康宁木霉菌株的诱变选育及固态发酵条件的优化

以康宁木霉3.4261为出发菌株,分别经紫外线诱变、紫外线与硫酸二乙酯复合诱变,采用刚果红透明圈法初筛和摇瓶复筛,获得1株高产纤维素酶的突变株E20-2,初步确定了固态发酵最佳产酶条件:麦麸︰秸秆=1:4,固:液=1:3～1:4,0.1%Tween-80,温度28℃、pH6.0、时间5d,纤维素酶(CMCase)、滤纸酶(FPA)酶活分别达到654U/g和69U/g,较出发菌株分别提高了230%和72%。

蔗糖铁与左卡尼汀联用治疗血液透析患者中重度贫血的临床研究

肾性贫血是慢性肾衰竭血透患者的常见并发症之一,重组人促红细胞生成素（EPO）的应用极大改善了肾性贫血的疗效,但仍有部分患者使用EPO治疗的效果不佳,造成这种情况有多种原因,缺铁最为常见。缺铁的治疗中口服铁剂往往效果不佳,静脉铁剂能有效提供储存铁和功能铁,能更好更快改善血透患者的缺铁状况。

连续性肾脏替代疗法治疗危重症患者31例疗效分析

目的探讨连续性肾脏替代疗法(CRRT)救治对危重症患者的疗效。方法回顾性分析31例采用CRRT治疗的危重症患者的临床资料,分析其疗效及相关影响因素,并对患者治疗前、后肾功能、电解质、血气等指标进行比较。结果CRRT对急性肾功能衰竭患者疗效较好;对于合并3个或3个以上器官功能衰竭患者的疗效较差;治疗后各实验室检查指标除血钙外均较治疗前明显好转,差异有显著性意义(P<0.05)。结论CRRT可用于多种危重病的救治,能提高抢救成功率,其疗效与原发病、器官衰竭及治疗模式等多种因素有关。

a-N-乙酰半乳糖胺酶多克隆抗体的制备及特异性鉴定

目的制备a-N-乙酰半乳糖胺酶(NAGA)的高效价高特异性的兔多克隆抗体。方法利用pET22b-NA-GA/BL21(DE3)工程菌株表达NAGA,经Ni2+Sepharose 6 FF亲合层析,Phenyl Sepharose 6 FF疏水层析两步纯化,得到纯度>95%的NAGA作为抗原免疫新西兰白兔,获得NAGA的兔抗血清,并经HiTrap rProtein A柱纯化获得高效价高特异性的抗体;用间接ELISA法检测抗体效价,用Western blotting评价抗体特异性。结果制备得到的NAGA兔多克隆抗体血清效价为1×106,经过rProtein A柱纯化后抗体蛋白纯度>95%,效价为1×105;Western blotting显示:该NAGA兔多克隆抗体只与NAGA发生特异性反应。结论获得了NAGA的高效价高特异性的兔多克隆抗体。

例谈邻项作商思想在求离散函数最值中的运用

在高中阶段,我们除了要研究连续性函数的最值,还经常会遇到一些离散型函数的最值问题,比如数列中的最值、二项展开式中系数的最值,以及一些离散型随机变量(超几何分布、二项分布)的概率的最值等。下面我们结合具体例子,来体会相邻两项作商思想在解决这些问题中的作用。

新型α-半乳糖苷酶多克隆抗体的制备及特异性鉴定

目的:制备高效价、高特异性的新型α-半乳糖苷酶的兔多抗,并鉴定该抗体的特异性。方法:用脆弱类杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶(纯度大于90%)免疫新西兰大白兔,获得α-半乳糖苷酶的兔抗血清,并经HiTrap rProtein A柱纯化获得高纯度的抗体;用间接ELISA法检测抗体效价,Western印迹评价抗体的特异性。结果:通过免疫法得到了α-半乳糖苷酶的兔多克隆抗体血清,抗体效价达1∶1×106,经rProtein A柱纯化后获得了高效价、高纯度的抗体,Western印迹显示该抗体特异性地与新型α-半乳糖苷酶结合。结论:获得了新型α-半乳糖苷酶的高效价、高特异性的兔多克隆抗体,可用于血型转变过程中残留α-半乳糖苷酶含量的特异性检测。

腹膜透析患者分级管理模式的应用

腹膜透析(PD)作为主要的肾脏替代治疗方法之一,具有简单安全、容易操作、保护残肾功能、血流动力学影响小、适宜家庭透析等优点可,其中持续性不卧床腹膜透析(CAPD)使用最为广泛,特别适用于我国广大农村和偏远地区。目前各PD中心对出院后患者的管理模式还是传统患者到置管医院门诊随访,目前我国PD专业医护人数少,已不能满足规模日益增长的随访人群,同时部分患者由于行动不便或居住偏远等因素无法规律来院随诊,从而不能早期发现异常情况及时处理,影响治疗效果和预后。因此,需要利用现有大型PD中心的各项资源,实现对广大基层医疗机构的支持,在基层医院建立一支高度专业化的PD医护队伍,做好PD患者随访管理,提高PD质量。

