孕酮对大鼠脑损伤后脑水肿的影响及机制

目的观察孕酮对大鼠脑损伤(TBI)后脑水肿和前列腺素(PGE2)表达的影响。方法雄性老年SD大鼠48只随机分为假手术组、TBI组和孕酮治疗组,按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型。孕酮治疗组伤后1、6 h腹腔注射孕酮16 mg/kg。各组于伤后24 h取材。用免疫组织化学法和免疫印迹法观察大鼠皮质PGE2的表达水平变化,并测量脑组织含水量。结果与假手术组大鼠相比,TBI组大鼠皮质PGE2表达和脑水肿较假手术组显著增加(P<0.05);孕酮治疗组与TBI组比较,大鼠皮质PGE2表达和脑水肿明显减少(P<0.05)。结论孕酮可能通过降低PGE2的表达进而降低脑水肿,发挥TBI保护作用。

脑水肿干湿重法的测定条件分析

目的:分析干湿重法测定脑水肿的温度条件和时间条件,探讨优化测量方案。方法:健康SD大鼠随机分为3组(n=4):取脑组织称其湿重,分别连续烘烤16 h,用于不同温度条件下60°C、90°C、110°C的干湿重法脑水肿测定,检测不同时间点脑组织重量变化以及重量差值变化情况。结果:在不同温度下,随着时间的延长,脑组织重量逐渐减轻;温度在110°C条件下,9 h两次称量干重之差小于0.0002 g,已经烘烤至恒重;90°C温度条件下12 h至恒重;60°C温度条件下15.5 h至恒重。结论:干湿重法测量脑水肿的优化方案为110°C 9 h、90°C 12 h、60°C 15.5 h,为脑水肿的测定提供实验依据。

小檗碱联合阿霉素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231/ADR细胞株增殖迁移的影响及机制

目的探讨小檗碱(BBR)联合阿霉素(ADR)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231阿霉素耐药细胞株(MDA-MB-231/ADR细胞株)增殖迁移的影响及机制。方法对数生长期MDA-MB-231/ADR细胞株分为对照组(L-15培养基)、ADR组(ADR终浓度为0.5、1、1.5、2、2.5 mg/L)、BBR组(BBR终浓度为20、40、60、80、100μmol/L)、药物联用组(80μmol/L BBR+以上各浓度ADR),采用CCK-8法检测以上4组MDA-MB-231/ADR细胞的增殖活性;取80μmol/L BBR及半数抑制浓度1 mg/L ADR进行后续实验,采用Western blot检测对照组、ADR组、BBR组及药物联用组4组MDA-MB-231/ADR细胞中P300、H3K56ac、SIRT2蛋白的表达水平,采用细胞划痕法检测4组MDA-MB-231/ADR细胞的迁移能力。结果CCK-8检测结果显示,ADR对细胞增殖抑制作用呈浓度依赖性,BBR对MDA-MB-231/ADR细胞无增殖抑制作用,同浓度ADR联合80μmol/L BBR对MDA-MB-231/ADR细胞存活率明显低于单独使用ADR(P<0.05);Western blot检测结果显示,与对照组相比,BBR组及药物联用组中P300、H3K56ac蛋白表达水平下降,SIRT2蛋白含量上调(P<0.05);与BBR组比较,药物联用组中SIRT2、H3K56ac蛋白表达变化更大(P<0.05);细胞划痕实验结果显示,与对照组相比,ADR组、BBR组及药物联用组中MDA-MB-231/ADR细胞的迁移能力变化均不明显(P>0.05)。结论BBR能增加三阴性乳腺癌MDA-MB-231/ADR细胞对ADR的敏感性,其作用机制可能与P300、SIRT2、H3K56ac蛋白有关。

