多种教学方法结合在研究生临床药理学教学中的实践

目的:为提高临床药理学教学质量,探讨多种教学方法结合在研究生临床药理学教学中的应用效果。方法:以我院药学专业学位硕士研究生为研究对象,2019级对照组,2020级为试验组。对照组采用传统教学法,试验组采用多种教学方法结合的教学方式。结果:试验组学生期末考试成绩高于对照组,且学生对此教学方式评价良好。结论:多种教学方法结合在研究生临床药理学教学中取得了较好的效果。

PBL联合CBL教学用于《医学免疫学》基础课程中的价值研究

目的 探讨《医学免疫学》基础课程教学应用PBL联合CBL教学的实际价值。方法 选择本院临床医学专业2016级学生100名,将所有学生以随机数字表法分成PBL联合CBL教学组、对照组两组,每组50名。PBL联合CBL教学组学生采用PBL+CBL的教学方式,对照组学生则使用传统的LBL教学方式,针对两组学生教学情况进行对比分析。结果 两组学生的考试成绩主要从基础知识的掌握情况、病例分析得分以及总成绩三个主要方面来展开对比分析,PBL联合CBL教学组均显著好于对照组,对比差异显著(P<0.05)。两组学生在主动学习能力提升、总能归纳能力增强、学习兴趣以及学习积极性提升情况、分析以及处理问题能力提升、组织能力与沟通能力等方面的提升情况对比,PBL联合CBL教学组均显著好于对照组,对比差异显著(P<0.05)。结论 将PBL+CBL教学方式应用于临床专业免疫基础课程的教学当中,不仅能够帮助学生提升考试成绩,而且能够在很大程度上帮助学生提升沟通、总结归纳、梳理、自主学习、处理问题等方面的能力,值得进行进一步推广应用。

基于转录组测序技术研究高原低氧对小鼠脾脏组织的影响

目的:利用转录组学测序技术探究免疫系统在高原低氧胁迫适应过程中相关基因的表达及响应的分子机制。方法:本研究在高、低海拔环境分别饲养C57BL/6小鼠30 d,取脾脏组织利用RNA-Seq进行转录组测序,将得到的差异基因(DEGs)进行GO和KEGG富集分析,并通过荧光定量PCR验证测序数据的准确性。结果:与平原常氧组相比,共富集到4218个DEGs(P<0.05)。其中,ANXA1、S100A8、S100A9和HSPB1等基因显著富集;GO结果表明DEGs主要富集于B细胞激活、免疫球蛋白复合体和抗原结合分类,且JAK-STAT及NOD样受体信号通路为显著富集通路。结论:免疫系统响应高原低氧胁迫的转录调控分子可能致使机体内部免疫调节和炎症反应失衡,为相关高原病的病因学探究提供了新的理论依据。

基于转录组学研究高原低氧胁迫对小鼠肾脏能量代谢相关通路的影响机制

目的:基于转录组测序技术研究小鼠肾脏组织在适应高原低氧胁迫过程中的基因表达和相应的分子机制。方法:在海拔4200 m(高原肾脏实验组,high⁃altitude kidney test group,HKT)和海拔400 m(平原肾脏对照组,plain kidney control group,PKC)的环境下分别饲养C57BL/6小鼠,30 d后无菌取出小鼠肾脏组织用高通量测序技术(RNA⁃sequencing,RNA⁃Seq)进行转录组测序。将HKT组和PKC组的测序结果进行基因本体数据库(gene ontology,GO)注释分析和京都基因和基因组百科全书数据库(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,并通过实时荧光定量PCR(real⁃time quantitative PCR,RT⁃qPCR)实验验证测序结果的可靠性。结果:相比于PKC组,HKT组中1349个基因表达上调(P<0.05),1658个基因表达下调(P<0.05)。其中催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)、载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)、载脂蛋白A4(apolipoprotein A4,APOA4)、细胞色素C(cytochrome C somatic,CYCS)、酰基辅酶A氧化酶2(acyl⁃coenzyme A oxidase 1,ACOX2)、细胞色素C氧化酶亚基5A(cytochrome C oxidase subunit 5A,COX5A)、细胞色素C氧化酶亚基5B(cytochrome C oxidase subunit 5B,COX5B)、细胞色素C氧化酶亚基7A(cytochrome C oxidase subunit 7A,COX7A)和热休克蛋白β⁃1(heat shock proteinβ⁃1,HSPB1)等基因显著富集。GO注释分析和KEGG富集分析结果显示,差异基因显著富集在细胞器内膜、线粒体内膜和线粒体蛋白复合物等部位,此外过氧化物酶体、氧化磷酸化、产热、碳代谢以及三羧酸循环等通路显著富集。结论:高原低氧刺激可能通过影响机体的能量代谢相关通路致使机体氧化应激、炎症反应和脂质代谢失衡。

