马铃薯原生质体再生植株表现型变异和染色体数目变化

Shepard等首次报道马铃薯(Solanum tuberosum L.)叶肉原生质体再生植株以来,已有80多个品种(品系)从不同来源的原生质体再生了植株。其中某些品种的叶肉原生质体再生植株出现广泛的表现型变异。在染色体的数目、倍性水平、组型和结构上也有变化。本文叙述从我国马铃薯栽培品种(小叶子×多子白)

向日葵下胚轴原生质体高频率愈伤组织形成与根发生

向日葵籽苗下胚轴原生质体，培养在含有ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ和葡萄糖０．５５ｍｇ／Ｌ的改良Ｋａｏ培养基中，２４～２８ｈ后，原生质体开始分裂。包埋在琼脂糖０．６％中的原生质体，培养５ｄ后，分裂频率达９５％以上。生长旺盛的小愈伤组织转移到含有２ｉｐ０．１ｍｇ／Ｌ，ＩＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ，腺嘌呤４０ｍｇ／Ｌ和ＧＡ３０．０１ｍｇ／Ｌ的Ｔｈｏｍｐｓｏｎ液体培养基上１３ｄ后，原生质体诱导的少数愈伤组织发生根分化。

籼稻幼穗细胞悬浮培养物的胚胎发生和植株再生

籼稻幼穗诱导的愈伤组织,培养在MS基本成分并附加1—7 mg/l 2,4-D和5％椰子汁的液体培养基中,得到胚性小细胞团。这些细胞的特征是:形状小而圆,细胞壁薄,细胞内为稠密的胞质所充满,没有或具小的液泡,具淀粉粒。把它们转移到含1 mg/l BA的琼脂培养基中,在扫描电镜下观察到球形、心形、梨形和成熟胚,两周后萌发成具根、芽的完整植株。10—14天龄的悬浮培养物具有较高的再生植株能力。

马铃薯叶肉原生质体再生植株的研究

马铃薯两个品系小叶子 x 多子白和乌盟601的叶肉原生质体在原生质体培养基中诱导出愈伤组织。叶肉原生质体来源的愈伤组织转移到 MS+2mg/l ZT+0.1mg/l IAA 培养基中,培养至70天以后,开始发生芽的分化。待芽生长到2—3cm 高度时,转入 MS+0.05mg/lNAA 培养基中,很快出根长成完整植株。带1—2片叶的茎段移栽入灭菌的混合土壤中生长并结出薯块。

蕉柑组织培养与植株再生的研究

以蕉柑（Ｃｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔａｃｖ．Ｔａｎｋａｎ）实生苗的上、下胚轴及茎段为材料进行培养，结果表明：上胚轴出芽率最高，可达９０％以上．ＭＴ＋ＢＡ１ｍｇ·Ｌ－１对上、下胚轴出芽效果较好，ＢＡ浓度升高，出芽率随之下降．培养时，上、下胚轴均选取苗龄为２０ｄ的实生苗效果较好．外植体在培养基上的接种方式，对出芽也有一定影响，上胚轴切段以形态学下端垂直插入，出芽率高．

农杆菌介导的枳壳转化系统建立研究初报

以枳壳为对象 ,进行了农杆菌介导的上胚轴转化系统建立研究 ,得到了携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的枳壳转化植株。研究表明 :枳壳各类外植体中 ,上胚轴是较好的转化材料 ;上胚轴出芽部位主要在形态学上端。以卡那霉素为选择剂 ,外植体水平面放置时 ,选择剂的剂量是 50～ 70mg/ L。转化研究中发现感染液中乙酰丁香酮 10 0μmol/ L的加入促进转化外植体 Gus表达阳性率的提高。延迟 1a的选择培养 ,有助于 Gus阳性芽的增多。所得 Gus阳性无性系经 Southern blot杂交检测 ,证明外源基因已稳定整合到了植物基因组中 ,所得

影响四季桔器官发生的因素

对四季桔胚轴直接出芽、愈伤组织诱导及植株再生能力的研究表明：上、下胚轴在含有BA的MT培养基上，均能直接出芽，但上胚轴出芽能力明显高于下胚轴，最高出芽率为96．9％。外植体在培养基上的接种方式，对出芽也有一定影响，上胚轴切段以形态学下端垂直插入，出芽率高，且在培养前期表现尤为突出。胚轴愈伤诱导的适宜培养基为MT＋IBA0．5mg-1＋BAgmg-1。愈伤组织分化时，上、下胚轴愈伤组织所要求的BA浓度分别为4mgL-1及2mgL-1。在根的诱导中，附加的生长素种类，不仅影响生根率的高低，而且影响上部茎叶的生长，其中以加入lmgL-1IBA的效果最好，生根率达84．4％。

