填塞，穹窿不能查及。体查：生命体征平稳，中度贫血貌，全身浅表淋巴结未扪及肿大，心肺（-），腹平软，

HBV血清学标志物结合HBV-DNA定量检测的临床意义

目的了解乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量与HBV感染不同血清学标志物之间的关系及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测696例乙型肝炎病毒感染者的HBV血清学标志物,其中检测结果为大三阳(即乙肝表面抗原、e抗原和核心抗体阳性)者有223例,小三阳(即乙肝表面抗原、e抗体和核心抗体阳性)者有473例。同时采用PCR-荧光探针法定量检测HBV-DNA,其检测下限为5.0×102IU/ml。结果 ELISA结果为大三阳组的HBV-DNA定量平均对数值为7.03±0.85,即(1.08±2.53)×107IU/ml,其中2例的定量结果阳性率为99.10%。小三阳组的HBV-DNA定量平均对数值为3.84±0.98,即(6.95±2.53)×103IU/ml,其中HBV-DNA定量阳性率为39.95%。大三阳组与小三阳组HBV-DNA定值和阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV血清学标志物结合HBV-DNA定量检测对于评价乙型肝炎病毒复制水平、传染性具有重要的临床意义。

Wnt10b对体外培养的人毛乳头细胞诱导毛囊生成能力的影响

目的:探讨Wnt10b对体外长期培养的人毛乳头细胞诱导毛囊生成能力的影响作用。方法:将人毛乳头细胞在体外传代培养到第8代后,加入人重组蛋白Wnt10b共培养,通过免疫荧光染色检测人毛乳头细胞的β-catenin表达,Real-time QPCR检测与毛乳头细胞诱导能力相关的特异性标记物碱性磷酸酶(ALP)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达,以及ALP染色检测Wnt10b对人毛乳头细胞的作用。结果:Wnt10b能够通过经典的Wnt/β-catenin信号通路作用于体外长期培养的人毛乳头细胞,上调人毛乳头细胞特异性标记物ALP和IGF-1的表达,从而维持人毛乳头细胞的诱导能力。结论:Wnt10b能够通过上调特异性标记物ALP和IGF-1的表达来维持体外长期培养的人毛乳头细胞的毛囊诱导能力。

外周血幼稚淋巴细胞、染色体、E2A/PBX1、TEL/AML1、MLL融合基因联合检测用于儿童淋巴细胞白血病的早期诊断

目的探讨外周血幼稚淋巴细胞、染色体、E2A/PBX1、TEL/AML1、MLL融合基因联合检测用于儿童淋巴细胞白血病早期诊断的临床意义。方法对我院2012年8月至2017年6月门诊及住院儿童外周血涂片初查异常淋巴细胞的病例进行外周血幼稚淋巴细胞形态学检查,对其中高度怀疑急性淋巴细胞白血病的部分患者抽取静脉血检查染色体及TEL/AML1、E2A/PBX1、MLL融合基因。结果 220例病例中有24例外周血涂片可见特殊类型的"白血病型"幼稚淋巴细胞,这种细胞在外周血细胞中比例范围在1%~38%,其中,比例范围在1%~10%的患者有3例,比例范围在11%~20%的患者有11例,比例范围在21%~38%的患者有10例,这24例患者后经骨髓检查验证除比例在1%~10%有2例为非白血病外,其余22例均为急性淋巴细胞白血病。我们对比例在11%~38%的21例患者抽取静脉血检查染色体及TEL/AML1、E2A/PBX1、MLL融合基因,结果显示有2例染色体核型异常、5例TEL/AML1阳性,2例E2A/PBX1阳性、1例MLL阳性。结论外周血幼稚淋巴细胞、染色体、E2A/PBX1、TEL/AML1、MLL融合基因联合检测对儿童淋巴细胞白血病的早期诊断及提示性诊断有一定的临床意义,这种无创的检查模式相比经典有创的骨髓检查来说值得临床推广借鉴。

CD4~＋CD25~＋FoxP3~＋免疫调节细胞在不同免疫应答状态乙型肝炎疫苗接种者中的表达(英文)

