吹扫捕集/气相色谱-质谱法同时测定环境水样中5种三卤甲烷

通过优化吹扫捕集前处理条件,建立了水中5种三卤甲烷(一溴二氯甲烷、一氯二溴甲烷、二氯碘甲烷、溴氯碘甲烷和碘仿)同时测定的吹扫捕集/气相色谱-质谱方法。将采集的水样过滤后,移于顶空瓶中,通过吹扫捕集前处理将待测物从水中吹脱,再用捕集器吸附待测物,随后经热解吸进入气相色谱柱分离,质谱检测器测定,外标法定量。在优化的测定条件下,5种三卤甲烷在0.50~50.0μg/L质量浓度范围内,线性良好,相关系数(r)≥0.9991,检出限为0.001~0.02μg/L,定量限为0.0030~0.060μg/L,回收率为96.4%~103.4%,相对标准偏差(RSD)为0.96%~5.8%。建立的方法简便快捷,具有高特异性和高灵敏度,适用于水中5种三卤甲烷的同时测定,可为环境水中三卤甲烷的日常监测提供技术支持。

壳聚糖固定化血管紧张素转化酶及其性质

以壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂固定化血管紧张素转化酶,研究了酶固定化的最优条件和固定化酶的性质.结果表明,在戊二醛质量分数为2.5%、给酶量为8mg/mL时,固定化酶的比活性最大,为0.085U/g.固定化酶在40～50℃,pH在7～9之间有最大活性,其米氏常数Km为2.39mmol/L.同时,固定化酶具有良好的稳定性,可重复利用.

亲和阵列-色谱联用筛选中药活性成分新方法:钓鱼法

提出了基于亲和阵列及色谱联用系统的中药及天然产物活性成分高通量筛选方法。相对于先纯化后筛选的方法,利用先亲和再分离鉴定的方法更像从大量的鱼群中钓鱼,钓钩上的鱼饵不同,上钩的鱼会有差异。鱼饵类似于各种不同的生物作用靶点,将各类靶点固定后进行亲和吸附,吸附后的成分再进行色谱分离及色谱联用技术进行结构鉴定,将大大提高生物活性成分筛选的命中率。通过各类靶点亲和柱进行阵列后,可同步提高不同靶点筛选的通量。因此我们称这种筛选方式为:钓鱼法。以此方法为基础,介绍了从中药中筛选血管紧张素转换酶抑制剂的过程。

山楂提取物对脂肪酶活性的抑制作用研究

建立从中药山楂中筛选脂肪酶抑制剂的气相色谱法，探讨山楂提取物对脂肪酶的抑制活性及机理。以三丁酸甘油酯为底物，采用猪胰脂肪酶抑制剂活性筛选模型对各组分进行筛选。通过气相色谱对产物正丁酸与内标物己酸的峰面积比值进行定量分析。在0．10-5．00mmoL／L范围内，正丁酸与内标物己酸的峰面积比值线性关系良好，得到线性方程为Y=1．5269x-0．0723（R2=0．9987）。计算得水、乙醇、氯仿和乙酸乙酯提取物IC50分别为17．44、7．0、2．91me／mL和1．31mg／mL。Dixon图和Lineweaver-Burk图表明山楂提取物对胰脂肪酶的抑制作用为非竞争性抑制，Ki=0．91g／L。实验研究表明，山楂的乙酸乙酯提取物是脂肪酶的有效抑制剂。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定蜂蜜中16种生物碱

目的建立超高效液相色谱-串联质谱方法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定蜂蜜中吡咯里西啶类、雷公藤类、马桑内酯和异喹啉类共16种生物碱。方法样品加水超声提取过膜后,以苯基色谱柱分离,甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾正离子(ESI+)模式下采用多反应监测模式(multiple reactions monitoring,MRM)进行测定。基质匹配标准曲线法定量。结果目标化合物在给定的线性范围内线性关系良好,r均≥0.99;方法的定量限为0.005~5μg/kg;3个不同浓度加标水平下,该方法平均回收率范围为60.5%~117.5%,相对标准偏差在0.8%~8.7%之间。采用该方法对40份蜂蜜样品进行检测,其中15份样品检出了小檗碱,含量为0.05~4.61μg/kg;三份样品检出千里光菲林,含量分别为14.3、17.6和17.8μg/kg。结论该方法操作简单,回收率高,重现性好,适用于蜂蜜中多种生物碱的同时测定。