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂

阐述了血管紧张素转化酶抑制剂的作用机理和血管紧张Ⅱ受体的类型及分布，血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂洛沙坦等的作用特点及发展前景。

解郁肝舒胶囊的保肝作用

目的研究解郁肝舒胶囊对四氯化碳(CCl4)、苯乙烯、乙醇和醋氨酚所致小鼠肝损伤的影响。方法用解郁肝舒胶囊,连续ig7d,末次给药后,ip致肝损伤的化学物质,禁食16h后,测小鼠ALT、AST等指标。结果解郁肝舒胶囊可使CCl4等所致小鼠的ALT和AST升高值下降。结论该胶囊对CCl4、苯乙烯、乙醇和醋氨酚所致小鼠的肝损伤有明显的保护作用。

柚皮苷的分离提取及药理作用研究进展

本文对柚皮苷的提取方法及其在医学中的应用进展进行了综述。

人血浆中丹参酮IIA的反相高效液相色谱检测

目的建立血浆中丹参酮IIA的检测方法。方法采用RP-HPLC法测定人血浆中的药物浓度,色谱柱为LichrospherC18(4.6×250mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰乙酸-三乙胺(75∶25∶0.3∶0.3v/v)。结果在0.1～6mg.L-1范围内丹参酮IIA峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9995),最低检测限为0.01mg.L-1,绝对回收率为88.5%～97.9%,准确度为95.1%～106.3%,日内RSD为3.4%～6.9%,日间RSD为5.5%～10.3%。结论本测定方法灵敏、准确、简便,可作为丹参酮IIA的药代动力学研究方法。

心脑欣治疗心绞痛耐药性的研究

目的:本文探讨心脑欣治疗心绞痛能否产生耐药性问题。方法:分A、B两组,每组20例,治疗8周,A组服用心脑欣1.0gBid,B组服用消心痛10mgdd,每周观察疗效变化。结果:在2周内两组疗效无关异(P>0.05),4至6周时,A组疗效保持平稳,B组则逐渐下降,两组相比P<0.05。8周A组疗效为95%,B组降为655。A组明显优于B组p<0.01,心电图A组为80%,B组只为50%,两组差异性非常显著P<0.01。表明心脑欣长期服用,疗效稳定,不易产生耐药性。

世居高原藏族健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白、红细胞结合率测定

目的测定世居高原藏族健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白、红细胞结合率。方法取世居高原藏族健康男性志愿者口服磺胺甲噁唑后1.5、12和48 h时间点血样,抗凝,一半保留全血,另一半分离血浆,超率法测定蛋白结合率。红细胞结合率依据红细胞压积数、血浆浓度和全血药物浓度计算而得。药物浓度均采用反相高效液相色谱法测定。结果世居高原健康男性志愿者体内磺胺甲噁唑的蛋白、红细胞结合率分别为70.47%、8.29%。结论世居高原藏族健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白结合率显著高于高原汉族,但红细胞结合率略低于高原汉族。*

八味沉香散对心肌缺血大鼠的保护作用

目的观察八味沉香散对异丙肾上腺素所致实验大鼠心肌损伤的保护作用。方法给予SD大鼠po八味沉香散,连续10 d,第8天起ip异丙肾上腺素5 mg.kg-1,qd,连续3 d。第1次注射异丙肾上腺素后,记录Ⅱ导联心电图。末次注射异丙肾上腺素24 h,后测定心肌梗死范围。结果八味沉香散组的心电图ST段移位、T波抬高、心率变化值和心肌梗死范围明显低于生理盐水组。结论八味沉香散对异丙肾上腺素引起的心肌缺血损伤有保护作用。