目的:通过对乙型肝炎病毒疫苗接种后不同免疫应答人群CD4+CD25+T调节细胞(T regulatorycells,Tregs)及FoxP3 mRNA的表达及细胞因子分泌的检测,探讨乙型肝炎病毒疫苗接种后免疫应答与免疫调节细胞和细胞因子之间的内在联系。方法:采集不同反应人群(应答组18例,无应答组22例,对照组10例)全血,流式细胞术对外周血单核细胞的表面标志物CD4和CD25进行检测;实时荧光定量PCR检测人外周血单个核细胞FoxP3 mRNA的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测外周血单个核细胞经植物血凝素(phytohe-magglutinin,PHA)和乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)刺激后IL-4,IL-12,IL-18,IFN-γ的产生水平。结果:无应答组外周血CD4+CD25+Tregs占CD4+T细胞的百分比明显高于应答组(P<0.05),但低于对照组(P<0.01)。PHA和HBsAg刺激前后,无应答组FoxP3的表达均高于应答组和对照组(P<0.01或P<0.05)。各组外周血单个核细胞经PHA和HBsAg刺激后,无应答组的IFN-γ浓度明显低于应答组和对照组(P<0.05)。各组外周血单个核细胞经PHA和HBsAg刺激后,IL-18,IL-4和IL-12的浓度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CD4+CD25+FoxP3+Tregs在一定程度上参与了乙型肝炎疫苗接种应答的负性调控;乙型肝炎病毒疫苗接种后无应答可能与IFN-γ分泌不足有关。

集装箱正面吊运车防倾覆过载保护装置动力学建模与分析

建立港口正面吊运车防倾覆过载保护装置的ADAMS动力学模型,并作仿真分析。得到了连锁与下锁接触距离,锁钩接触力、接触力矩,后耳板与连锁铰接点处橡胶衬套位移、受力,连锁、前耳板各自铰点处的约束力,连锁钩点、下锁钩点位置等随时间变化的曲线。所得结果可作为防倾覆过载保护装置优化设计的参考依据。

56例儿童外周血幼稚样淋巴细胞的临床意义分析

目的探讨儿童外周血出现幼稚样淋巴细胞的各种临床意义。方法对我院门诊及住院患儿外周血幼稚样淋巴细胞的临床资料进行分析。结果 56例病例最后确诊为恶性疾病14例,占25%;非恶性疾病42例,占75%。结论外周血幼稚样淋巴细胞增高幅度与疾病恶性程度无明显相关性。当外周血出现幼稚样淋巴细胞时须结合临床随诊观察和各种实时必需的实验室检查,综合分析,尽早确诊,避免误诊漏诊,提高诊断率。

原发性闭角型青光眼房水蛋白质组学研究

目的 分析原发性闭角型青光眼(PACG)患者房水蛋白质组表达,探寻PACG潜在生物标志物、分子机制与治疗靶点,为临床诊疗提供思路。方法 采用病例对照回顾性研究策略,纳入2020年6—12月在电子科技大学附属医院·四川省人民医院进行手术治疗的10例PACG合并白内障患者和10例单纯白内障患者进入研究。抽取患者术中房水,基于高分辨质谱非数据依赖型采集(DIA)模式分析并鉴定PACG合并白内障组与白内障组房水中蛋白质组,比较两组间房水蛋白质组差异表达,并通过基因本体富集(GO富集)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集方法进一步分析差异蛋白质的功能。结果 在PACG合并白内障组与白内障组房水样本中,共鉴定出449个蛋白质,其中53个蛋白质差异有统计学意义(P<0.05),包含49个下调蛋白质及4个上调蛋白质。GO富集结果发现,差异蛋白主要来自中间丝细胞骨架、中间丝、聚合细胞骨架纤维等部位;差异蛋白的分子功能主要集中在细胞骨架组成及结构分子活性;主要参与了细胞角化、角质细胞分化、表皮细胞分化和表皮细胞发育等生物过程。使用KEGG富集方法将差异蛋白富集到了包括补体及凝血级联、过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路、胆固醇代谢等20条不同通路中,其中补体凝血级联是KEEG通路富集最明显的一条通路。结论 本研究在PACG患者房水中发现,角质形成细胞激活标志蛋白(KRT17/KRT6/KRT16)明显下调,提示角质细胞激活及分化能力下调,与高眼压患者的角膜变薄存在潜在关联性,而补体级联效应的激活与青光眼视神经损伤息息相关。因此,角蛋白(KRT)家族蛋白有作为评估PACG患者角膜分化更新能力的标志物的潜力,抑制补体激活是PACG的潜在治疗靶点。