油基顶空-气相色谱-质谱法测定化妆品中甲醛研究

目的开发油基顶空-气相色谱-质谱联用技术,用于测定化妆品中甲醛的含量。方法N,N-二甲基甲酰胺经净化去除甲醛本底后作为样本分散提取剂,顶空-气相色谱-质谱法测定化妆品中的甲醛。结果通过对色谱条件、顶空条件和样本分散溶剂进行优化,甲醛在1~400 mg/L范围内,峰面积与浓度线性关系良好,回归方程相关系数r=0.9993;甲醛在不同剂型化妆品中低、中、高3个浓度水平的加标回收率在90.1%~105.2%之间,相对标准偏差在1.8%~3.7%之间;方法检出限为5 mg/kg,定量限为10 mg/kg。对市售6种不同类型共8批次的化妆品样本进行了测定,其中6份样本检出甲醛,含量在15.1~49.7 mg/kg之间。结论本法采用N,N-二甲基甲酰胺作为分散剂,利用对脂溶、水溶性化合物均有较强的溶解能力,达到对各种基质化妆品样本较好的分散效果;同时利用其沸点高,通过控制顶空温度,采用顶空-气相色谱质谱法测定,有效降低了基质干扰。该方法操作简单,抗干扰能力强,灵敏高,准确可靠。

气相色谱法测定脂肪酶的活力

本文发展了一种以气相色谱检测脂肪酶活力的方法。以三丁酸甘油酯为底物,通过气相色谱对产物正丁酸进行定性定量分析。正丁酸在0.11～11.35mmol·L-1内线性关系良好,回归方程为:y=45464x-3115.2,r=0.9968。反应时间仅需5min,最适pH值和温度分别为7.5和32℃。低、中、高3个浓度正丁酸的回收率分别为90.3%,104.6%和89.4%;RSD分别为3.01%,4.50%和6.64%。通过实验测定出Km=0.25mmol·mL-1,奥利司他的半数抑制浓度(IC50)为0.0485mg·mL-1。本方法具有反应体积小、操作简单、快速、灵敏等特点。

气相色谱-质谱法测定新鲜食用蘑菇中37种脂肪酸

目的建立新鲜食用蘑菇中同时测定37种脂肪酸的气相色谱-质谱(GC-MS)法,并对市售新鲜蘑菇中脂肪酸进行检测及营养调查。方法样品中的脂肪酸经提取、皂化、甲酯化后,以正己烷提取,采用SP-2560毛细管气相色谱柱(100 m×0.25 mm×0.2μm)进行气相色谱-质谱分析检测,以十九碳酸甲酯为内标定量。结果 37种脂肪酸在其浓度范围内均呈现良好的线性关系,线性相关系数r≥0.999,方法的最低检测限为0.1 mg/100 g^0.4 mg/100 g;回收率为76.3%~108.3%;相对标准偏差为3.17%~7.62%。对采集的6种新鲜蘑菇进行检测,发现竹荪中不饱和脂肪酸含量最高且种类最多。结论本法具有操作简单,灵敏度高,定性定量准确等特点,适用于新鲜蘑菇中37种脂肪酸的检测,为食用菌类植物中营养成分的监测和评估提供了技术支持。

基质分散固相萃取联合在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱法测定湖南省市售茶叶中9,10-蒽醌的含量

目的建立基质分散固相萃取(quick,easy,cheap,effective,rugged and safe,QuEChERS)联合在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱(gel permeation chromatography-gas chromatography-mass/mass spectrometry,GPC-GC-MS/MS)测定茶叶中9,10-蒽醌含量的快速检测方法,并对湖南省内市售茶叶进行9,10-蒽醌残留量检测和结果分析。方法茶叶中的9,10-蒽醌以1:1环己烷-乙酸乙酯提取后,经QuEChERS方法净化,进GPC-GC-MS/MS联用仪分析检测,以同位素d8-蒽醌内标法定量。结果茶叶中的9,10-蒽醌在1~100μg/L浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为y=0.0311x-0.0023,相关系数r=0.9997,方法的检出限为2μg/kg,检测限为5μg/kg;加标回收率为75.8%~98.4%,相对标准偏差2.6%~6.6%(n=6)。对湖南省14个地州市市售茶叶进行检测,发现存在一定程度的9,10-蒽醌污染,且超标率较高。其中,黑茶和红茶的检测结果中位数为35.1μg/kg和25.9μg/kg,污染程度明显高于乌龙茶和绿茶。结论该方法具有仪器自动化程度高,前处理快速简单,溶剂消耗少,灵敏度高,定性定量准确等特点,适合大批量茶叶样品中9,10-蒽醌的快速筛查检测。

亲和色谱法筛选中药中血管紧张素转化酶抑制剂

以壳聚糖微球为载体、戊二醛(glutaraldehyde,GA)为交联剂对血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)进行固定化.用固化的ACE作为亲和介质,利用血管紧张素转化酶抑制剂(Angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI)与ACE之间的亲和作用,结合高效液相色谱对亲和前后的体系进行检测,比较两者各组分色谱峰的差异,以此实现快速筛选复杂体系中的ACE抑制剂.应用赖诺普利(Lisinopril)、九肽抑制剂、依那普利(Enalapril)、培哚普利(Perindopril)、卡托普利(Captopril)等已上市的ACEI对方法进行验证,反映方法具有高度选择性.将方法应用于中药地龙及山楂筛选,发现共有5个组分与ACE有亲和作用,并且都能抑制ACE酶活性,它们对酶活性抑制的IC50值在0.45～4.62μg/mL范围.通过对亲和方法重现性考察,6次测定的相对标准偏差小于1%,说明方法可靠.提出的亲和色谱-色谱指纹差异法非常适合于从中药及天然产物等复杂混合物库中快速筛选靶点活性物质.