农杆菌介导转化法构建转CTV-cp的枳壳植株

目的 :采用农杆菌介导法 ,将能抑制病毒侵染的外壳蛋白基因转入枳壳 ,为通过基因转化进行枳壳的抗病育种提供依据和方法。方法 :以枳壳实生苗上胚轴为材料 ,农杆菌菌株为EHA10 1,含有质粒载体 pGA482GG。质粒上插入了 35s启动子驱动的外源目的基因———柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因 (CTV cp)及GUS ,NPTⅡ基因。结果 :枳壳转化试验中 ,抗菌素采用头孢霉素较好 ,浓度为 30 0mg·L-1;以卡那霉素作为选择试剂 ,浓度为 5 0mg·L-1;转化获得的抗性植株 ,GUS检测结果 ,70 .0 %的植株呈阳性反应 ;Southern杂交分析 (Southernblot)鉴定证明外壳蛋白基因已整合到枳壳植株的核基因组中。结论 :通过农杆菌介导的转化法 ,成功地获得了转外壳蛋白基因的枳壳植株。

芥蓝下胚轴离体培养及高频率植株的再生

三个芥蓝品种下胚轴离体植株再生的条件的研究结果表明：下胚轴切口处可直接诱导出芽，诱导“早花尖叶芥蓝”、“中花尖叶芥蓝”和“迟花尖叶芥蓝”直接出芽的最佳激素组合分别为2．0mgL-1BA，0．3mgL-1NAA＋2．0mgL-1BA，0．5mgL-1NAA＋2．0mgL-1BA，其相应的芽发生频率分别为84．6％，86．7％，93．3％。诱导芽发生的最适蔗糖浓度是1％。培养基中加入4．0mgL-1AgNO3和500mgL-1MES可显著提高芽再生频率。再生芽在MS附加0．1mgL-1NAA的培养基上诱导生根形成完整植株。离体再生苗与种子萌发实生苗田间生长外形差别不大，但长势稍慢。

影响沙田柚叶片离体培养的因素研究

研究了离体培养条件下影响沙田柚叶片愈伤组织诱导和分化的一些因素。结果表明 ,2 ,4 D可以诱导愈伤组织的形成 ,高浓度的蔗糖 (6% )显著提高叶片愈伤诱导率与愈伤组织重量 ,且在 2 ,4 D和蔗糖之间存在着相互作用。外源GA3处理抑制愈伤组织的诱导和生长 ,而CCC与ABA处理显著提高叶片的愈伤诱导率和愈伤组织生长量。愈伤组织转移到附加 3 .0mg/LBA的MS分化培养基上可以分化出芽 ,0 .2 5mg/LGA3的加入可以进一步提高愈伤组织的分化率和每块愈伤组织的再生芽数。

提高沙田柚茎尖嫁接成活率的研究

研究了可以影响沙田柚茎尖嫁接成活率的部分因素。结果表明 :当沙田柚接穗选择带 4个叶原基的茎尖、枳壳砧木选择黑暗培养 1 4d的实生苗或培养基中蔗糖浓度选择 7.5 %时各自的嫁接成活率较高。若在茎尖嫁接切口外缠绕 parafilm胶可令成活率明显增加。若在培养基中加入 GA3、6-BA和 IBA则明显抑制嫁接成活率。GA3、6-BA和 IBA处理接穗和砧木均可提高嫁接成活率 ,其中以 1 0 mg/L GA3处理效果最好 ,嫁接成活率可达 45 % ;6-BA和 IBA处理虽然也可提高嫁接成活率 ,但是同时又增加了接穗的脱落死亡率。

枳壳外植体离体再生及农杆菌介导的遗传转化

以枳壳（ＰｏｎｃｉｒｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔａＲａｆ）实生苗的上胚轴及茎段为材料，在附加有ＢＡ和ＭＴ培养基上进行培养，上胚轴出芽率普遍高于茎段，ＢＡ为１ｍｇ／Ｌ时，出芽率最高（８６０％），ＢＡ浓度升高，出芽率随之下降。外植体在培养基上的接种方式，对出芽有一定影响，上胚轴切段以形态学下端垂直插入，出芽率高。枳壳上胚轴进行遗传转化，卡那霉素作为选择试剂，浓度为５０ｍｇ／Ｌ。抑菌剂的使用，以头孢霉素较好，不仅杀菌效果好，且对外植体出芽无明显抑制作用。外植体与农杆菌共培养后，在含卡那霉素的培养基上，抗性芽发生率为１４２％，ＧＵＳ基因表达检测结果，抗性植株中，ＧＵＳ反应呈阳性所占比例为７００％。

