从云南军犬及人群发现埃立克体抗体

云南地处亚热带、热带地区,气候湿润,适宜许多节肢动物滋生,人兽共患病较多。临床上经常出现发热待诊病例或暴发原因不明热病流行,许多病例的发生可能与接触蜱类有关。为了解该地区与蜱有接触人群和军犬感染立克次体和螺旋体的情况,特别是否有埃立克体感染的存在,我们于1991年8月～1992年2月对云南中南部地区的军犬和部份人群的血清作埃立克体、斑点热立克次体、Q热立克次体及莱姆病螺旋体抗体检测,证明除Q热外,其他均出现阳性。关于埃立克体感染的调查,为国内首次报道。

重庆地区2135例浅部真菌病患者病原学分析

目的:了解重庆地区浅部真菌病病原菌菌种分布特点。方法:对2005年1月—2006年12月收集的2135例浅部真菌病临床标本进行直接镜检、培养及菌种鉴定。结果:镜检阳性率为66.5%,培养阳性率为55.7%。菌种分布主要为:红色毛癣菌872株(68.2%),犬小孢子菌50株(3.9%),须癣毛癣菌48株(3.8%),念珠菌及酵母样菌173株(13.5%),曲霉26株(2.0%),青霉11株(0.9%)。结论:①重庆地区浅部真菌感染中,皮肤癣菌仍占主导地位。男性皮肤癣菌的镜检及培养阳性率均高于女性,冬季癣菌的检出率低于春、夏、秋三季。②红色毛癣菌为优势致病菌,但其在15岁以下年龄组患者中的感染率明显低于其他年龄组。

重症监护及移植病房环境真菌监测研究

目的研究重症监护及移植病房环境中真菌的浓度,菌种分布类型,并分析其与季节、温湿度、通风状况以及病房内活动人员的关系,为医院真菌感染的预防和治疗提供参考。方法2005年11月4日-2006年10月24日,对西南医院肝移植病房、脑外ICU与中心ICU空气、物体表面、水源以及外界空气等环境标本进行每月两次的分离培养。结果肝移植病房、脑外ICU、中心ICU及外界空气真菌浓度分别为123.63、139.90、7.00、214.00CFU/m3;空气和物体表面中常见的5种真菌为青霉属、枝孢霉属、链格孢霉属、曲霉菌属和酵母菌属;水源中常见真菌为酵母菌属、假丝酵母菌属、曲霉菌属、青霉属、红酵母属;肝移植病房和脑外ICU空气真菌浓度与病房温度、湿度具有相关性;而与活动人员不具有相关性。结论真菌广泛存在医院环境中,空气中真菌全年均有分布,且5-6、9-10月为2个高峰期,室内外峰期基本一致。

马尔尼菲青霉菌病1例实验诊断报告

目的介绍1例艾滋病合并播散性马尔尼菲青霉菌病的实验诊断,探讨该菌的培养、鉴定特点。方法通过真菌直接镜检、大培养、小培养、组织病理学检查和染色观察。结果马尔尼菲青霉菌早期培养菌落比较典型。晚期菌落颜色变化较多。37℃培养,镜下多呈鹿角样或杆状的粗短菌丝。涂片、组织学检查易与其他青霉菌、内脏利氏曼小体、组织胞浆菌等混淆。结论马尔尼菲青霉菌病诊断的"金标准"仍是真菌培养鉴定。

鞭毛染色法染色条件的探索

目的：探索一套细菌鞭毛染色法的最佳化条件。方法：采用不同琼脂浓度的培养基中生长的变形杆菌，以不同菌液浓度制成涂片，染色，对比其在不同媒染剂、媒染时间、染色液和染色时间条件下的影响。结果：通过对不同染色条件进行优化筛选，确定了一套最佳条件。结论：改进后的染色法所需试剂少，染色时间短，操作简单，鞭毛着色清晰，重复性好。