小檗碱增加乳腺癌细胞对阿霉素药物敏感作用的实验研究

目的:观察小檗碱联合阿霉素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖的影响及潜在机制。方法:培养三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞株;CCK-8检测不同浓度阿霉素和联用小檗碱后细胞的存活率变化;Western blot检测细胞内p300、hSIRT-2、H3K56ac蛋白表达情况;细胞划痕实验、侵袭小室法检测药物对MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:阿霉素对细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性,相同浓度阿霉素联合终浓度80μmol/L盐酸小檗碱对细胞的增殖抑制率均明显高于单独使用阿霉素(P<0.05)。p300、hSIRT-2、H3K56ac三种蛋白在对照组及加药组中均有表达,hSIRT-2蛋白在加药后含量降低,p300和H3K56ac蛋白的含量仅在含小檗碱组的细胞中增多,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞侵袭和迁移实验显示小檗碱可以有效增强阿霉素对乳腺癌MDA-MB-231细胞三维迁移能力的抑制作用。结论:小檗碱可协同阿霉素抑制MDA-MB-231细胞增殖,共同发挥抗肿瘤效果,作用机制可能与p300、hSIRT-2、H3K56ac蛋白有关。

lncRNA-MALAT1通过调节SIRT1介导的肝星状细胞活化调控2型糖尿病并发肝纤维化的机制研究

目的:探究lnc-MALAT1在高葡萄糖诱导的肝星状细胞活化及肝纤维化的作用及分子机制。方法:在IG12细胞株中构建高葡萄糖(HG,45 mmol/L)和常规葡萄糖(NG,5.5 mmol/L)培养模型,观察高葡萄糖诱导对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)等成纤维细胞标志物及lnc-MALAT1表达的影响。在普通培养的细胞株中,过表达lnc-MALAT1后通过Western blot检测α-SMA等成纤维细胞标志物的表达。染色质免疫共沉淀检测过表达lnc-MALAT1及敲低FOXO1表达对lnc-MALAT1与SIRT1启动子结合的影响。Western blot检测敲低lnc-MALAT1及过表达SIRT1对TGF-β信号通路的影响。结果:在IG12细胞株中,HG组的α-SMA、波形蛋白、结蛋白、胶原蛋白Ⅴ等表达明显升高,lnc-MALAT1表达也明显升高。在普通培养的细胞株中过表达lnc-MALAT1后,α-SMA、波形蛋白、结蛋白、胶原蛋白Ⅴ等表达也明显升高。在IG12细胞系中过表达lnc-MALAT1,lncMALAT1与SIRT1启动子结合增多。在过表达lnc-MALAT1的基础上,进一步用靶向FOXO1的siRNA敲低FOXO1表达,则lncMALAT1与SIRT1启动子结合有所减少。使用siRNA敲低lnc-MALAT1表达,SIRT1和TGF-β1表达降低,SMAD2和SMAD3磷酸化水平降低,但SMAD2、SMAD3总蛋白的表达无明显改变。在使用siRNA敲低lnc-MALAT1表达的基础上过表达SIRT1,TGF-β1表达升高,SMAD2和SMAD3磷酸化水平升高,SMAD2、SMAD3总蛋白表达无明显改变。结论:在高葡萄糖诱导下,lncMALAT1通过FOXO1结合SIRT1启动子促进SIRT1的表达并活化下游TGF-β信号通路,激活了肝星状细胞,促进了糖尿病肝纤维化。

