利用酵母双杂交技术筛选与新孢子虫NcSRS2蛋白相互作用的宿主蛋白

【目的】筛选与鉴定与新孢子虫NcSRS2蛋白相互作用的Vero细胞蛋白。【方法】从Nc1株犬新孢子虫速殖子中提取DNA作为模板,PCR扩增NcSRS2基因,克隆于pGBKT7表达载体,构建诱饵载体pGBKT7-NcSRS2,转化入Y2H酵母感受态细胞,进行自激活活性验证和细胞毒性检测。利用酵母双杂交技术,以转化诱饵载体pGBKT7-NcSRS2的Y2H酵母菌株与Vero细胞cDNA文库进行酵母双杂交,筛选与NcSRS2蛋白相互作用的宿主蛋白,对阳性克隆进行测序,并用BLAST分析,筛选出与NcSRS2存在相互作用的Vero细胞蛋白质。【结果】诱饵载体pGBKT7-NcSRS2无自激活活性和细胞毒性,可用于文库筛选。运用酵母双杂交系统,筛选出2个与NcSRS2相互作用的Vero细胞成分,分别是NADH dehydrogenase subunit 1和STMN2。【结论】本研究首次运用酵母双杂交技术筛选出与新孢子虫NcSRS2相互作用的Vero细胞蛋白质,为进一步研究犬新孢子虫NcSRS2参与黏附及入侵宿主细胞的机制奠定基础。

沈阳地铁1、2号线工程防水设计

从设计角度对比了沈阳地铁1、2号线工程的防水情况,从地铁防水等级、混凝土自防水、防水材料选用、细部构造防水设计等方面提出了建议。

青岛地铁3号线工程防水设计

从设计角度介绍了青岛地铁3号线工程的防水情况,总结了一般地铁工程防水设计的思路,并对比青岛地铁3号线、2号线的防水设计,在地铁防水设计原则、防水方案确定、混凝土自防水、排水设计、防水材料选择、细部防水构造等方面提出了建议。

叠合楼板结合面剪切试验

目的研究混凝土叠合板结合面的水平剪力,为叠合楼板桁架钢筋布置计算提供参考.方法对进行拉毛处理与光面未拉毛处理的试件进行结合面受剪承载力试验研究,得出新旧混凝土结合面抗剪强度试验值;计算叠合板在满足抗剪强度条件下的桁架钢筋合理布置间距.结果试件的结合面积为1 000 mm×1 000 mm,通过千斤顶加载到500 k N时,结合面没有任何错动现象;试件的结合面积为200 mm×300 mm,加载通过500 t压力机进行,表面拉毛试件在压力施加到183 k N发生的破坏,表面未拉毛试件在压力施加到110 k N发生的破坏.结论叠合板新旧混凝土结合面的抗剪强度,拉毛处理结合面强度为3.0 MPa,光面未拉毛结合面抗剪强度为1.8 MPa.实际工程中,小于9 m跨度的叠合楼板可不需要设置抗剪桁架钢筋.假设结合面粘结失效,计算仍能满足水平抗剪强度要求的桁架钢筋设置情况.叠合楼板跨度小于3.0 m时,腹筋直径选用4 mm,布置间距可选用600 mm;腹筋直径选用5 mm,布置间距可选用1 000 mm.

装配式剪力墙结构拆分设计研究与应用

目的对比现有两种装配式剪力墙结构拆分方式,提出一种新的拆分方式,结合工程案例验证该方式的可行性.方法参照柱梁体系拆分方法,在此基础上改进现有装配式剪力墙结构拆分方式,在满足等同现浇要求的前提下,保证施工质量.结果新的拆分方式外墙几乎全预制,现浇部分设置在内墙,内墙可以选择部分预制或者全部现浇,梁与填充墙拆开,剪力墙与连梁拆开,现场操作简单,外墙湿作业明显减少,现浇部分模板基本为一字型,预制构件全部为一字型,构件制作简单,传力途径清晰,使连接构造与计算假定相符合.结论笔者提出的拆分方式解决了现有两种拆分方式存在的问题,可为装配式剪力墙结构拆分设计提供借鉴.

基于LASSO算法的多QTL定位的模拟研究

此篇文章中,应用一种基于LASSO的算法去同时定位多个数量性状位点(QTL)。在QTL定位方法中,迭代加权最小二乘法(IRLS)和极大似然法(ML)在参数估计准确性和检测效率方面效果几乎一致。但是在参数估计的稳健性和计算速度方面,迭代加权最小二乘法又明显优于极大似然估计。结合参数的先验分布信息,基于贝叶斯理论的极大似然估计能够分析多QTL模型。然而迭代加权最小二乘估计不能很好的检测多QTL。目前贝叶斯分析已经成为一个多QTL定位的重要的途径,但它主要缺点是计算时间过长,并缺乏简单有效的显著性检验。通过循环坐标下降的LASSO方法可将全模型的系数同时压缩并使之趋进于零,因此该方法能应用于快速同时估计整个基因组的非零遗传效应位点。在这个研究中,应用基于LASSO的算法去同时定位多QTL。模拟证明LASSO方法比迭代加权最小二乘法具有更高的估计精度和检测效率。

北京奥林匹克公园中心区地下交通联系通道工程防水技术

介绍了北京奥林匹克公园中心区地下交通联系通道的特点,以及以主体结构混凝土自防水为本、以变形缝和施工缝等细部构造防水为重点、辅以双层SBS改性沥青防水卷材组成的刚柔复合防水体系。