肺病患者呼吸道曲霉定植状况及相关因素分析

目的了解肺病患者呼吸道曲霉定植及分布状况,为曲霉感染的防治提供参考。方法收集有呼吸道症状患者的鼻腔、咽部分泌物及支气管肺泡灌洗液进行真菌培养及鉴定。结果曲霉在鼻腔中广泛定植,但肺病患者的鼻腔中曲霉的检出比例远大于健康人群(P<0.01)。老年肺病患者的鼻腔和支气管肺泡灌洗液中曲霉检出率明显高于中青年患者(PNC<0.01,PBALF<0.05)。肺部恶性肿瘤患者与肺结核、肺部细菌感染患者的支气管肺泡灌洗液中曲霉检出率有显著差异(P<0.01)。"长期应用广谱抗生素、糖皮质激素、免疫抑制剂、化疗药物等","合并血液系统疾病"以及"合并糖尿病"3个因素是对呼吸道曲霉定植有显著影响的易感因素。结论曲霉在肺病患者和健康人群的呼吸道中均有定植,但肺病患者中的定植率较高。其定植和分布状况与年龄老化、肺部肿瘤、长期使用抗生素等药物、合并某些系统性疾病等因素密切相关。

甄氏外瓶霉致暗色丝孢霉病

报告1例甄氏外瓶霉感染所致的暗色丝孢霉病。患者男,59岁。右小腿外踝上方肿块伴瘙痒5个月,皮损为一直径约3 cm的暗红色斑块。皮损组织病理PAS染色见分隔菌丝,组织块马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上25℃培养长出黑色酵母样菌落,分离菌株最高生长温度37℃,小培养下见分枝分隔菌丝,环痕产孢,分生孢子聚集在环痕梗顶端,分离菌株ITS1区测序结果与甄氏外瓶霉98.54%同源。根据分离菌株生物学特点,菌株被确定为甄氏外瓶霉。

抗白念珠菌芽管单抗MAb03.2C1-C2特异性及临床初步应用研究

目的分析抗白念珠菌芽管胞壁外膜抗原单克隆抗体MAb03.2C1-C2的特异性及其应用于实验室检测的可行性。方法用临床分离白念珠菌、致病非白念的念珠菌的孢子、菌丝及常见的酵母菌、细菌做抗原包被,用间接免疫荧光(IIF)方法,对单抗特异性进行分析。取临床口腔念珠菌病患者的真菌涂片菌丝阳性的标本,用IIF方法检测。结果MAb03.2C1-C2仅与白念珠菌芽管或菌丝特异性地结合,与白念珠菌的孢子不发生结合。13种非白念的念珠菌孢子和菌丝、新型隐球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均不能与该单抗相结合。59例口腔念珠菌病真菌涂片IIF试验阳性的标本最终鉴定为白念珠菌(100%)。结论MAb03.2C1-C2对白念珠菌芽管有高度的特异性,并可用于口腔念珠菌病真菌涂片中白念珠菌的早期诊断。

由咽拭子发现的非HIV感染的播散性马尔尼菲青霉病的诊断与治疗

目的明确诊断并治疗1例由咽拭子发现的非HIV感染的播散性马尔尼菲青霉病的罕见病例。方法收集患者咽拭子及痰液行真菌培养,采集患者肿大淋巴结行组织病理学检查,对真菌孢子DNA进行分子鉴定,同时给予两性霉素B及伊曲康唑治疗。结果咽拭子及痰液双相真菌培养均有菌落生长:25℃呈青霉相,产生红葡萄酒色素,光镜下见典型帚状枝;37℃呈酵母相,光镜下见椭圆形及腊肠形酵母样菌体。淋巴结组织PAS染色示腊肠状的菌体相互黏集呈葡萄状外观,中间有横隔。菌种分子鉴定与GenBank中马尔尼菲青霉基因完全一致。确诊为“播散性马尔尼菲青霉病”。给予两性霉素B以及伊曲康唑联合抗真菌治疗效果显著。结论对于某些原因不明发热、伴广泛肺部炎性浸润和全身淋巴结肿大的患者,在使用广谱抗生素或者正规抗结核治疗无效时,应注意作真菌学的相关检查。