乳腺癌微环境中CD163标记M2型TAM和CD31标记MVD与临床病理特征的关系

目的探讨乳腺浸润性导管癌肿瘤微环境CD163标记M2型肿瘤相关巨噬细胞(TAM)和CD31标记微血管密度(MVD)与患者临床病理特征的关系。方法选取乳腺浸润性导管癌138例作为癌组织组,癌旁正常组织35例为癌旁正常组织组,采用免疫组化EnVision二步法检测两组标本中CD163标记M2型TAM和CD31标记MVD,使用χ^(2)检验分析癌组织组CD163标记M2型TAM和CD31标记MVD分别与乳腺癌临床病理特征的关系,使用Spearman法分析癌组织组CD163标记M2型TAM和CD31标记MVD相关性,利用Kaplan-Meier法分析癌组织组CD163标记M2型TAM和CD31标记MVD与乳腺癌预后的相关性。结果CD163标记M2型TAM和CD31标记MVD在癌组织组高表达率均明显高于癌旁正常组织组(P<0.05);CD163标记M2型TAM在病理组织学分级Ⅲ级中高表达率明显高于Ⅰ级和Ⅱ级,在Ki-67增殖指数≥20%者高表达率明显高于Ki-67增殖指数<20%者,伴有淋巴结转移患者高表达率明显高于无转移者,在HER-2阳性型乳腺癌高表达率明显高于其他分子分型;CD31标记MVD在肿瘤直径>5cm者高密度表达率明显高于肿瘤直径2.0<~≤5 cm者和肿瘤直径≤2.0 cm者,在Ki-67增殖指数≥20%者高密度表达率明显高于Ki-67增殖指数<20%者,在三阴性乳腺癌中高密度表达率明显高于其他分子分型(P<0.05);CD163标记M2型TAM与CD31标记MVD表达呈正相关(r=0.180,P<0.05);CD163标记M2型TAM及CD31标记MVD与乳腺浸润性导管癌患者预后无关(P>0.05)。结论乳腺浸润性导管癌微环境中CD163标记M2型TAM和CD31标记MVD的表达与肿瘤患者多项临床病理特征有关,可能会影响乳腺癌恶性生物学行为。

慢性阻塞性肺疾病稳定期患者正念水平与肺康复治疗依从性的相关性研究

目的研究慢性阻塞性肺疾病(简称:慢阻肺)稳定期患者正念水平与肺康复治疗依从性的相关性,为改善慢阻肺稳定期患者肺康复治疗依从性提供参考意见。方法对399例慢阻肺稳定期患者运用中文版正念量表和康复依从性量表进行测试,了解慢阻肺稳定期患者正念评测及康复依从性测评得分情况,采用多元线性回归分析了解正念水平对慢阻肺稳定期康复依从性行为的影响。结果高正念水平组患者依从性行为优于低正念水平组(P<0.05)。Pearson相关分析提示患者正念总体与康复依从性总体呈正相关(P<0.01)。正念3个维度观察、描述、觉知的行动能联合预测康复依从性55.3%的变异量。结论正念水平对慢阻肺稳定期康复依从性行为具有明显正向作用,积极提高患者的正念水平,有助于改善患者肺康复治疗依从性,从而减少慢阻肺急性加重风险。

大鼠脑损伤CCI打击分级模型的建立与评估

目的建立大鼠可控性皮层撞击(CCI)模型,并观察不同程度脑损伤指标的变化。方法 48只大鼠随机均分为四组:C组不予以撞击作为对照;A1、A2和A3组均给予速度为4m/s打击,时间150ms,打击深度分别为1、2和3mm。观察各组大鼠体重变化、昏迷程度,采用干湿重法测量脑水肿,Morris水迷宫法检测学习记忆功能变化。结果脑损伤程度越重,大鼠体重下降越明显,昏迷时间和潜伏期越长,脑水肿程度越重,空间探索能力越差(P<0.05)。结论 CCI模型重复性好,能较好地复制分级损伤。

小檗碱抗乳腺癌机制研究进展

本文通过整理分析近些年小檗碱抗乳腺癌作用方面相关文献,初步探讨小檗碱抗乳腺癌的机制。研究发现,小檗碱具有阻滞乳腺癌细胞周期,促进凋亡,诱导其分化并抑制其增殖转移的作用,还可通过辅助其他药物和放疗抑制乳腺癌的发生发展。本文就小檗碱抗乳腺癌的作用机制及研究进展作一系统综述,以期为乳腺癌临床治疗提供新思路。