丙氨酸溶液作为A→O血型转变酶解缓冲液的研究

本研究旨在探讨丙氨酸缓冲液对α-N-乙酰半乳糖胺酶发挥高效酶解A抗原活性的影响。用Western blot检测α-N-乙酰半乳糖胺酶在丙氨酸等不同缓冲液中与红细胞的结合能力。结果表明,丙氨酸溶液也可以作为A→O血型转变的酶解缓冲液,α-N-乙酰半乳糖胺酶在丙氨酸溶液中酶解A型红细胞所用剂量与在甘氨酸溶液中的相当;Western blot证实,在丙氨酸溶液中α-N-乙酰半乳糖胺酶与红细胞结合能力与在甘氨酸中相似,这也进一步证明α-N-乙酰半乳糖胺酶与红细胞的结合是α-N-乙酰半乳糖胺酶发挥酶解A抗原的活性所必需的。结论:丙氨酸溶液可以作为A→O血型转变的酶解缓冲液,在这一缓冲液中α-N-乙酰半乳糖胺酶与红细胞紧密结合,可以发挥高效的酶解A抗原的活性。

浅析放缩法在应用零点存在判定定理时的作用

为弥补尝试的盲目性,浅析了放缩法在零点定理中的作用,通过具体例子,阐述了放缩的方向、尺度、方法等技巧,结合尝试法与放缩法有效地解决了零点定理使用中涉及的取点问题.

提高酸乳中c9,t11-共轭亚油酸含量的研究

本研究利用乳酸菌发酵法,添加合适的底物,在形成酸乳的同时提高乳中c9,t11-共轭亚油酸,c9,t11-CLA的含量,筛选菌株的最佳配比条件,研究影响CLA含量的因素,发现奶中影响酶促反应和菌株生长的营养成分均可以影响乳酸菌发酵中CLA的产生。应用气相色谱检测出乳酸菌培养液中CLA的其它异构体。

腹泻患者粪便弧菌属及气单胞菌属分离鉴定结果分析

作者从1356例腹泻患者粪便中分离出102株弧菌科病原菌,分离率为7.5%,其中:弧菌属86株,分离率为6.3%,共10个菌种。气单胞菌属16株,分离率为1.2%,共3个菌种。均经生化反应和血清试验证实。结果表明:弧菌属和气单胞菌属是嘉兴地区感染性腹泻的常见病原菌。

酶解转变的人红细胞输注大鼠的实验研究

目的:利用大鼠评价酶解转变的人红细胞的安全性。方法:人红细胞与大鼠血清进行常规配血,检测二者之间的相容性;将人B型红细胞酶解后输注大鼠,流式细胞术检测人红细胞在大鼠体内的存活率。结果:人红细胞与大鼠血清不凝集,但人红细胞输注大鼠体内很快被排斥,1 h下降至50%以下,18 h被完全排斥。结论:仅依靠红细胞配血实验来选择人红细胞输血动物模型是不全面的,大鼠不适合作为酶解转变的人红细胞安全性评价的动物模型。

制备抗α-半乳糖苷酶单克隆抗体用于检测B→O血型改造后的微量残留酶

目的:建立一种检测B→O血型改造后残留α-半乳糖苷酶的有效方法。方法:利用重组咖啡豆α-半乳糖苷酶为免疫原制备单克隆抗体,再采用间接ELISA法检测B→O血型改造后残留的工具酶α-半乳糖苷酶的量。结果:最低可检测出的残留酶量约为2.4ng/mL。结论:为B→O血型改造后残留的工具酶的检测提供了有效的方法。

抗谷胱甘肽S转移酶多克隆抗体的制备及特异性鉴定

目的:制备谷胱甘肽S转移酶(GST)的兔多抗,并鉴定该抗体的特异性。方法:用纯化的GST标签蛋白(纯度>98%)免疫新西兰大白兔,获得GST的兔抗血清,并经HiTrap rProtein A柱纯化获得高效价高特异性的抗体;用间接ELISA法检测抗体效价,Western印迹检测抗体的特异性,并与商业化抗体进行对比。结果:通过免疫法得到了GST的兔多克隆抗体血清,抗体效价达1∶1×106,经rProtein A柱纯化后获得了高效价高特异性的抗体,其高效高特异性已达商业化抗体水平。结论:获得了GST的高效价高特异性的兔多克隆抗体。

基因工程α-半乳糖苷酶的制备及其性质研究

在获得可分泌表达α 半乳糖苷酶基因工程毕赤酵母菌株的基础上 ,尝试了基因工程α 半乳糖苷酶在 5L发酵罐中的表达以及从发酵液中纯化α 半乳糖苷酶的研究。在 4L无机盐培养基中接种 0 .4LpPIC9K Gal GS115培养物 ,最终得到 3 .5L发酵液。离心所得上清中总蛋白含量为 2 .1g L。根据发酵液中目的蛋白含量高、杂质少等特点 ,设计了如下的纯化流程 :离心→超滤→阳离子交换层析→脱盐→浓缩。纯化后电泳银染结果呈单一蛋白带 ,总回收率 41%。通过测定米氏常数等生化性质对重组酶进行鉴定后 ,完成了人B型红细胞的酶解实验。结果表明 ,从发酵液中纯化的α 半乳糖苷酶可将B型红细胞改造成O型红细胞。本研究同时在数量和质量上为α 半乳糖苷酶在众多领域的广泛应用奠定了基础。

用α-半乳糖苷酶制备可供输注的人通用型O型红细胞

研究的目的是将人群中28％的B型血改造成通用O型血,提高O型血的储存和使用比例,以缓解战争、 恐怖袭击、突发事件等紧急状态下对O型血的大量需求。用α-1.3半孔糖苷酶作为B→O血型改造的工具酶,摸索 改造一个使用单位B型血红细胞(100 ml)的最佳条件。结果实现了在密闭、无菌条件下使用50 U／ml工具酶,pH 5.6,26℃ 2小时,进行B→O的血型改造。结论:改造后的通用型O型血红细胞符合生物制品检定规程的要求, 并可在4℃存放21天。