新铂类药物双环铂对8种结肠癌耐药细胞的化疗敏感性分析

目的用双环铂对8种耐奥沙利铂或伊立替康结肠癌耐药细胞及其原代细胞作化疗敏感性研究,为扩大该新药的临床应用范围,给耐药结肠癌患者提供更多化疗选择奠定基础。方法将8种耐奥沙利铂或伊立替康结肠癌耐药细胞系及其原代细胞系-COLO320与COLO320/OHP,COLO320与COLO320/CPT,SW620与SW620/OHP,SW620与SW620/CPT,SW480与SW480/OHP,SW480与SW480/CPT,LOVO与LOVO/OHP,LOVO与LOVO/CPT配对培养于96孔板。按从低到高的浓度加入双环铂作用一段时间后做3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)细胞毒性试验,计算各原代及耐药细胞的IC50、耐药指数及临床用药浓度下对各耐药细胞的抑制率,分析双环铂对上述耐药细胞的疗效。结果 8种结肠癌耐药细胞对双环铂的耐药指数均为1.10～2.46,而各细胞系原有耐药指数在10.16～25.87,且双环铂对8种中的7种耐药细胞均敏感,对其中1种细胞系具有高度化疗敏感性,3种中度敏感,3种低度敏感,1种不敏感。结论多数耐奥沙利铂/伊立替康的结肠癌耐药细胞(7/8)对双环铂具有不完全交叉耐药性,可以考虑将其作为临床耐药结肠癌患者的另一化疗选择。

Rac1b与恶性肿瘤关系的研究进展

Ras相关C3肉毒梭菌毒素1b(Rac1b)是Ras相关C3肉毒梭菌毒素1(Rac1)的一种剪接变异体,游走循环于GTP结合和GDP结合状态之间。Rac1b具有较低的GTP酶活性,且不能与GDP黏附,这就导致Rac1b活性的GTP结合状态居于主导地位,细胞的各项生命活动处于持续激活状态,从而引起细胞恶性转化。目前已有大量研究证实,Rac1b与肿瘤的失控增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为密切相关。

超声诊断右侧睾丸横过异位一例

患儿男,4 d,本院顺产,出生一般情况可,于出生后3 d,因新生儿黄疸转入新生儿科,临床医师体格检查发现右侧阴囊内未扪及睾丸,左侧阴囊内可扪及一大小约4 cm×3 cm包块。

经阴道超声对异位妊娠的诊断价值

异位妊娠是妇产科常见急腹症之一，发病率约1％，发病早期常无明显临床症状，临床诊断较困难，一旦发生破裂、急性大出血，可危及患者生命。因此早期诊断至关重要，近年来随着超声技术迅速发展．高分辨率经阴道超声对异位妊娠的准确诊断提供_『可靠的依据，尤其对临床症状不典型者，为治疗争取了宝贵的时间。

猪伪狂犬病的综合防控措施

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒感染而诱发的多种家畜易感以发热、奇痒、繁殖障碍等为典型症状的高度接触性疾病。文章自流行病学、典型症状、剖检病变等等几方面,着重介绍猪伪狂犬病的发生情况,同时,就综合防治此病做要点性阐述,以供参考和借鉴。

新课改背景下的数学教学生活化研究

强调学生用数学的眼光从现实生活中搜集数学问题、探索数学奥秘,以及主动运用数学知识解释生活现象、解决生活中的实际问题。从教材以及学生的实际出发,以学生熟知的生活经验为题材,创造性地使用教材,依据教学内容创设教学情境,使学生感到数学就在自己的身边,在浓厚的兴趣中展开对数学问题的探究。

母猪产后少乳及防治

母猪产后少乳,多数发生分娩后3天。母猪无乳、少乳的诱因很多,大致可细分为生理性、病理性和营养性三类。分析致病因,阐述产后少乳症状,提出综合性防治措施,以供参考和借鉴。

Rac1b小干扰RNA对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的观察Rac1b小干扰RNA(Si-Rac1b)对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 Si-Rac1b在lipofectamineTM2000介导下转染筛选出的Rac1b高表达的结直肠癌细胞SW1116,分别从RNA和蛋白水平检测转染细胞Rac1b的表达,采用细胞增殖实验,损伤刮擦实验,体外侵袭实验(Trans well小室)和hoechst方法分别检测Si-Rac1b转染细胞的增殖潜力,迁移与侵袭能力和凋亡的变化。结果成功转染Si-Rac1b的肿瘤细胞,Rac1b mRNA和蛋白表达都明显下调,而Rac1 mRNA和蛋白表达无明显变化;Si-Rac1b可明显抑制结直肠癌细胞SW1116的增殖、迁移和侵袭均并能促进SW1116细胞的凋亡。结论 Si-Rac1b能够部分逆转结直肠癌细胞SW1116的恶性生物学行为。

