恩诺沙星诱导鸡急性肝损伤模型的建立

旨在制作鸡的急性药物性肝损伤模型,将40只33日龄SPF级白羽鸡随机分成4组,每组10只,模型组灌胃不同浓度的恩诺沙星(200、150、100 mg/kg),对照组灌胃等体积蒸馏水,每天给药1次,连续给药5 d。最后1次灌胃后,禁食不禁水,24 h后空腹称重并颈静脉采血用于肝功能检测,取肝脏计算肝指数、剖检后肉眼观察、组织切片进行HE染色观察肝脏组织病理学变化。结果显示,模型组丙氨酸氨基转移酶(ALT)和直接胆红素(DBIL)同时升高,其中DBIL升高至对照组的2倍以上;总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)同时升高,其中TBIL升高至对照组的2倍以上,认为这2组指标可以作为恩诺沙星致鸡急性肝损伤诊断的生化参考依据;模型组肝脏病理切片均有不同程度的肝细胞病变,可视为鸡急性药物性肝损伤诊断的“金标准”。结果表明,鸡连续灌胃100 mg/kg的恩诺沙星5 d可以制作急性药物性肝损伤模型,此模型可用于保肝护肝药物筛选和药物性肝损伤机制的研究。

茵黄口服液的安全药理学试验

为评价茵黄口服液对动物心血管系统、呼吸系统和神经系统的影响,取SPF级KM小鼠80只,随机分为4组,分别为黄口服液高剂量组[20.0 g/(kg·bw)]、中剂量组[10.0 g/(kg·bw)]、低剂量组[5.0 g/(kg·bw)]和空白组(灌胃相同体积的蒸馏水),给药前(-1 h)、后(0 h、1 h、2 h、4 h)采用MC4000无创血压仪检测小鼠收缩压(SAP)、舒张压(DAP)和脉搏(P);采用EMKA无创肺功能仪检测呼吸频率(RF)、潮气量(TV)和呼吸曲线。此外,采用常规方法分别检测对戊巴比妥钠阈剂量和阈下剂量的催眠效果、自主活动和机能协调运动情况。结果显示,高剂量组和低剂量组在给药后4 h的收缩压和舒张压较对照组有显著下降(P<0.05);各剂量组对呼吸频率、潮气量和呼吸曲线无显著影响;高剂量组显著减少戊巴比妥钠阈剂量小鼠的入睡时间(P<0.05),显著延长小鼠的睡眠维持时间(P<0.05);各剂量组对阈下剂量小鼠的睡眠个数、自主活动次数和转棒坠落率无显著影响。表明茵黄口服液有一定的降压作用和镇静作用。

多指标综合评分结合正交试验法优选大鼠对乙酰氨基酚肝损伤模型

采用正交试验方法优选大鼠对乙酰氨基酚(APAP)染毒致肝损伤模型最佳制作条件。选择对肝功能指标有影响的3个因素:染毒剂量、中毒途径和采血时间,设置3个水平,采用L_(9)(3^(4))正交表安排试验,以肝生化指标综合评分作为参考依据,优选大鼠肝损伤模型的最佳条件。结果显示,APAP以800 mg/(kg·bw)经腹腔注射雄性大鼠,28 h后可以得到最优化肝损伤模型。本方法可为肝损伤新药研发和机理研究提供可靠的模型。

鸡与其他实验动物体表面积等效换算系数的测算

测算鸡与其他实验动物等效剂量换算系数,为完善鸡常用基础实验数据提供依据。用Photoshopcc 2015测算鸡皮表面积,基于体质量与体表面积,求出鸡在Meeh-Rubner氏公式中的K值,计算出鸡与其他实验动物之间药物剂量换算的系数。鸡在Meeh-Rubner氏公式中的K值为9.24±1.03,mg/kg^mg/m^2转移因子为10.00±1.36,单位体重上表面积的相对比值为0.30±0.044。研究结果可为鸡在生物医学及畜牧养殖方面的健康合理用药提供重要信息。

