基于网络药理学探讨丹参治疗类风湿关节炎的潜在分子机制

目的基于网络药理学探讨丹参治疗类风湿关节炎的分子机制。方法利用中药系统药理数据库与分析平台(TCMSP)获取丹参的活性成分及靶点,与GeneCards、OMIM数据库获取的类风湿关节炎疾病基因靶点映射,构建药物-活性成分-疾病靶点网络。DAVID数据库中进行基因本体论(GO)功能富集和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果从丹参中筛选到56种活性成分,作用靶点基因100个;检索类风湿关节炎疾病靶点基因1640个;取丹参与类风湿关节炎疾病靶点基因交集共得到44个共同靶点,其中13个为关键靶点。获得96条GO生物学过程和25条KEGG信号通路,涉及免疫调节、炎症反应及细胞凋亡等。结论丹参可能通过多成分、多靶点网络来治疗类风湿关节炎。

刺梨果多糖对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及机制研究

目的探讨刺梨果多糖对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及机制。方法在0、2、4、6、8、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法检测A549细胞增殖情况。在0、2、6、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞24、48 h后,采用细胞划痕实验测定A549细胞的迁移情况;Transwell实验测定A549细胞侵袭情况。在0、2、6、10 g·L^(-1)刺梨果多糖干预A549细胞48 h后,采用流式细胞术(PI单染法)测定A549细胞周期;流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染法)测定A549细胞的凋亡情况;Real-Time PCR法测定A549细胞的周期、凋亡相关基因表达水平;Western Blot法测定A549细胞的周期、凋亡相关蛋白表达水平。结果(1)干预24、48、72 h后,与对照组(0 g·L^(-1))比较,刺梨果多糖2、4、6、8、10 g·L^(-1)组的A549细胞生长受到显著抑制,细胞的存活率显著降低(P<0.05,P<0.01),刺梨果多糖干预48 h的IC50值为6.109 g·L^(-1),后续实验采用2、6、10 g·L^(-1)浓度作为刺梨果多糖低、中、高剂量。(2)干预48 h后,与对照组比较,刺梨果多糖2、6、10 g·L^(-1)组的A549细胞迁移距离显著增加(P<0.05,P<0.01),细胞侵袭数量显著减少(P<0.05,P<0.01);刺梨果多糖6、10 g·L^(-1)组的G0/G1期、G2/M期细胞比例均显著升高(P<0.05,P<0.01),S期的细胞比例显著降低(P<0.01);刺梨果多糖2、6、10 g·L^(-1)组A549细胞的G0/G1、G2/M期相关调控因子CDK-4、CDK-6、CyclinD1、CDK-1、CyclinB1 mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P<0.05,P<0.01);A549细胞的凋亡率均显著升高(P<0.01);凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01);促凋亡Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01),抗凋亡Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论刺梨果多糖能够抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,阻滞细胞周期于G0/G1和G2/M期,并通过线粒体通路和死亡受体通路诱导A549细胞凋亡。

滇产刺梨多糖的提取纯化及其结构分析

目的:探讨刺梨多糖提取和纯化的方法。方法:采用热水提取醇沉法从刺梨果实中提取多糖,在单因素实验的基础上,以响应面实验对刺梨多糖的提取工艺进行优化。采用Cellulose DEAE-52和Sephadex G-100柱对刺梨粗多糖进行分离纯化,Sevage法脱蛋白,D-101吸附树脂脱色素,FT-IR、HPGPC和HPLC测定分子量和单糖组成。结果:刺梨多糖是一种以Glc为主要成分的均一性酸性多糖。

响应面法优选穿心莲多糖大孔树脂脱色工艺及其抗氧化活性研究

为了明确大孔树脂脱除穿心莲多糖中色素的工艺参数,研究大孔树脂添加量、脱色时间以及脱色温度对穿心莲多糖脱色效果的影响,采用响应面法优选大孔树脂脱除穿心莲多糖色素的工艺,并探究穿心莲多糖的体外抗氧化活性。结果表明,穿心莲多糖大孔树脂最佳脱色工艺为大孔树脂添加量3.0g/100mL多糖溶液,脱色温度50℃,脱色2.0h,脱色1次。基于该工艺条件,穿心莲多糖色素去除率可达81.35%,多糖保留率73.16%,穿心莲多糖色素去除率和多糖保留率的加权综合评分77.25,表明该穿心莲多糖大孔树脂脱色工艺稳定,可用于穿心莲多糖中色素脱除的生产实际。抗氧化试验结果表明,穿心莲多糖对·OH自由基有较好的清除作用,其具有一定的抗氧化活性。

