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双膦酸盐修饰生长分化因子5促进MC3T3-E1细胞的成骨分化
1
作者
李立斯
张成栋
+5 位作者
李小龙
叶姿妤
蒲超
杨在君
匙峰
肖东琴
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2024年第3期373-379,共7页
背景:生长分化因子5作为骨形态发生蛋白的一员在软骨及骨组织修复领域表现出良好的应用潜力,增强生长分化因子5与骨组织的亲和力是提高蛋白使用效率的关键,因而开发具有骨靶向性的生长分化因子5蛋白具有重要意义。目的:利用双膦酸盐修...
背景:生长分化因子5作为骨形态发生蛋白的一员在软骨及骨组织修复领域表现出良好的应用潜力,增强生长分化因子5与骨组织的亲和力是提高蛋白使用效率的关键,因而开发具有骨靶向性的生长分化因子5蛋白具有重要意义。目的:利用双膦酸盐修饰生长分化因子5并探讨改性后蛋白对小鼠成骨前体细胞生长分化的影响。方法:采用化学交联法将生长分化因子5与帕米膦酸钠偶联,得到偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5,采用傅里叶变换红外光谱、圆二色谱对其基团及结构进行表征,利用ELISA试剂盒测定生长分化因子5与磷酸钙的结合量以及生长分化因子5的体外释放量,用于表征其体外骨靶向性。将生长分化因子5(对照组)、偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5(实验组)分别与成骨前体细胞MC3T3-E1共培养,以单独培养的细胞为空白对照,评价复合物对细胞增殖及分化等的影响。结果与结论:①红外光谱及圆二色谱结果表明,实验成功制备了双膦酸盐/生长分化因子5复合物且蛋白二级结构无显著变化;体外磷酸钙吸附结果表明,偶联帕米膦酸钠后,生长分化因子5与磷酸钙的吸附率增加了约1倍;在半胱氨酸存在条件下,偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5的蛋白可释放出来;②CCK-8实验结果显示,实验组培养4,7 d的吸光度值高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养7 d后,实验组碱性磷酸酶表达明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养13 d后,实验组钙结节含量明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);qRT-PCR结果检测结果显示,培养7 d后,实验组碱性磷酸酶、骨钙素及Runx2的mRNA表达高于对照组、空白对照组(P<0.01,P<0.001,P<0.0001);③结果表明,双膦酸盐修饰有利于增强生长分化因子5与磷酸钙的结合能力,同时有利于增强其生物活性。
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关键词
生长分化因子5
双膦酸盐
释放
MC3T3-E1细胞
增殖
分化
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职称材料
题名
双膦酸盐修饰生长分化因子5促进MC3T3-E1细胞的成骨分化
1
作者
李立斯
张成栋
李小龙
叶姿妤
蒲超
杨在君
匙峰
肖东琴
机构
西华师范大学组织修复材料工程技术协同创新中心
川北医学院第二临床学院·南充市中心医院组织工程与干细胞研究所
西华师范大学生命科学学院
出处
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2024年第3期373-379,共7页
基金
国家自然科学基金(82002289),项目负责人:肖东琴
四川省自然科学基金(2022NSFSC0685),项目负责人:肖东琴
+2 种基金
四川省自然科学基金(23NSFSC3371),项目负责人:张成栋
南充市市校合作科研项目(22SXJCQN0002),项目负责人:肖东琴
南充市市校合作项目(22SXQT0385),项目负责人:蒲超。
文摘
背景:生长分化因子5作为骨形态发生蛋白的一员在软骨及骨组织修复领域表现出良好的应用潜力,增强生长分化因子5与骨组织的亲和力是提高蛋白使用效率的关键,因而开发具有骨靶向性的生长分化因子5蛋白具有重要意义。目的:利用双膦酸盐修饰生长分化因子5并探讨改性后蛋白对小鼠成骨前体细胞生长分化的影响。方法:采用化学交联法将生长分化因子5与帕米膦酸钠偶联,得到偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5,采用傅里叶变换红外光谱、圆二色谱对其基团及结构进行表征,利用ELISA试剂盒测定生长分化因子5与磷酸钙的结合量以及生长分化因子5的体外释放量,用于表征其体外骨靶向性。将生长分化因子5(对照组)、偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5(实验组)分别与成骨前体细胞MC3T3-E1共培养,以单独培养的细胞为空白对照,评价复合物对细胞增殖及分化等的影响。结果与结论:①红外光谱及圆二色谱结果表明,实验成功制备了双膦酸盐/生长分化因子5复合物且蛋白二级结构无显著变化;体外磷酸钙吸附结果表明,偶联帕米膦酸钠后,生长分化因子5与磷酸钙的吸附率增加了约1倍;在半胱氨酸存在条件下,偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5的蛋白可释放出来;②CCK-8实验结果显示,实验组培养4,7 d的吸光度值高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养7 d后,实验组碱性磷酸酶表达明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养13 d后,实验组钙结节含量明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);qRT-PCR结果检测结果显示,培养7 d后,实验组碱性磷酸酶、骨钙素及Runx2的mRNA表达高于对照组、空白对照组(P<0.01,P<0.001,P<0.0001);③结果表明,双膦酸盐修饰有利于增强生长分化因子5与磷酸钙的结合能力,同时有利于增强其生物活性。
关键词
生长分化因子5
双膦酸盐
释放
MC3T3-E1细胞
增殖
分化
Keywords
growth differentiation factor-5
bisphosphonate
release
MC3T3-E1 cell
proliferation
differentiation
分类号
R459.9 [医药卫生—治疗学]
R318.08 [医药卫生—生物医学工程]
R684 [医药卫生—骨科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
双膦酸盐修饰生长分化因子5促进MC3T3-E1细胞的成骨分化
李立斯
张成栋
李小龙
叶姿妤
蒲超
杨在君
匙峰
肖东琴
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2024
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