芩黄清肺散的质量标准研究

为建立芩黄清肺散的质量标准,采用显微鉴定和薄层色谱法(TLC)对方剂中黄芩、大黄、枇杷叶和甘草进行定性鉴别。采用高效液相色谱法(HPLC)对黄芩苷进行含量测定,色谱柱为依利特C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);流速1mL/min;检测波长280nm;柱温40℃;进样量20μL。显微鉴定结果表明,韧皮纤维单个散在或数个成束,梭形,长60μm^250μm,壁厚,孔沟细(黄芩);草酸钙族晶,直径60μm^140μm(大黄);非腺毛为单细胞,常弯曲(枇杷叶);木纤维成束,周围薄壁细胞含草酸钙方晶,形成晶鞘纤维(甘草)。TLC结果表明,供试品中,在与对照品或对照药材色谱相应的位置上显示相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。HPLC结果显示,黄芩苷在0.241μg^1.208μg(r=0.999 9)具有良好的线性范围,精密度、稳定性、重复性的RSD<3.0%,加样回收率为100.49%(RSD=1.71%,n=9)。该研究所建立标准可用于芩黄清肺散的质量控制。

板连败毒口服液解热作用及其机理研究

对板连败毒口服液(BBO)的解热作用及其可能的作用机制进行探索。48只清洁级新西兰大白兔随机分成6组(8只/组),分别为阴性对照组、阳性对照组、阳性药物组(布洛芬)、BBO低剂量组、BBO中剂量组、BBO高剂量组。阴性对照组家兔耳缘静脉注射生理盐水4mL/kg;其余各组家兔耳缘静脉注射330mL/L脱脂牛奶溶液4mL/kg建立发热模型。造模1h后,低、中、高剂量组分别灌胃给予BBO(0.6、1.2、2.5g/kg),连续3次,每次间隔1h;阳性药物组灌胃给予布洛芬水溶液(0.03g/kg)连续3次,阳性对照组与阴性对照组给予等体积灭菌生理盐水灌胃,连续3次,每次间隔1h。造模后每1h测定体温一次,连续监测5次,观察BBO对家兔发热的解热作用。监测完最后一次体温后麻醉家兔取下丘脑,ELISA检测下丘脑中与炎性发热相关因子,包括白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、环磷酸腺苷(cAMP)和前列腺素E2(PGE2)等,探讨BBO的解热机制。结果表明,BBO能够显著降低家兔体温;能够显著降低下丘脑中IL-1β、IL-6、cAMP、PGE2的含量。BBO的解热机制可能与抑制下丘脑IL-1β、IL-6、PGE2等内生致热源从而降低cAPM分泌有关。

板连败毒口服液的急性毒性与长期毒性试验

探索板连败毒口服液的急性毒性与长期毒性。急性毒性试验中,SPF级昆明小鼠预试验高剂量组灌胃达到6000 mg/kg,实验动物死亡为0/4,故将动物数量增加至10只(雌、雄各半),并且重复2次,观察实验动物中毒表现和死亡情况。长期毒性试验中,SPF级SD大鼠96只分为4组,每组24只(雌雄各半),空白对照组、板连败毒口服液高、中和低剂量组,给药期限30 d,停药后观察15 d。每天观察大鼠外观体征、饮水和食欲情况,每周称量体重,第30天和第45天分别处死16只和剩余部分,采血检测血常规、血液生化和解剖观察主要脏器病理学变化。急性毒性试验中,板连败毒口服液LD50大于6000 mg/kg,实际无毒。长期毒性试验中,体重增长趋势组间均无显著差异;组间血常规和血液生化指标均在正常范围内,其中红细胞数量等指标有波动,但其差异水平停药后恢复正常;重要器官的脏器系数及病理变化组间均无差异显著性。研究结果表明,板连败毒口服液实际无毒,在临床拟用量范围内使用安全。

大鼠无创性肺功能检测指标的建立

用双腔法测量大鼠肺功能的基础数据,为呼吸系统疾病相关的大鼠动物模型的肺功能检测提供参考。采用EMKA无创肺功能监测系统,对40只SD大鼠肺功能的17项指标(潮气量,TV;最大呼气量,EV;每分通气量,MV;吸气时间,Ti;呼气时间,Te;吸气流峰值,PIF;呼气流峰值,PEF;间歇时间,RT;呼吸频率,f;吸气末期停顿,EIP;呼气末期停顿,EEP;暂时停顿,Pau;支气管收缩程度,Penh;延迟时间,dT;特殊气道阻率,SRaw;特殊气道导率,SGaw;呼气中期流速,EF50)进行检测。TV值为1.01 mL(0.41~2.23),EV为1.01mL(0.41~2.22),MV为226.02mL(76~517),Ti为144.17 msec(108~204),Te为172.45msec(118~265),PIF为11.05mL/s(4.6~27.1),PEF为10.58mL/s(3.4~23.9),RT为107.08msec(76~188),f为196.88bpm(141~255),EIP为2.72 msec(2~4),EEP为19.56 msec(13~32),Pau为0.63(0.41~0.88),Penh为0.62(0.33~1.06),dT为39.56ms(4.56~96.38),SRaw为38.53cm H_2O.s(2.27~83),SGaw为0.078l/cmH_2O.s(0.01~0.37),EF50为9.5mL/s(3~20)。试验同时发现,大鼠肺功能部分指标在不同时间段、不同性别差异具有显著意义。首次测得SD大鼠无创肺功能多项指标,对呼吸系统疾病的研究和相关标准的制定有着重要的参考价值。

