我国猪瘟流行现状及净化之路

猪瘟(Classical swine fever,CSF)在全球多个地区仍在流行,对养猪业带来巨大打击和经济损失。当前我国猪瘟防控程度较好,疫情态势平稳,偶有散发,但猪瘟的存在不利于健康养殖,影响猪肉市场及品质,因此有必要开展猪瘟净化工作。随着养猪产业不断升级,小散户逐渐退出市场,猪瘟监测技术成熟完善以及政府大力推动动物疫病净化,开展猪瘟净化时机日趋成熟,但猪瘟净化面临着非典型猪瘟、混合感染、免疫失败、动物移动等问题和挑战。本文将从我国猪瘟流行态势与防控现状,猪瘟净化的必要性与策略、面临的问题与挑战以及借鉴欧美猪瘟净化经验,采取猪瘟净化措施手段等方面进行阐述,以期为我国猪瘟净化提供理论帮助。

猪细小病毒血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清的制备与鉴定

猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)血凝抑制试验抗原、阳性血清和阴性血清在猪细小病毒制品的效力检验中不可或缺,对猪细小病毒相关生物制品的质量控制至关重要。试验采用PPV 7909株病毒同步接种PK-15细胞制备血凝抑制试验抗原,用制备的抗原乳化后免疫豚鼠制备阳性血清,同时用未免疫的阴性豚鼠制备阴性血清。对抗原、阳性血清和阴性血清进行鉴定,结果表明,制备的PPV血凝抑制试验抗原HA效价达1∶512;阳性血清HI效价达1∶1024;阴性血清HI效价小于1∶8,且特异性均良好。用制备的HI试验抗原与不同PPV疫苗株的阳性血清进行HI试验,同时,用制备的阳性血清、阴性血清与不同PPV疫苗株的灭活抗原进行HI试验。结果表明,制备的抗原与阳性血清具备良好的血清学交叉反应性,制备的阴性血清与不同疫苗株抗原均呈阴性反应,可用于PPV制品的统一评价。

尼帕病毒检测技术研究进展

尼帕病毒(Nipah virus,NiV)是一种人畜共患的高致病性病毒,人感染NiV后,死亡率接近40%;猪作为中间宿主,感染NiV后具有高发病率和高死亡率特点。近年来,NiV疫情在我国相邻的多个东南亚国家频繁出现,预示该病传入我国风险日益增高。通过介绍近年来NiV在血清学诊断和分子学诊断技术方面的研究进展,包括临床常用的传统技术以及重组蛋白ELISA、Luminex、二代测序等新兴诊断方法,为临床样本中NiV的鉴定和监测方法更新换代提供参考,对监测NiV从国外的传入情况、防控猪群NiV疫情发生以及守护公共卫生安全具有重大意义。

细胞外囊泡在病毒生命周期中的作用

细胞外囊泡(EVs)具有一种源自细胞质膜或多囊体(MVB)的脂质双分子层球状膜性结构,其外部结构和释放过程与部分病毒类似。本文介绍了EVs的结构、分类及其对病毒入侵宿主和病毒组装的重要影响。分析表明,EVs作为细胞内容物的运输工具,是调节局部细胞微环境和远距离信号传导的关键介质,并且对病毒入侵宿主和病毒组装过程具有重要调控作用,而病毒感染使EVs在细胞之间以及细胞内发挥的作用更加复杂。本文旨在通过对EVs在病毒生命周期中的作用进行归纳总结,对病毒感染过程中EVs的功能有更深入的了解。

单个B细胞抗体制备技术研究进展

单克隆抗体在疾病预防、诊断和治疗方面具有重要意义,尤其在免疫机制研究方面具有突出贡献。随着单克隆抗体制备技术的发展,单个B细胞抗体制备技术成为新一代快速制备单克隆抗体的方法。该技术利用每个B细胞仅可产生一种特异性抗体的特性,直接筛选出分泌特异性抗体的B细胞,对其表达抗体重链和轻链的基因进行克隆和体外表达,从而获得特异性单克隆抗体。相较传统抗体制备技术,该技术具有快速、高效、产量高等优点,且表达的抗体具有天然构象,不仅可用于病原微生物相关抗原的抗体开发、病毒跨种传播机制等研究,还在抗肿瘤治疗、抗自身免疫病等方面发挥重要作用。本文主要对单个B细胞抗体制备过程和应用现状进行综述,以期为单克隆抗体制备技术的发展和完善提供参考,促进其更好地应用于相关领域。