白念珠菌ATCC-90028菌丝相的诱导

目的在不同培养条件下,观察白念珠菌芽管形成率。方法在3种不同培养基中,分别进行不同浓度的孢子振荡培养(pH7.35,37℃),诱导白念珠菌芽管的形成。结果RPMI1640、DMEM培养液中孢子密度为5×106/L时,芽管形成率最高(大于95%)。结论优化培养条件以提高白念珠菌芽管形成率。

Majocchi肉芽肿1例临床分析及其病原菌分子鉴定

分析我科收治的1例Majocchi肉芽肿的临床、病理特点、真菌学及分子生物学鉴定结果,并对文献进行复习。该患者以右侧面颊部红色斑块状损害10余年为主要症状,病理检查示上皮样细胞肉芽肿,PAS染色见分枝分隔菌丝。活检组织培养出丝状真菌,37℃生长良好。分子生物学ITS1、ITS2和D1/D2区测序结果示:病原菌与红色毛癣菌标准株ATCC28188的相似性为100%。本病例为耐热型红色毛癣菌引起的Majocchi肉芽肿。

胶体金渗滤法检测贝氏柯克斯体的研究

本文建立一种快速、敏感、适于基层应用的贝氏柯克斯体 (俗称Q热立克次体 )的检测方法。将Q热立克次体多克隆抗体点于硝酸纤维素薄膜上 ,用以捕获待检标本中的Q热立克次体抗原 ,通过胶体金标记的鼠抗Q热立克次体单克隆抗体直接显色 ,阳性者出现红色斑点。结果表明 ,用该法检测Q热立克次体实验感染豚鼠血液 ,小鼠肝或脾 ,蜱血淋巴等标本取得了较满意的结果 ,整个过程仅需 5～ 6分钟。与其他病原体无交叉反应 ,敏感度不低于 5 0ng立克次体。胶体金渗滤法在检测Q热立克次体抗原时特异性好 ,敏感性略低 ,但操作简便 ,快速 ,结果观察直观 ,对Q热的快速诊断和流行病学研究有重要价值 ,适于基层应用。

118株口腔致病念珠菌病原学特征及药敏结果分析

目的调查分析临床致病口腔念珠菌菌种分布及对氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素、5-氟胞嘧啶和酮康唑的药物敏感性,以提供临床用药依据。方法收集口腔真菌感染患者标本,常规涂片镜检、培养,对酵母样生长菌落用生物梅里埃公司API20AUX进行菌种鉴定。对其中的念珠菌进行药敏分析。结果共收集141例临床口腔真菌病标本,其中118株念珠菌中,白念珠菌87株(73.7%),热带念珠菌15株(12.7%),高里念珠菌6株(5.1%),光滑念珠菌4株,其他念珠菌6株。口腔念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素、5-氟胞嘧啶和酮康唑的耐药率分别为5.1%、1.7%、0%、3.4%、5.1%。结论解放军324医院口腔真菌感染主要为长期应用抗生素的老年患者。口腔念珠菌病仍以白念珠菌为主,对常用抗真菌药物呈不同程度的耐药,应进行真菌常规菌种鉴定及药敏试验。

茶树新品种──唐茶1号选育报告

茶树新品种──唐茶１号选育报告陆家顶，陆鸣放，陆砥柱，李瑞章，李芹阶，陆吉军，刘凯旋（湖南省安化县唐溪乡茶场安化·４１３５０８）（湖南省安化农业局经作站安化·４１３５００）１选育概况云台山大叶种（群体），１９６５年和１９８４年先后两次被认定为国家级地...