铜中毒对小鼠心肺及肝功能的影响

采用硫酸铜溶液灌胃的方式探讨铜中毒对小鼠心肺及肝功能的影响,为临床诊断铜中毒提供参考。采用MC4000血压分析系统和EMKA无创肺功能监测系统检测小鼠心肺功能的相关指标,通过测定血液生化指标观察心、肝、肺功能,通过HE染色观察各脏器的病理变化。结果表明,各试验组小鼠的呼吸频率(f)、潮气量(TV)、平均动脉(MAP)和脉搏(P)与对照组比较,均无显著差异(P>0.05);血液生化指标测定结果显示,高剂量组小鼠血清的谷草转氨酶(GOT)和乳酸脱氢酶(LDH)与对照组比较,均差异显著(P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)数据比较无显著差异(P>0.05);各试验组小鼠的心、肺和肝均有病理变化。铜中毒对小鼠心、肺和肝均有影响,其中对肝的影响最为严重。

板连败毒口服液的安全药理学研究

对板连败毒口服液进行安全药理学研究。通过小鼠戊巴比妥钠阈剂量(阈下剂量)催眠试验、小鼠一般状态及自主活动试验和小鼠的协调性试验,考察药物对神经系统的影响;用MC4000无创血压仪和EMKA小动物无创肺功能仪检测,记录不同时间段的收缩压、舒张压、平均动脉压、脉搏、呼吸频率、潮气量、呼吸节律等相关指标,分析药物对心血管系统、呼吸系统的影响。板连败毒口服液对小鼠戊巴比妥钠阈(阈下剂量)剂量催眠试验结果显示,睡眠持续时间和睡眠个数3个剂量组与对照组相比无显著差异;小鼠一般状态及自主活动试验和机能协调运动试验中,3个剂量组与对照组相比无显著差异。板连败毒口服液对大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压、脉搏、呼吸频率、潮气量、呼吸节律等无显著影响。板连败毒口服液对动物的中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统均无显著影响,是一种临床上较为安全的药物。

芩黄清肺散的急性毒性和长期毒性研究

为探索芩黄清肺散(Qinhuang qingfei powder,QQP)的安全性,对其进行急性毒性试验和长期毒性试验。急性毒性试验中,小鼠灌服QQP水煎液(6.00mg/g体重)1周,测定其半数致死量(LD50);长期毒性试验中,将96只SD大鼠随机分为高、中、低剂量组(QQP 32.00、16.00、8.00mg/g体重,相当于临床拟用剂量的96、48和24倍)和对照组。每组24只,雌雄各半。QQP制成药化饲料,喂养30d。每周记录大鼠的饮水量、耗料量、体重及精神活动等,在喂养第30天和恢复期(第45天)分别对大鼠进行血液学、血液生化、病理学方面的检查。结果表明,急性毒性试验小鼠LD50>6.00mg/g体重,实际无毒;长期毒性试验中,各剂量组大鼠饮水量、耗料量、体重、血液学指标、血液生化指标和脏器系数与对照组相比均无显著差异(P>0.05)。大鼠主要器官大体解剖和心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、睾丸/卵巢等脏器组织病理学检查未见任何病变。综合以上结果,芩黄清肺散临床用药具有安全性。