高原低氧环境对小鼠巨噬细胞杀伤活性及分泌IL-6、TNF-α的影响

目的:通过建立高原低氧环境的小鼠模型,研究低氧条件对机体固有免疫细胞巨噬细胞(M_φ)吞噬杀伤功能的影响。方法:分别将小鼠暴露于海拔4 200 m、2 200 m和400 m的不同环境30 d后:(1)流式细胞仪检测小鼠腹腔M_φ对FITC标记的金黄色葡萄球菌的吞噬能力;(2)双乙酰基二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针法检测M_φ的呼吸爆发功能;(3)ELISA法检测小鼠M_φ培养上清中NO稳定氧化代谢产物亚硝酸盐(NO_2^-)的水平;(4)ELISA法检测小鼠M_φ培养上清中的IL-6、TNF-α的释放水平。结果:低氧暴露30 d后,海拔4 200 m和2 200 m的低氧状态下,小鼠腹腔M_φ的吞噬能力、呼吸爆发水平、NO的释放水平明显低于平原对照组(P<0.05),培养细胞上清中的IL-6、TNF-α的浓度明显升高(P<0.05)。结论:低氧暴露30 d可降低M_φ的吞噬能力和氧依赖杀伤功能,升高IL-6、TNF-α的分泌水平,进而影响机体M_φ的固有免疫应答能力。

大鼠血浆中双嘧达莫的反相高效液相色谱法检测

目的：建立大鼠血浆中双嘧达莫的检测方法。方法 采用RP—HPLC法测定大鼠血浆中的药物浓度，色谱柱为Lichrospher C18（4．6×250mm，5μm），流动相为甲醇-水-冰乙酸（75：25：0.5v／v）。结果在0．1～8mg／L—1范围内双嘧达莫峰面积与浓度线性关系良好（r=0．9995），最低检测限为0．01mg／L—1，绝对回收率为85．8％-94．3％，准确度为94．9％-104．7％，日内RSD为2．2％～6．6％，日间RSD为5．9％～11.4％。结论本测定方法灵敏、准确、简便，适合于双嘧达莫的药代动力学研究。

高原低氧暴露小鼠脾脏T淋巴细胞数量减少且免疫活性下降

目的研究高原低氧条件下,小鼠脾脏T淋巴细胞亚群及其功能的改变。方法分别在400 m、2200 m和4200 m的不同海拔条件下饲养小鼠30 d后,ELISA检测脾细胞培养上清中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)的含量;MTT法检测小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖能力;流式细胞术观察小鼠脾脏T淋巴细胞亚群的变化。结果高海拔低氧暴露30 d后,与对照组(海拔400 m)相比,4200 m和2200 m实验组小鼠脾脏指数明显增高,4200 m低氧组小鼠脾脏指数与2200 m低氧组相比也显著增加;小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ的含量明显降低,而IL-4的水平未发生明显变化;脾脏T淋巴细胞增殖能力明显降低,同时,4200 m低氧组与2200 m低氧组相比,其T细胞增殖能力也显著下降;脾脏CD3^+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞数显著下降,其中,CD4^+T细胞数较CD8^+T细胞数下降明显,另外,4200 m低氧组与2200 m低氧组相比,CD3^+T细胞、CD4^+T细胞数也明显减少。结论海拔4200 m和2200 m高原低氧暴露30 d后,小鼠脾脏T淋巴细胞数目减少且增殖能力降低,IFN-γ水平降低。