响应面法优化地参多糖大孔树酯脱色工艺及其抗氧化活性研究

目的:考察大孔树酯用量、脱色温度和脱色时间对地参多糖的脱色率和保留率的影响。方法:在单因素试验的基础上,以多糖脱色率和保留率2个指标的综合评分作为响应值,响应面法优化大孔树酯脱除地参多糖色素的工艺,并探究地参多糖的抗氧化活性。结果:地参多糖大孔树酯最佳脱色工艺为质量浓度6mg/mL的地参多糖溶液100mL,添加充分溶胀的大孔树酯3g,脱色温度45℃、脱色3h、脱色1次。在此条件下,多糖脱色率为82.64%,多糖保留率为72.06%,综合评分82.15,与理论综合评分(83.34)的相对误差为1.43%。当地参多糖质量浓度为0.5mg/mL时,对ABTS自由基的清除率达到44.28%。结论:响应面试验优化得到的地参多糖大孔树酯脱色工艺稳定可行,地参多糖具有较好的抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂开发利用。

中药多糖提取物脱色工艺研究进展

中药多糖提取物中常含有多种色素而颜色变深,影响多糖活性和分子结构的鉴定。本文综述了常用多糖脱色方法如生物法、活性炭法、过氧化氢法、树脂吸附法等的研究进展,并对未来中药多糖脱色除杂工艺进行了展望。

滇产刺梨果总多酚的提取工艺优化及抗氧化活性研究

以刺梨果总多酚提取率为考察指标,使用乙醇回流法提取刺梨果总多酚。基于单因素试验,正交试验优化提取工艺,并探讨刺梨果总多酚的抗氧化活性。结果表明:最佳提取工艺参数:料液比1∶20(g/ml),提取温度60℃,乙醇体积分数55%,提取时间3 h,提取次数1次。在该工艺条件下,刺梨果总多酚提取率为(1.76±0.03)%。刺梨果总多酚对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)氧自由基和2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)氮自由基的清除能力均优于抗坏血酸,表明刺梨果总多酚对DPPH氧自由基和ABTS氮自由基均有较好的清除作用,IC50值分别为7.5μg/ml和8.3μg/ml,提示刺梨果总多酚具有较好的抗氧化活性。研究结果为刺梨果总多酚的开发利用提供基础。

响应面法优化苦胆草多糖脱色工艺

为了确定过氧化氢法脱除苦胆草多糖中色素的最佳工艺,以多糖脱色率、多糖保留率2个指标的综合评分为考查指标,在单因素试验的基础上,响应面优化过氧化氢法脱除苦胆草多糖中色素的工艺条件。结果表明,过氧化氢法色素最佳工艺为脱色温度55℃,脱色时间209 min,过氧化氢体积分数2.73%,脱色1次。在该工艺条件下脱除色素,得到多糖脱色率为72.43%,多糖保留率为87.24%,综合评分为79.8,与预测值80.08相比,误差为0.3%。回归方程与实际情况拟合较好,表明该脱色工艺稳定可靠。

地参多糖抗人恶性黑色素瘤的作用及机制研究

目的 探讨地参多糖(LLP)抗人恶性黑色素瘤A375细胞的作用及机制。方法 在LLP(0、10、20、30,60 mg·mL^(-1))干预A375细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法检测细胞的增殖。在LLP(0、30、60 mg·mL^(-1))干预A375细胞24、48 h后,采用划痕实验检测细胞迁移能力;干预48 h后,采用Transwell小室检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;Real-Time PCR法检测细胞凋亡、周期相关基因的表达;Western Blot法检测细胞凋亡、周期相关蛋白的表达。结果 与对照组相比,LLP在10~60 mg·mL^(-1)范围对A375细胞的增殖具有显著抑制作用,细胞存活率显著降低(P<0.05,P<0.01),且呈浓度、时间依赖性;30、60 mg·mL^(-1)LLP处理细胞48 h后划痕宽度明显增加(P<0.05,P<0.01);LLP 30、60 mg·mL^(-1)组穿过小室的细胞数量均显著减少(P<0.01),G0/G1期和G2/M期的细胞比例均明显升高(P<0.05,P<0.01),S期的细胞比例显著降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.05,P<0.01);LLP 30、60 mg·mL^(-1)组A375细胞的Cyclin B1、CDK-1基因表达水平明显降低(P<0.01),Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),细胞周期相关调节蛋白CDK-4、CDK-6、Cyclin D1、CDK-1、Cyclin B1蛋白表达均明显下调(P<0.05,P<0.01),促凋亡蛋白Caspase-9、Caspase-3、Caspase-8、Bax蛋白表达均明显上调(P<0.05,P<0.01),抑制凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论 LLP能有效抑制A375细胞的增殖、侵袭和迁移,阻滞其细胞周期于G0/G1期和G2/M期,并通过死亡受体通路和线粒体凋亡通路诱导其凋亡。