芩黄清肺散的安全药理学研究

通过无创方式对芩黄清肺散(Qinhuang qingfei powder,QQP)进行安全药理学研究。采用MC4000无创血压仪检测清醒大鼠的平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)和脉搏;采用EMKA无创肺功能仪检测清醒大鼠的呼吸频率(respiratory rate,f)、潮气量(tidal volume,TV)和呼吸曲线;同时进行小鼠戊巴比妥钠阈剂量(阈下剂量)催眠试验、小鼠一般状态及自主活动试验以及小鼠机能协调运动试验。结果表明,清醒大鼠心血管系统和呼吸系统功能试验,芩黄清肺散3个剂量组大鼠的MAP、脉搏、f、TV、呼吸曲线等与对照组相比无显著差异;戊巴比妥钠阈剂量催眠试验,3个剂量组小鼠入睡时间和睡眠持续时间与对照组相比无显著差异;戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验的结果表明,3个剂量组小鼠睡眠数量与对照组相比无显著差异;小鼠一般状态及自主活动试验和小鼠机能协调运动试验中,3个剂量组小鼠睡眠数量与对照组相比无显著差异。说明芩黄清肺散对受试动物的心血管系统、呼吸系统和中枢神经系统均无影响,是一种临床上安全的药物。

小鼠心肺功能指标的无创法检测

采用尾套法和双腔法分别测量小鼠心肺功能的基础数据,为心血管疾病和呼吸系统疾病相关的研究提供参考。采用MC4000血压分析系统和EMKA无创肺功能监测系统,对100只SPF级昆明小鼠心肺功能的21项指标进行检测。收缩压(SBP)为131mmHg±19mmHg,舒张压(DBP)为119mmHg±18mmHg,平均动脉压(MAP)为123mmHg±18mmHg,脉搏(P)为716次/分±73次/分;吸气时间(Ti)为96.29ms±9.93ms,呼气时间(Te)为91.80ms±12.70ms,吸气流峰值(PIF)为1.88mL/s±0.31mL/s,呼气流峰值(PEF)为2.36mL/s±0.32mL/s,潮气量(TV)为0.13mL±0.02mL,最大呼气量(EV)为0.13mL±0.03mL,间歇时间(RT)为52.62ms±5.97ms,每分通气量(MV)为42.02mL±6.11mL,呼吸频率(f)为323.78bpm±36.09bpm,吸气末期停顿(EIP)为1.79ms±0.35ms,呼气末期停顿(EEP)为12.72ms±2.50ms,暂时停顿(Pau)为0.75±0.12,支气管收缩程度(Penh)为0.95±0.17,延迟时间(dT)为2.89 ms±1.20ms,特殊气道阻率(SRaw)为2.81cm±1.18cm H_2O.s,特殊气道导率(SGaw)为0.46L/cm±0.22L/cm H_2O.s,呼气中期流速(EF50)为2.14mL/s±0.35 mL/s。试验同时发现,昆明小鼠肺功能部分指标在不同时间段和不同性别之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。首次采用无创方式测得昆明小鼠心肺功能的多项指标,可为心血管疾病及呼吸系统疾病的研究和相关标准的制定提供基础资料。

芩黄清肺散的药效学研究

为了观察中药复方制剂芩黄清肺散的抗炎、止咳、化痰、平喘作用,试验将动物随机分为模型组、阳性药物组、芩黄清肺散高、中、低剂量组。通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型法观察芩黄清肺散抗炎作用;通过小鼠浓氨水引咳法观察其止咳作用;通过小鼠气管酚红排泌法观察其祛痰作用;通过组织胺和乙酰胆碱豚鼠引喘模型观察其平喘作用。结果表明:芩黄清肺散能够降低二甲苯所致小鼠耳部肿胀,提高抑制率;能显著抑制浓氨水引起的咳嗽,延长咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数;能促进小鼠气管内酚红的分泌,促进痰液的排出;哮喘试验中芩黄清肺散能延长豚鼠哮喘发作潜伏期。可见芩黄清肺散具有较好的止咳、祛痰、平喘、抗炎作用。

大鼠血压和脉搏的无创测试及其参考值的制订

为了获取正常大鼠无创血压和脉搏的基础数据,对心血管系统疾病药（毒）理学研究提供参考,试验以SD大鼠为研究对象,采用尾套法和MC4000血压分析系统连续监测血压变化,包括收缩压（systolic blood pressure,SBP）、舒张压（diastolic blood pressure,DBP）、平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）和脉搏（pulse,P）变化。结果表明：不同时间段（6：00,12：00,18：00,24：00）大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压和脉搏均差异不显著（P〉0.05）;雌雄大鼠之间的收缩压、舒张压、平均动脉压和脉搏均差异不显著（P〉0.05）;大鼠收缩压参考范围为130-176 mmHg,舒张压参考范围为102-144mmHg,平均动脉压参考范围为111-151 mmHg,脉搏参考范围为276-412次/min。说明1 d中不同时间段大鼠的血压和脉搏无显著变化,且不同性别对大鼠的血压和脉搏无影响。