四川成都地区成年人亚临床甲状腺功能减退症患病率调查及其尿碘水平分析

目的调查四川成都地区成年人亚临床甲状腺功能减退症(SH)患病率并测定其尿碘水平,探讨成都地区成年人碘营养状态与SH的关系。方法以华西医院2017年53499例成年体检人群为研究对象,调查四川成都地区成年人SH患病率,并比较不同性别与年龄段患病率;同时分别随机抽取140名SH患者和140名健康对照者,比较两者尿碘水平。结果四川成都地区成年人2017年SH总体患病率为15.7%,其中女性患病率为20.7%,高于男性的12.2%(P<0.001)。同时,随着年龄增长,人群SH患病率逐渐增加(P<0.001);SH患者尿碘水平明显高于健康对照者(P<0.001),以碘超适宜量者和碘过量者为主。结论四川成都地区成年女性SH患病率高于男性,SH患病率随着年龄增加逐渐增多。此外,碘营养过剩与SH有关。

橡胶混凝土耐热性能及抗碳化性能研究

为了研究橡胶混凝土的耐热性能和抗碳化性能,通过试验研究了橡胶粉掺量和受热温度对混凝土质量损失和抗压强度的影响,以及橡胶粉掺量和碳化时间对碳化后混凝土碳化深度、和强度指标的影响。试验结果表明,随受热温度的升高和橡胶粉掺量的增大,质量损失逐渐增大,而抗压强度逐渐减小,其中当受热温度大于600℃时橡胶混凝土的耐热性能大幅降低;各橡胶粉掺量下抗压强度和受热温度之间有很好的线性相关性,其中加入橡胶粉后︱A︱增大,混凝土温度敏感性增强。橡胶粉对碳化深度、碳化后抗压强度和抗折强度的影响规律不明显,当掺量小于10%时,混凝土碳化主要发生在14 d之后,而当掺量大于20%时碳化从7 d开始加速;橡胶粉掺量越多,碳化后混凝土折压比越大,混凝土弯曲韧性越好。

水泥乳化沥青胶浆及混合料性能研究

为了研究水泥乳化沥青胶浆及混合料的性能,研究首先对水泥与乳化沥青的微观反应机理展开研究,其次对不同水泥用量与乳化沥青用量的水泥乳化沥青胶浆的粘度性能进行试验,最终对水泥乳化沥青混合料的路用性能进行验证。试验表明,水泥加入乳化沥青,在破乳之后水泥及水化物与沥青膜形成了网状的结构体系,克服了单纯乳化沥青破乳后的分散。水泥乳化沥青胶浆的粘度较强,混合料的强度性能和路用性能随着乳化沥青用量增大而降低,随着水泥用量增大而提高。

重塑膨胀土细观裂隙参数与抗剪强度的关系分析

对干湿循环作用后的重塑膨胀土进行CT试验和直剪强度试验,运用MATLAB软件处理CT图像并提取出膨胀土细观裂隙参相关数进行定量分析,探讨了膨胀土细观裂隙参数和抗剪强度之间的关系。结果表明：CT图像展示了膨胀土细观裂隙产生和发展,裂隙数目的增加并最终发育成细观裂隙网络的过程;第1~2次干湿循环次数对土样裂隙发育影响显著,决定了细观裂隙发育的最终形态;土体细观裂隙的发育程度对土体的抗剪强度重要的影响,可通过裂隙率、分形维数、CT数与抗剪强度参数之间的强相关性,对土体结构强度进行预测。