响应面法优化滇产地参多糖的提取工艺及其抗氧化活性研究

研究旨在探究滇产地参多糖的最佳提取工艺及其抗氧化活性。以多糖得率为考察指标,采用热水浸提乙醇沉法提取地参多糖。基于单因素试验结果,采用响应面法优选地参多糖的提取工艺,探讨地参多糖的抗氧化活性。结果显示,滇产地参多糖的最佳提取工艺参数为液料比20 mL/g,浸提温度70℃,浸提时间3 h,浸提次数3次,在此条件下,地参多糖的得率达到(31.69±0.78)%。滇产地参多糖对DPPH自由基和ABTS自由基均具有较好的清除作用。研究表明,试验得到的地参多糖提取工艺稳定可行,地参多糖具有较好的抗氧化活性。

刺梨果多糖提取工艺优化及抗氧化活性研究

以刺梨果为原料,采用水提醇沉法提取刺梨果多糖。以多糖得率为考察指标,通过单因素试验结合正交试验,确定刺梨果多糖最佳提取工艺参数,并探究其抗氧化活性。结果表明:梨果多糖最佳提取工艺参数为提取时间4 h、提取温度70℃、料液比1∶30(g/mL)、提取3次,在此条件下刺梨果多糖得率为(25.15±0.78)%。刺梨果多糖对DPPH自由基和ABTS自由基均有较好的清除作用,IC_(50)分别为0.124 mg/mL和0.113 mg/mL,表明刺梨果多糖具有一定的抗氧化活性。

刺梨果多糖对黑素瘤A375细胞的作用及其机制

目的:探讨刺梨果多糖对黑色素瘤A375细胞增殖、迁移、侵袭、周期以及凋亡的影响。方法:通过细胞增殖试验、划痕试验、Transwell试验检测刺梨果多糖对A375细胞增殖、迁移、侵袭的作用;流式细胞术、实时荧光定量PCR技术和蛋白质免疫印迹技术检测刺梨果多糖对黑素瘤A375细胞周期和凋亡相关调控因子表达的影响。结果:刺梨果多糖显著抑制黑素瘤A375细胞增殖、迁移和侵袭,且呈时间和剂量正效应;抑制A375细胞CDK-1和CyclinB1的表达,阻滞细胞周期于G2/M期;显著上调凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达量,下调抗凋亡Bcl-2蛋白的表达,诱导A375细胞凋亡。结论:刺梨果多糖能够抑制黑素瘤A375细胞的增殖并促进细胞凋亡。

玛卡多糖抗非小细胞肺癌作用及其机制

目的:探讨玛卡多糖抗非小细胞肺癌作用及其机制。方法:采用一定浓度的玛卡多糖处理非小细胞肺癌A549细胞,CCK-8法、划痕实验和Transwell小室检测玛卡多糖对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响;流式细胞术检测玛卡多糖对A549细胞周期和凋亡的影响;实时荧光定量PCR和Western Blot法检测细胞周期和凋亡相关因子的表达。结果:玛卡多糖能显著抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭;细胞周期被阻滞在G_(0)/G_(1)期和G_(2)/M期;实时荧光定量PCR结果显示,CDK-1和Cyclin B1的表达显著降低,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达显著升高;Western Blot结果发现,周期相关蛋白CDK-1、Cyclin B1、CDK-4、CDK-6、Cyclin D1的表达显著降低,凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax的表达显著升高,Bcl-2的表达显著降低。结论:玛卡多糖能够抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖并促进细胞凋亡。