流感病毒H5N1的小RNA表达谱研究

H5N1病毒是一种对人高致死性的流感病毒亚型。为探索H5N1病毒高毒性原因,对H5N1病毒感染细胞开展了病毒源小RNA研究。结果显示,H5N1感染细胞中病毒源小RNA比例高;H5N1病毒小RNA的分布没有末端偏好;病毒源小RNA中存在1条定位于颈环结构的sRNA;H5N1病毒NS1蛋白5个关键氨基酸缺失可能与H5N1、H1N1小RNA谱的差异有关。它们为揭示H5N1病毒的高致死性机制提供了重要遗传基础,为高致死性流感的预防提供了参考靶点。

甲型流感病毒流行毒株检测和分型基因芯片的研制

【目的】研制一种可同时对甲型流感病毒H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2等5种流行亚型进行检测和分型的基因芯片。【方法】根据National Center for Biotechnology Information中Influenza Virus Resource数据库,针对H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2等5种亚型甲型流感病毒的HA和NA基因设计46条特异性寡核苷酸探针和1条质控探针,点制成基因芯片。利用通用引物扩增流感病毒HA和NA基因,使用Klenow酶对扩增产物进行荧光标记和片段化,将标记后产物和芯片杂交,清洗、扫描后根据荧光信号判定检测结果。用18株不同种属来源的甲型流感病毒分离毒株和186份咽拭子对芯片特异性、敏感性和临床应用进行初步评价。【结果】所有18株分离毒株均能被芯片准确检测并分型,芯片检测灵敏度能达约1×104个病毒基因拷贝。同时8份咽拭子检测结果为H1N1阳性,4份咽拭子为H3N2阳性。【结论】研究表明该芯片具有较高的特异性和灵敏度,可为甲型流感病毒的监测提供一种有效的方法。