生长素与乙烯在沙田柚上胚轴不定芽再生中的作用

结果表明,6 BA只能诱导较低频率的不定芽再生,IBA的加入可以促进不定芽的再生。从再生率与单位外植体再生芽数综合考虑,以高浓度IBA(1.5mg·L 1)与低浓度6 BA(0.5mg·L 1)配合的效果最佳,加入生长素极性运输的调节剂TIBA与Flavone可进一步提高不定芽的再生频率。乙烯抑制上胚轴不定芽的再生,而乙烯生理作用的拮抗剂Ag+与生物合成抑制剂AOA、Co+可以显著提高不定芽再生频率。水杨酸(SA)也抑制不定芽的再生。

农杆菌介导枳壳转化系统的建立及PCR鉴定

目的 建立农杆菌介导的枳壳转化体系。方法 以枳壳实生苗上胚轴为转化外植体 ,农杆菌 Ti质粒上插入了外源目的基因——柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因 (CTV - cp) ,转化植株用 GUS (β-葡萄苷酸酶 )染色及 PCR进行鉴定。结果 枳壳转化试验中 ,2 0 d苗龄的外植体转化再生率较高 ;外植体与农杆菌共培养时间以 2～ 3d为宜 ;乙酰丁香酮能较大提高转化效率 ,转化再生频率为 2 7.5 %。转化获得的抗性植株中 ,GU S反应呈阳性所占比例为 70 .0 %。 PCR分析证实外源目的基因已整合到枳壳转化株的核基因组中。结论 成功地建立了农杆菌介导的枳壳转化系统 ,为利用基因工程的手段进行枳壳的抗病育种奠定了基础。

阳生植物和阴生植物的叶黄素循环与非辐射能量耗散

自然条件下阳生植物和阴生植物的光合速率存在着明显的差距 ,它们拥有不同的适应强光胁迫的能力 ,前者明显强于后者。从叶黄素组分来看 ,阳生植物拥有更大的叶黄素库[紫黄质 (V) +单环氧玉米黄质 (A) +玉米黄质 (Z) ],其中 Z和 [Z+A]的含量更明显高于阴生植物 ;从阳生植物或阴生植物内部来看 ,不同物种间 Z、[Z+A]和 [V+A+Z]含量的差异相对较小 ,A则基本相同 ;不论是阳生植物还是阴生植物 ,非光化学猝灭值与 Z、[Z+A]及 [V+A+Z]含量均呈现较好的正相关关系 ,后三者含量越高 ,非光化学猝灭值越大 ,而且 [V+A+Z]库的大小与 Z含量基本上是成比例增加的。说明在不同植物种间 ,[Z+A](主要是 Z)

中国木薯栽培种通过器官发生再生植株研究

本文研究了中国木薯栽培种四种外植体通过器官发生再生植株的条件。结果表明:在MS附加0.05mg/L TIBA,1mg/L BA的培养基上“NZ 188”初步的萌发胚状体“切头”后切口处可直接产生丛芽,出芽率为43%。“SC201”胚状体子叶块在MS附加0.5 mg/L NAA,0.5mg/L BA的培养基上可直接出芽,出芽率为42%,在MS附加0.5mg/L IBA,1.5mg/L BA培养基上·出芽率为31%,AgNO_3和ABA单独使用或配合使用均不利于芽的再生。“NZ188”胚状体下胚轴在MS附加0.5mg/LNAA,0.5mg/L BA的培养基上形成的愈伤组织转入MS附加1mg/L NAA,2mg/L BA的培养基上,3周后大多数愈伤组织有绿点出现、仅4.4%外植体分化出芽。“HZ188”无菌苗茎段接种在MS附加0.05mg/L TIBA,2mg/LBA的固体培养基上,2周后形成大量愈伤组织,4周后仅见一块愈伤组织分化出芽。

沙田柚茎尖嫁接苗离体培养的研究

对沙田柚茎尖嫁接苗的离体培养进行了研究，结果表明：顶芽在Ｍｓ十０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ上生长较好，成活率为１００％，单个外植体平均不定芽数为２．２，但不定芽生长极慢，成苗困难。加入０．２－０．５ ｍｇ／ＬＩＢＡ，顶芽生长加快，但单个外植体平均不定芽数下降。带有１ ｃｍ长积壳砧木的茎尖在ＭＳ十０．５ｍｇ／Ｌ６-ＢＡ上可以形成丛芽，单个外植体平均不定芽数为４．５，而且不定芽生长迅速。虽然我们未能诱导外植体不定根发生，但通过试管嫁接可以获得完整植株。

柑桔无病原体苗培育研究进展

简述了柑桔无病原体苗培育的 2种主要方法 :热处理法和组织培养法。其中重点介绍了利用珠心培养、胚珠培养以及茎嫁接脱除柑桔病原体的研究现状和最新进展 。