牛结节性皮肤病的生物安全防控

牛结节性皮肤病(Lumpy skin disease,LSD)是《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》中的一类传染病,在新疆出现之后迅速在全国范围扩散,对我国的奶牛和肉牛养殖业造成严重经济损失。LSD主要通过在边境地区的动物贸易或虫媒活动传入未发生疫情的国家,疫苗接种被认为是防控LSD疫情最有效的方法之一。各国根据本土疫情的传播情况,制定了不同的疫苗接种计划,目前用来预防LSD的疫苗主要为针对不同病原的减毒活疫苗。但是,在防控LSD的同时也造成了生物安全风险,导致重组疫苗样毒株引发的疫情从中亚向东亚迅速蔓延。只有将切断传播途径、保护易感动物和管控生物安全相结合,才能有效预防LSD疫情爆发,促进养殖业的繁荣发展。

鸭胚中鸭坦布苏病毒的分离与鉴定

从山东省某种鸭场送检的鸭胚中分离到1株鸭坦布苏病毒（TMUV）,命名为SDBZ株。根据Gen Bank上已发表的TMUV NS3基因序列设计一对引物,利用RT-PCR对该分离株NS3基因扩增并测序,将获得的SDBZ株NS3基因与Gen Bank中的11株TMUV及10株其他黄病毒属病毒基因进行对比分析。结果表明,该分离株NS3与Gen Bank上已发表的TMUV-WZDu、SDLY、JS804的同源性可达98.9%,与其他黄病毒属病毒基因同源性较低,为53.7%～77.2%。该研究结果为证明TMUV垂直感染提供了流行病学依据。

关于加快我国实验室生物安保发展的几点建议

近年来,随着对病原微生物和各种传染性疾病研究的深入,我国生物实验室数量越来越多,完善实验室生物安保体系对于保护科研人员和社会安全具有重大意义。本文首先明确了实验室生物安保和实验室生物安全的区别与联系,而后指出我国存在生物安保相关法规制度不完善,实验室实施环节生物安保能力较为薄弱等问题,并借鉴WHO和部分发达国家的生物安保法规以及实施现状,提出了完善制度法规,加强实验室实施环节能力建设,强化生物安保培训,加强风险评估认识等适合我国生物安保发展现状的相关建议,以期为完善我国生物安保体系,加快生物安保发展提供参考。

猪口蹄疫特点、流行情况及疫苗使用现状

口蹄疫是危害我国畜牧业的主要传染病之一,主要感染猪、牛、羊等偶蹄动物,其中猪口蹄疫不同于牛、羊口蹄疫,有其独特特点。本文聚焦猪口蹄疫,从其特点、全球流行情况以及我国疫苗使用现状等方面进行了阐述和分析,以期为我国猪口蹄疫防控提供参考。

稳定高效表达猪CD163的Marc-145细胞系的构建与鉴定

试验旨在构建一株高效表达猪CD163(pCD163)的Marc-145细胞系,为猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的临床分离和疫苗生产奠定基础。根据GenBank中序列设计引物从猪肺泡巨噬细胞(PAM)中扩增pCD163基因,将其插入真核表达载体pCI-neo构建真核表达质粒pCIpCD163,将该重组质粒转染Marc-145细胞,通过G418筛选、单克隆化并扩大培养筛选获得表达pCD163的Marc-145细胞系,IFA、Western blotting鉴定其表达情况。IFA结果显示,构建的pCD163-Marc细胞系中荧光明显亮于普通Marc-145细胞;Western blotting结果显示,pCD163-Marc细胞系中CD163蛋白表达量约为对照Marc-145细胞中CD163蛋白表达量的8.7倍。且该细胞系可稳定传至20代,各代次之间表达量无差异。证明高效表达猪CD163的Marc-145细胞系构建成功。

小太阳鹦鹉禽多瘤病毒感染病例分析

目的确诊某宠物鹦鹉饲养场的小太阳鹦鹉幼雏发生大规模发病死亡疫情的病原.方法对送检的发病幼雏进行临床剖检及病理组织学观察,取其肝脏组织提取DNA进行禽多瘤病毒、喙羽病病毒、腺病毒核酸检测.结果发病鹦鹉均以肝坏死、肠道出血等消化系统病变为主,胸腺、法氏囊等免疫器官也有一定程度病理损伤.病原检测结果显示所有发病鹦鹉均为禽多瘤病毒阳性,喙羽病病毒、腺病毒阴性;对PCR扩增产物测序后分析显示,该分离株与台湾流行的鹦鹉禽多瘤病毒同源性最高.结论该病例的发现提示我国应加大对宠物鹦鹉禽多瘤病毒的检测力度,防止输入性感染,鹦鹉饲养场应进行禽多瘤病毒净化,并采取有效的生物安全措施防止带毒鹦鹉的引进.