嗜吞噬细胞无形体病分子生物学诊断方法的研究进展

嗜吞噬细胞无形体主要侵染宿主成熟或未成熟的髓系白细胞,是蜱传疾病的病原体。主要感染放牧牛群,舍饲牛群较少发,并有明显的季节性。对全球的养牛业经济造成严重的影响。本文就当前常用的嗜吞噬细胞无形体分子检测方法作一综述。

延边某地长角血蜱和全沟硬蜱体内东方泰勒虫的分子生物学检测

为调查吉林省延边地区自然生境内游离蜱携带东方泰勒虫的情况,以东方泰勒虫主要表面蛋白基因(MPSP)基因为靶基因,采用PCR方法对延边地区自然生境内的游离蜱DNA进行扩增。在长角血蜱的DNA中检测了东方泰勒虫,检出率为29%;而全沟硬蜱中没有检测到东方泰勒虫。结果表明,自然生境中的游离长角血蜱体内携带着东方泰勒虫。

中国·霍城第四届国际薰衣草文化旅游节拉开帷幕

2014年6月21日中国·霍城第四届国际薰衣草文化旅游节在霍城县解忧公主薰衣草园举行，来自世界各地的中外嘉宾和社会各界人士将共同观摩和体验一场薰衣草全产业文化的芳香盛宴。 “中国最美田园”解忧公主薰衣草园位于天山北麓伊犁河谷，是全世界第三大薰衣草种植基地，有“中国薰衣草之乡”的美誉。

新孢子虫NcGRA7基因酵母双杂交诱饵载体的构建与鉴定

为筛选能与新孢子虫NcGRA7蛋白相互作用的靶蛋白,构建了酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-NcGRA7。应用PCR技术从新孢子虫基因组DNA中扩增出NcGRA7基因,将其克隆至pMD-19T(simple)中,经过酶切鉴定后再连接至酵母双杂交诱饵载体pGBKT7上。结果表明:试验成功获得了NcGRA7基因片段,测序结果中序列无碱基突变,与目标基因序列同源为100%。试验成功构建的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-NcGRA7,为使用酵母双杂交技术筛选与NcGRA7蛋白相互作用的蛋白奠定基础。

动物遗传设计群体混合模型连锁分析方法

研究提出了一个同时含有主效基因和微效多基因的混合模型连锁分析方法。首先应用LASSO方法快速估计线性混合模型(LMM)非零的主效位点,并将这些位点效应视为固定效应;而后把基于约束极大似然法(REML)估计得到的微效多基因效应再放入LMM中作为随机效应;从而最终实现QTL遗传参数估计和基因定位连锁分析。针对系谱群体的定位分析,该模型,即LASSO-LMM法,不仅很好地继承了单独LASSO法的计算速度,而且还具有比单独LMM法更好的遗传参数估计稳健性。为了具体比较这3种定位方法,采用计算机模拟数据验证。结果表明,相比于单独LASSO法和单独LMM法,LASSO-LMM法在QTL遗传参数估计和统计效力上总体表现出更高的估计精确度和检测效率。

公司治理视角下上市公司内部控制优化研究--以辅仁药业为例

经济的高质量发展,为企业创造了良好的发展环境,但近些年上市公司问题频出,财务造假、高管侵害公司利益等事件时有发生。这些现象对公司的治理结构和内部控制提出了更高的要求,内部控制作为公司治理的重要内容,应当起到在公司经营过程中应有的监督控制作用,本文从公司治理的角度对上市公司内部控制进行了探讨,并提出了一些建议。

钢丝绳芯输送带及硫化接头的维护与管理

胶带与胶带接头的管理好坏是保证输送机正常运转的关键。文章详细介绍了钢丝绳芯输送带的使用和维护方法,以及输送带硫化接头的管理办法。

矿区水文地质条件分类分析与防水害措施

矿区水文地质条件直接关系到煤矿的安全生产。七台河矿区富强煤矿地质构造复杂给矿区生产与安全带来诸多隐患。本文对河流及含水层、矿井涌水量、水害对各煤矿的影响进行分析。提出了防治水害的四项措施。

喷锚衬砌结构防排水系统设计

从适用条件、系统构成及其特点、理论计算模型等方面,阐述了隧道喷锚衬砌结构(主要是挪威法结构)防水设计理念及设计中应考虑的问题,并介绍了青岛地铁3号线喷锚衬砌结构的防排水做法,对工程防排水节点进行了系统说明。

太原市质监局首次对部分行业质量安全状况进行分析

10月26日，太原市质监局首次向太原市政府提交了钛原市部分行业质量安全状况分析报告》，该报告从质监职能角度出发，选择了质量安全主题，对食品和特种设备两行业2008年和2009年上半年的检验结果和监管情况进行了客观分析。提出了进一步加强质量安全监管的意见建议，使政府更系统、

畜牧养殖技术推广工作中存在的问题及对策探究

近些年来,我国农村经济的发展逐渐转变为以畜牧养殖业为主的经济形态。随着我国科技的不断进步,畜牧养殖业也从传统的养殖模式蜕变为高新的现代化养殖模式,其中畜牧养殖技术成为畜牧业发展的关键。基于此,本文从畜牧养殖技术推广工作的角度出发,对其中存在的问题进行详细的分析,并提出相应的对策。

论代位继承

代位继承是法定继承中的一种特殊形式,在我国《继承法》中作了明确规定,但各国关于代位继承的性质、条件等问题的规定存在着很大差异,我国法律理论界和实务界仍存在着争论。本文从有关代位继承的概念和特征入手,通过分析代为继承权的性质,并结合我国的实际情况,分析了我国代位继承制度中存在的一些问题,并对如何完善我国的代位继承制度进行了思考。