马杜拉分支菌引起下颌部真菌性足菌肿一例

目的探讨1例真菌性足菌肿的临床病理特点、诊断、治疗及预后,并对其致病菌进行鉴定。方法分析我科收治的1例下颌部真菌性足菌肿的临床及病理特点,进行真菌学及分子生物学鉴定。结果该患者以下颌部肿胀、多发窦道形成、排大量黑色颗粒为主要症状,病理检查示化脓性肉芽肿性炎症,PAS染色可见大量藕节状真菌菌丝。ITS1、ITS2和D1/D2区测序结果示:病原菌与足菌肿马杜拉分支菌有最大的相似性,但相似性小于97%。结论本病例为发生在下颌部的由马杜拉分支菌属内一新的菌种引起的真菌性足菌肿。

重症监护和肝移植病房环境及高危人群曲霉监测和分析

目的探讨侵袭性曲霉病与医院环境曲霉污染是否有关。方法对西南医院肝移植病房、脑外科ICU病房和中心ICU病房环境及高危患者鼻腔、咽部和痰液标本进行监测培养.采用随机扩增多态性DNA分析方法对分离自环境和患者体内的黄曲霉进行基因分型研究。结果肝移植病房、脑外科ICU病房、中心ICU病房空气曲霉密度分别12、10.75 cfu/m^3和0。医院环境中5种常见的曲霉依次为黄曲霉、烟曲霉、黑曲霉、杂色曲霉和棒曲霉。RAPD分析显示,脑外科ICU 2例患者体内分离的黄曲霉与病房环境分离的黄曲霉基因型相同;中心ICU病房3例患者体内分离的黄曲霉与病房环境分离的黄曲霉基因型均不相同,但2例患者体内分离的黄曲霉基因型相同。结论肝移植病房、脑外科ICU病房和中心ICU病房存在不同程度曲霉污染,脑外科ICU 2例患者体内分离的黄曲霉和环境中分离的黄曲霉基因型相同。

特异性HPV16E7 CTL表位肽-MHCI复合物单抗的制备及鉴定

目的制备抗HPV16E7CTL表位(49-57)-MHCI类分子复合物的特异性单克隆抗体,并对其敏感性、特异性及亲和力进行鉴定,为今后研究HPV16感染后机体对病毒蛋白的免疫呈递途径研究奠定基础。方法制备高纯度的HPV16E7CTL表位(49-57)肽RAHYNIVTF,将其与TAP缺陷的RMA-S细胞孵育后免疫BALB/c小鼠,常规收集小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选杂交瘤细胞株的阳性克隆,并对其进行一系列鉴定。结果筛选出的杂交瘤细胞株能稳定分泌抗HPV16E7(49-57)-MHCI类分子复合物的单抗,不仅能与装载有RAHYNIVTF的TAP缺陷的RMA-S细胞结合,也能与具有内源性抗原处理能力的RMA细胞结合,但不能与装载有类似变异肽(进行氨基置换后的RAHYNIVTF)或乙肝病毒对照肽的RMA-S或RMA细胞反应,具有良好的敏感性、特异性及亲和力。结论本实验制备表位肽-MHCI类复合物单抗的方法,对今后研究包括HPV16感染在内的病毒感染免疫有很大的临床应用价值。

穿膜肽对HPV16E7细胞毒性T细胞表位MHC-Ⅰ类抗原提呈影响的初步研究

目的研究穿膜肽(Tat_(49-57))对HPV16E7 MHC-Ⅰ类限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位(E7_(49-57))在抗原提呈细胞内经MHC-Ⅰ类途径被提呈的动力学影响。方法应用多肽固相合成技术,分别合成含穿膜肽与HPV(人乳头瘤病毒)16E7惟一HLA-A_2/H2-K^(b+)限制性CTL表位E7_(49-57)的融合多肽,同时合成该表位N端自然延伸的抗原肽和无关对照肽。采用流式细胞仪(FACS)分析技术,检测抗原提呈细胞(APE)在不同时相点对上述各抗原肽进行MHC-Ⅰ类提呈的情况。结果在与APC孵育早期,Tat- E7_(49-57)在短时间内即被APC快速提呈并进入MHC-Ⅰ类抗原提呈途径,提呈的效率略低于E7_(49-57)(P>0.05);在孵育的后期,与Tat-E7_(49-57)组孵育的APC细胞表面,E7_(49-57)/K^b复合物存在时间较其他组明显延长(P<0.05)。结论在外源性抗原肽中引入穿膜肽可明显促进其MHC-Ⅰ类限制性CTL表位的提呈效率,从而有效增强外源性抗原肽的免疫原性。