蛋白酶体抑制剂MG132对RhoA诱导的肿瘤血管生成的抑制作用的研究

目的探讨RhoA对血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和微血管生成的影响以及蛋白酶体抑制剂MG132对RhoA调控作用的影响。方法将组成性激活的RhoA的真核表达质粒,在脂质体介导下转染胃癌细胞系MKN-45,经G418筛选出阳性单克隆并用Western blot检测是否稳定转染成功;应用ELISA检测不同细胞培养上清中VEGF的含量;建立组成性激活RhoA的荷瘤鼠模型,并用MG132治疗并观察治疗效果;用免疫组化染色方法检测RhoA及MG132对肿瘤细胞表达HIF-1α、VEGF及CD31的影响。结果组成性激活RhoA的稳定转染细胞株构建成功;组成性激活的RhoA促进VEGF的分泌,而MG132抑制VEGF的分泌;组成性激活的RhoA促进肿瘤的生长,差异有统计学意义(P<0.05),MG132抑制肿瘤的生长,差异有统计学意义(P<0.01);组成性激活的RhoA促进HIF-1α、VEGF及CD31的表达,MG132抑制HIF-1α、VEGF及CD31的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MG132通过抑制RhoA对HIF-1α、VEGF及CD31的上调来影响肿瘤血管的生成。

小G蛋白Cdc42对人结肠癌奥沙利铂耐药细胞多药耐药性的影响

目的研究细胞分裂周期蛋白(cell division cycle 42,Cdc42)对人结肠癌奥沙利铂耐药细胞系多药耐药性的影响。方法 Western blot检测人结肠癌SW480、Colo320细胞与已成功构建的奥沙利铂耐药细胞系SW480/L-OHP、Colo320/L-OHP细胞中Cdc42的表达,用LipofectamineTM2000介导重组质粒pDEST26-His-Cdc42转染入Cdc42表达相对较低的亲代细胞系,介导Cdc42 siRNA转染入Cdc42表达相对较高的耐药细胞系。Western blot和RT-PCR检测转染是否成功。利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测各细胞系5氟尿嘧啶、顺铂、奥沙利铂,紫杉醇,依托泊苷,长春新碱,阿霉素等结直肠癌常用化疗药物的药物敏感性,计算出各种药物的半数致死浓度(IC50)。行Western blot检测不同细胞系P-gp、MRP1蛋白表达水平。结果在耐药细胞系中Cdc42的表达高于亲代细胞系。成功转染外源Cdc42基因的亲代细胞CCK-8(CCK-8)法检测对多种化疗药物的IC50以及P-gp、MRP1蛋白表达水平高于未转染细胞系。成功转染Cdc42 siRNA的耐药细胞CCK-8法检测对多种化疗药物的IC50显著低于耐药细胞系。结论 Cdc42与人结肠癌细胞耐药性形成有关,Cdc42可增强人结肠癌细胞的多药耐药性的形成。提示Cdc42可能成为降低结肠癌细胞多药耐药性的分子靶点。

RhoE对cd44基因启动子的转录活性及大肠癌细胞系恶性生物学行为的影响

目的研究RhoE对cd44基因启动子的转录调控,并探讨RhoE对裸鼠体内成瘤性的影响。方法采用PCR技术从人胚肾HEK293细胞中扩增出cd44启动子,并将其插入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic中,经测序确定所扩增的DNA序列,并将其转染入SW480及LoVo细胞中监测其活性。将pcDNA3.1-RhoE和pcDNA3.1分别与pGL3-CD44 promoter共转染大肠癌LoVo细胞和SW480细胞,双荧光素报告基因检测活性。另外将pcDNA3.1-RhoE和对照组分别稳定转染LoVo细胞和SW480细胞,并将筛选的稳定表达的细胞分别接种裸鼠,观察肿瘤的生长;用免疫组化的方法检测RhoE对肿瘤组织细胞形态及CD44分子表达的影响。结果测序结果表明,扩增的cd44启动子序列正确,双报告基因实验检测荧光素酶活力表明构建的报告基因具有启动子活性。含cd44启动子序列的报告基因在pcDNA3.1-RhoE阳性的LoVo细胞中表达受到抑制;HE染色显示pcDNA3.1-RhoE转染组较对照组肿瘤细胞明显变小,且大小和形态呈现一致性,已没有瘤巨细胞,相应的肿瘤细胞核的体积也变小。结论 RhoE通过抑制cd44基因启动子的活性部分逆转肿瘤的恶性生物学行为。为研究RhoE表达与cd44基因的关系及CD44蛋白表达与结直肠癌发生、发展及浸润转移的关系提供了良好的实验基础。

一个新的与12位密码子共存的K-ras基因突变位点

目的:检测大肠癌组织中K-ras基因的突变情况以指导临床治疗。方法:通过提取15例大肠癌石蜡组织中的DNA并进行PCR扩增,之后采用国际金标准方法-直接测序法进行检测获得突变信息。结果:15例大肠癌石蜡组织样本中K-ras有4例发生突变,突变率为26.6%。值得注意的是发现一个新的突变位点-密码子42,并且与密码子12突变共存。结论:密码子42的突变进一步证明K-ras突变不仅局限于密码子12,13,61,还有与密码子12共存的42位突变。

耳聋有哪些类型?

问:我前不久突发耳聋,几乎听不见别人说话,与亲朋好友的感情交流发生困难,感到焦虑和不安。不知耳聋有哪些类型?应当如何治疗?江苏宿迁陈梅答:耳聋为听觉功能障碍。

发生挫伤后如何处理?

问:我们在建筑工地上劳动时,经常会发生挫伤,虽未流血但却十分疼痛,请问有何处理方法?江苏启东刘舟答:当身体受钝器或重物打击时,引起皮下软组织的损伤。