Thl/17细胞功能及分化过程的生物信息学分析

目的利用生物信息学技术探究1/17型辅助T(1M/17)细胞的功能及其分化过程。方法采用高通量基因表达数据库(GEO)中包含来源于健康人体IM7细胞和Thl/17细胞基因表达数据的基因芯片数据集(GSE104021)进行生物信息学分析。以1W7细胞为对照,采用R语言软件分析1W7细胞和U1/17细胞之间的差异表达基因,以此探究Thl/17细胞发挥功能的主要效应分子。后通过R语言软件对差异表达基因进行基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。最后选用GO分析中被富集到目标生物过程中的基因,进行蛋白质相互作用网络(PPI)分析,探索Thl/17细胞的分化过程。结果差异表达基因分析结果显示,与Thl7细胞相比,Thl/17细胞中低表达基因为白细胞介素17A(IL-17A)和CC趋化因子受体4(CCR4);高表达基因为含卷曲螺旋域3(CCDC3)、CC趋化因子配体4(CCL4)、集落刺激因子2受体B亚单位(CSF2RB)、CCL5、γ干扰素(IFNG)和上皮基质相互作用分子1(EPSTI1)O GO分析中细胞组分分析结果显示,这些差异基因表达产物主要定位于细胞膜胞外侧和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)受体复合物中;生物过程分析结果显示差异基因表达产物参与上调白细胞介素23(IL-23)产生,趋化因子介导的信号通路和上调自然杀伤(NK)细胞趋化性;分子功能分析结果显示差异表达基因表达产物具有CC趋化因子受体5(CCR5)结合活性,细胞因子活性和γ干扰素(IFN-7)受体结合活性。KEGG分析结果显示差异基因被富集到细胞因子-细胞因子受体相互作用,类风湿性关节炎,趋化因子信号通路,炎症性肠病等通路中。GO分析结果显示,差异基因IL-17A和IFNG被富集到能够上调IL-23产生的生物过程中。PPI结果显示:IL-17A和IFNG具有调节细胞因子产生和调节髓样白细胞分化的生物功能。结论生物信息学分析结果显示Thl/17细胞高表达基因CCL4、CSF2RB,CCL5、IFNG和EPSTI1编码的蛋白产物为Thl/17细胞潜在的功能效应分子。Thl/17产生IFN-7和IL-17A,作用于来源于髓样白细胞的巨噬细胞和树突状细胞(DC),促进巨噬细胞和DC分化并产生IL-23O IL-23作用于Thl7细胞,使其转分化为Thl/17细胞。

不同海拔高原环境下生存的小鼠脾脏T淋巴细胞亚群变化

目的观察不同海拔高原环境下生存的小鼠脾脏T淋巴细胞亚群变化。方法分别在400 m、2 200 m和4 200 m的不同海拔条件下饲养小鼠30 d,用流式细胞术(FCM)检测小鼠脾脏T淋巴细胞亚群分布及其表面活化共刺激分子的变化。结果海拔4 200 m和海拔2 200 m低氧暴露30 d后,小鼠脾脏CD3^+、CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例较对照组(海拔400 m)显著下降(P均<0.05),其中,CD4^+T细胞数较CD8^+T细胞数下降水平高;CD4^+CD28^+T细胞比例也明显减少(P<0.05),而CD8^+CD28^+T细胞比例无显著变化。此外,海拔4 200 m低氧组与海拔2 200 m低氧组相比,小鼠脾脏CD3^+、CD4^+、CD4^+CD28^+T细胞数均明显下降(P<0.05)。结论高原环境饲养可以导致小鼠脾脏CD4^+和CD8^+T淋巴细胞数量减少,CD4^+T淋巴细胞活化水平显著降低。海拔越高作用越明显。

低氧对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及氧依赖杀伤功能的影响

目的探讨低氧对小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)吞噬杀伤能力,IL-6、TNF-α分泌功能的影响。方法 (1)用流式细胞仪检测小鼠腹腔Mφ对FITC标记金黄色葡萄球菌的吞噬能力;(2)用双乙酰基二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针法检测Mφ呼吸爆发功能;(3)用ELISA试剂盒检测小鼠Mφ培养上清中的NO浓度;(4)用ELISA试剂盒检测小鼠腹腔Mφ培养上清中的IL-6、TNF-α浓度。结果低氧暴露30 d后,模拟海拔5000 m实验组小鼠与常氧对照组(海拔400m)相比,小鼠腹腔Mφ吞噬能力、呼吸爆发能力及NO释放量显著降低(P<0.05),细胞培养上清中的IL-6、TNF-α的浓度明显升高(P<0.05)。结论模拟海拔5000 m低氧暴露30 d后,Mφ的吞噬能力和氧依赖杀伤功能降低,Mφ分泌IL-6、TNF-α的水平升高。说明低氧在一定程度上降低Mφ抗原清除能力并引发炎性反应。