尿液和血浆中蘑菇毒肽测定的方法学研究

目的开展尿液和血浆中3种鹅膏毒肽和3种鬼笔毒肽测定的方法学研究。方法尿液和血浆样本经乙腈沉淀蛋白后,HLB固相萃取柱萃取净化,超高效液相色谱-串联质谱法测定α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基三羟鬼笔毒肽6种蘑菇毒肽,基质匹配制作工作曲线,外标法定量;对样本测定条件进行优化,减小基质干扰以提高方法的灵敏度;研究方法的适用性,考察方法的专一性、线性、灵敏度、精密度和加标回收率。结果尿液和血浆中6种毒肽的检出限均低于0.06 ng/ml;在0.2-20 ng/ml范围内,线性关系良好;相关系数R2均大于0.999 3;相对标准偏差均小于12.1%;对于上述两种基质,加标回收率在79.6%-104.8%之间。结论方法灵敏、准确、专一性好,适合于突发毒蕈中毒事件中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基三羟鬼笔毒肽的确证分析,也适合对中毒患者临床治疗进行效果评价。

葛根软胶囊中总黄酮含量测定提取条件优选

目的 研究葛根软胶囊中总黄酮含量测定提取方法的最佳水平组合。方法 采用紫外分光光度法测定,以总黄酮含量为试验效应,以聚酰胺粉的粒径、乙醇浓度、超声功率和超声温度为试验因素,选择L9（34）正交试验设计筛选最佳水平组合。结果 最佳测定组合为70%乙醇浓度、200 W功率,60℃超声,60-80目聚酰胺粉柱层析,验证试验总黄酮含量测定为3.49 g/100 g。结论 通过实验优选出了葛根软胶囊中总黄酮含量测定提取方法的最佳水平组合,验证实验结果满意,避免了因提取不当而导致测得的总黄酮含量偏低。

固相萃取-气相色谱/质谱法检测潲水油中的辣椒素类物质

目的建立离子交换固相萃取-气相色谱/质谱检测油脂中辣椒素类物质的新方法。方法油脂类样品通过正已烷稀释、分散后,乙腈提取其中待测物,并经固相萃取浓缩、净化,氨化甲醇洗脱,衍生后气相色谱-质谱(gas chromatography-mass sepetrometry,GC-MS)测定。结果新方法对辣椒素类物质的检出限可达0.001 mg/kg,在浓度0.003~0.50 mg/kg范围内线性关系良好,样品加标回收率为84.0%~116%,相对标准偏差≤5.1%(n=5)。结论新方法灵敏、准确,检测辣椒素类由烹饪过程带入而非油脂固有的成分,作为鉴别潲水油的手段,具有良好的操作性。

2014年湖南地区淡水产品脂肪酸组成及分析

目的对湖南地区多种淡水产品的脂肪酸组成进行调查研究。方法监测湖南省各地区具有代表性的淡水产品,取其可食部分进行气相色谱检测,统计分析获得脂肪酸指纹图谱。结果共监测18种淡水产品,每种淡水产品检出脂肪酸14~26种。其中饱和脂肪酸12种,含量0.74~3143 mg/100 g;单不饱和脂肪酸9种,含量1.23~2790 mg/100 g;多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFA)10种,含量1.75~2832 mg/100 g,多不饱和脂肪酸中,n-6与n-3的比值范围0.24∶1~15.7∶1。结论湖南地区淡水产品脂肪酸组成以不饱和脂肪酸为主,多数淡水产品富含n-3 PUFA,且n-6 PUFA与n-3 PUFA的比值小于6,有利于食用人群的营养膳食平衡,其脂肪酸的组成及含量具有理想的营养价值。

气相色谱-质谱法测定水中丁香酚类麻醉剂及其代谢物的研究

目的建立水中丁香酚类麻醉剂及其主要代谢物的气相色谱-质谱检测方法。方法待测物通过HLB固相萃取小柱富集,经乙酸乙酯洗脱,使用气相色谱-质谱法测定。结果方法对丁香酚等物质的检出限可达0.01μg/L,样品加标回收率为78.6%-104%,相对标准偏差≤7.0%(n=5)。结论新方法灵敏、准确,可用于环境水体中丁香酚类鱼用麻醉剂及其主要代谢物污染的检测。